科研产出
甘蔗果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶基因(F2KP)的克隆及其功能研究
《农业生物技术学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(fructose-6-phosphate,2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase,F2KP)是影响生物碳积累和分配的调控关键酶,同时也是一个具有激酶和酯酶两种催化活性的双功能酶。本研究在已获得甘蔗(Saccharum officinarum)蔗叶F2KP(命名为SoF2KP-L)的基础上,以蔗茎cDNA为模板克隆获得不同长度的同源片段,分别命名为SoF2KP-S1、SoF2KP-S2和SoF2KP-S3。生物信息学分析结果显示,SoF2KP-L翻译的蛋白具有完整的激酶和酯酶结构域,SoF2KP-S1、SoF2KP-S2和SoF2KP-S3所含开放阅读框长度均小于SoF2KP-L,其中SoF2KP-S1翻译的蛋白只具残缺的激酶结构域;SoF2KP-S2翻译的蛋白具完整激酶结构域但缺失酯酶结构域;SoF2KP-S3只能翻译数个氨基酸即终止翻译。选择双功能域完整的SoF2KP-L构建表达载体,农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化烟草(Nicotiana tabacum)。RT-PCR证实,SoF2KP-L在转基因植株成熟叶中转录表达。碳水化合物等生理指标测定结果表明,转基因植株成熟叶片中可溶性总糖/淀粉、还原糖/淀粉、蔗糖/淀粉比值均有不同程度的升高,碳水化合物含量和相关分配比率发生改变。研究结果提示,甘蔗中可能存在不同的F2KP转录产物,并初步证实甘蔗SoF2KP-L在光合组织中对蔗糖和淀粉的分配起到一定的调控作用,为进一步研究甘蔗F2KP基因的功能及为甘蔗分子育种提供参考依据。
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舟山近海棘头梅童鱼群体遗传多样性微卫星DNA分析
《台湾海峡 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：应用6对可在棘头梅童鱼(Collichthy lucidels)中扩增的大黄鱼(Pseudosciaena Crocea)微卫星引物对浙江舟山近海的棘头梅童鱼群体进行PCR扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析扩增产物.6对引物在群体中共扩增出46个等位基因,平均每个位点得到5.308 0个有效等位基因,各位点的PIC值为0.412 6~0.893 5(平均值0.670 8),PC1C4和PC8F5为中度多态性位点,PC4H12、PC5E11、PC10F10及PC10G6为高度多态性位点,这些位点可以做为棘头梅童鱼群体遗传学研究的有效的分子遗传标记.6个位点的连锁分析显示,各位点间不存在明显的连锁关系.各位点在群体中的观测杂合度(Ho)为0.454 5~0.916 7(平均值0.659 1),期望杂合度(He)为0.468 0~0.901 9(平均值0.699 7),与其他海水鱼类比较,浙江近海的棘头梅童鱼群体遗传多样性偏低.对各位点进行Hardy-Weinberg平衡检测表明,PC4H12、PC10F10及PC10G6位点的等位基因频率偏离了平衡,综合现有的资源调查资料,遗传多样性的降低与近年来棘头梅童鱼资源的下降有关.
关键词： 海洋生物学 棘头梅童鱼 大黄鱼 微卫星 遗传多样性 舟山近海
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海水鱼配合饲料中无机砷测定方法研究
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：研究了海水鱼配合饲料中无机砷的测定方法。采用6mol/L盐酸溶液为介质,在70℃水浴中浸提1h,再用活性炭吸附分离浸提液中有机砷等有机物质后,以氢化物发生-原子荧光光谱法(HG-AFS)测定海水鱼配合饲料及其原料样品中无机砷含量。方法前处理简单、快速,方法检出限0.08mg/kg;加标回收率85.5%～109.7%;精密度(RSD)2.6%～9.8%;线性范围0～400μg/L。用相同样品在4个实验室间进行方法复核验证结果表明:精密度和准确度均符合检测要求,可以用于实际样品的检测。
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航天搭载后福橘(Citrus reticulata Blanco)茎尖无性系有丝分裂行为和细胞超微结构的变化
《核农学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：福橘(Citrus reticulata Blanco)茎尖经‘实践八号’育种卫星搭载后,经组织培养获得其再生植株,以此为材料,结合常规压片法与超薄切片技术,研究航天搭载对福橘当代无性系细胞有丝分裂行为及细胞超微结构的影响。结果表明:航天搭载对福橘茎尖具有诱变作用,所得13个诱变无性系中,有丝分裂过程存在不同程度的异常,其中‘08004’无性系植株的有丝分裂畸变率明显高于其他无性系:中期染色体数目异常畸变率为0.34%,落后染色体畸变率为0.69%,微核畸变率为0.86%;并且有丝分裂过程中纺锤体结构发生异常,可见C-形(0.17%)或S-形纺锤体(1.20%),细胞发生多极分裂(1.03%)。绝大多数航天搭载当代无性系的细胞超微结构正常。‘08004’无性系植株叶肉细胞超微结构呈现细胞程序性死亡(PCD)典型特征:细胞核内染色质凝集;叶绿体类囊体结构解体;出现自体吞噬小体;细胞液泡化并发生质壁分离,最终形成凋亡小体。PCD过程中,线粒体保持其结构完整性,直至PCD末期才发生结构变化。
关键词： 航天育种 福橘 有丝分裂 纺锤体 超微结构 染色质凝集 自体吞噬小体 细胞程序性死亡
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活动式植物无土栽培盘的研究设计
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：鉴于无土栽培技术的日趋成熟及其运用推广的日益扩大,简要分析当前中国无土栽培技术特点和存在的缺陷,针对性地研究设计出一种可活动的植物无土栽培盘。对这种活动式植物无土栽培盘的总体结构和工作原理进行细致研究,并全面阐述其创新点。最后选取3种叶用蔬菜与常规无土栽培进行对比试验,结果表明:生菜、空心菜、西洋菜其成活率分别提高了9.3%、9.7%和8.9%,其栽种效果明显好于常规的栽培盘,既提高了间苗期的成活率,又降低了育苗期的材料成本,具有一定的应用前景。
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双孢蘑菇SCAR标记的建立及在菌株群鉴定中的应用
《中国食品学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：根据15条具有菌株群特异性的SRAP、ISSR、RAPD扩增产物DNA条带测序结果,设计64对SCAR引物,其中6对引物能成功扩增出目的条带,即有6条特异片段(A、C、E、G、H、J)被成功转化为SCAR标记。通过这6个SCAR标记的不同组合,将40个双孢蘑菇菌株分为9个类群和6个类群,与基于SRAP、ISSR、RAPD资料的聚类分析结果的组间距离值取13和16时的分类结果完全吻合。对A片段的SCAR-PCR检测结果是:可从40个双孢蘑菇菌株中鉴别出双孢蘑菇333号菌株(编号01)。
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枇杷酒中苹果酸乳酸发酵优良乳酸菌的分离与鉴定
《中国食品学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：目的:分离获得高耐受二氧化硫的枇杷酒苹果酸乳酸发酵(MLF)菌,为果酒生物降酸提供优良乳酸菌资源。方法:采用平板划线法,从自然发酵的枇杷酒中分离乳酸菌,并通过耐受性试验筛选优良的MLF乳酸菌;通过形态学特征、生态学特征、生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析法对目标菌进行鉴定。结果及结论:R23和R35分别被鉴定为植物乳杆菌(Lactobac illus plantarum R23)和干酪乳杆菌(Lactobac illus casei R35);R23与R35均具有MLF能力,且可耐受120mg/L的总SO2浓度,是2株优良的枇杷酒MLF菌。
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