科研产出
龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-5的克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达
《福建农林大学学报(自然科学版) 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以龙眼体胚发生早期的胚性培养物为材料,通过简并引物结合PCR进行cDNA末端快速克隆(RACE)的技术,克隆到了龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-5全长序列,其cDNA全长为887 bp,由681个核苷酸组成的开放阅读框,编码226个氨基酸(GenBank登陆号为GQ443759).该基因推导的蛋白分子质量为24511.9 u,理论等电点pI为9.65;该蛋白是Frigi-da-like蛋白质家族成员,是一个具有Frigida组件,无典型信号肽结构,无跨膜螺旋的亲水性蛋白;不规则卷曲是其最大量的结构元件,并且主要集中在C端区域.实时荧光定量PCR分析结果显示,该基因在龙眼体胚发生过程中均有表达,呈"N"形趋势,其中以不完全胚性紧实结构阶段最高,而鱼雷形胚阶段表达量最低;方差分析表明,鱼雷形胚阶段DlUP-5基因表达量与其他7个阶段存在极显著差异.该研究结果对DlUP-5基因在龙眼体胚发生过程中的作用有了一个初步的认识,其在龙眼胚性愈伤组织胚胎发生能力、早期体胚正常发育和体胚成熟过程等方面可能起重要作用.
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基于Android平台和3G技术的农业智能诊断系统设计
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：由于3G网络覆盖面广,可靠性高,无线传输数据量大,同时安卓系统是掌上操作系统的主流,因此我们设计了基于Android平台和3G技术的农业智能诊断系统,不受时间、空间的限制,向广大的种养植户提供技术咨询、病虫害诊断、疫病防控等。
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表达广谱抗真菌蛋白转基因水稻元素组成分析
《中国食品学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：应用环境扫描电子显微镜和能谱分析方法研究转广谱抗真菌基因碱性几丁质酶基因RC24、苜蓿葡聚糖酶基因β-1,3-Glu、酸性几丁质酶基因RAC22对不同生长期非转基因水稻(七丝软占)和转抗真菌水稻(双价抗真菌转基因水稻转品8、三价抗真菌转基因水稻转品1)抗病元素化学元素组成差异。分析结果表明:除C、H、O外,水稻叶、叶鞘主要含有Si、K、Na、Cl、Mg5种与抗病相关的化学元素,其中Si的相对含量为10%～15%,K、Na相对含量为0.2%～3.6%,Mg、Cl相对含量较低,大部分样品小于1%。外源基因的转入对水稻叶、叶鞘化学元素相对含量有一定影响,其中Si、K、Na的相对含量变化明显,差异最明显的分别达50.8%,115.3%,251.9%。存在时空变化,其机理尚待研究。
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三株鸭源H9N2亚型禽流感病毒福建株全基因的测序及遗传进化分析
《中国兽医科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为明确3株鸭源H9N2亚型禽流感病毒福建株A/Muscovy duck/Fujian/CL/1997(H9N2)(简称CL株)、A/duck/Fujian/MH/2003(H9N2)(简称MH株)和A/duck/Fujian/FQ2/2007(H9N2)(简称FQ2株)全基因组的分子特征和遗传进化情况,采用RT-PCR方法扩增这3株病毒全基因片段,并进行序列比较及遗传进化分析。结果表明,所克隆的8个基因片段均有完整的开放阅读框,其血凝素基因蛋白裂解位点的氨基酸组成为-RSSR*GLF-,为不连续的碱性氨基酸,其静脉接种指数远小于1.2,均符合低致病性AIVHA蛋白裂解位点特征;CL株和MH株的HA基因在遗传进化上属于常见的CK/BJ/1/94群系;FQ2株HA基因在遗传进化上属于DK/HK/Y280/97群系,3株H9N2亚型AIV HA基因在遗传进化上均属于经典的欧亚种系。3株H9N2亚型AIV NA基因颈部均存在缺失,CL株和MH株的NA基因在遗传进化上属于常见的CK/BJ/1/94群系,FQ2株NA基因在遗传进化上属于G1群系。CL株和MH株的其他6个基因在遗传进化上均和经典的CK/BJ/1/94一致,而FQ2株则可能是由不同流感病毒基因亚系间发生自然重排的产物。
关键词： 鸭源H9N2亚型禽流感病毒 全基因 序列分析 遗传进化
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紫云英ISSR引物的筛选及PCR反应体系的优化
《植物遗传资源学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以紫云英为研究材料,用哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物和11种株系紫云英品种的DNA为模板进行PCR扩增,筛选出33条扩增条带较好的ISSR引物,对其中的ISSR引物进行梯度PCR,筛选出最佳的退火温度。再采用正交试验和单因素试验相结合的方法对紫云英ISSR-PCR反应体系的5种因素(模板、Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化浓度。确立了适合紫云英的ISSR分析的反应体系。在25μl反应体系中,其反应浓度为:DNA模版50.00ng,Mg2+2.00mol/L,Taq聚合酶1.0 U,dNTP 0.25mmol/L,引物0.20μmol/L,2.5μl 10×buffer。本试验为以后利用ISSR技术进行紫云英遗传多样性分析和物种保护奠定了技术基础。
关键词： 紫云英 退火温度 ISSR引物 正交试验 体系优化
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龙眼体细胞胚发生早期的蛋白质组学
《中国农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】通过龙眼(Dimocarpus longan Lour.)体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质组学研究,为植物胚胎发育相关蛋白基因分离和植物体细胞胚发生相关机制等的深入研究奠定基础。【方法】利用已建立的龙眼体细胞胚发生再生系统,经同步化培养获得龙眼体细胞胚发生早期5个阶段胚性培养物,并采用双向电泳和质谱技术对龙眼体细胞胚发生早期的蛋白质组变化进行分析。【结果】龙眼体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质2D表达谱可检测到1 203—1 798个蛋白点,其在龙眼体细胞胚发生早期各阶段大部分具有阶段差异表达特性,有小部分是阶段特异表达,根据其蛋白数目、表达丰度、分子量和等电点等变化,确定了龙眼体细胞胚发生早期的ECII到CpECGE阶段是体细胞胚发生早期的关键性阶段。成功鉴定45个差异蛋白,成功率为37%,其中以能量、碳水化合物代谢相关蛋白和氧化胁迫反应相关蛋白占多数,分别为22%和27%;通过其功能分析可以推断出,龙眼体细胞胚发生早期,能量和糖代谢是体细胞胚发生的基础,而氧化胁迫反应是体细胞胚发生的先决条件,并通过参与细胞骨架的稳定、氮代谢、信号转导、基因调控、蛋白质的翻译加工修饰和定位等功能的蛋白,构成一个庞大的龙眼体细胞胚发生蛋白质调控网络系统,保证体细胞胚的正常发育。【结论】对龙眼体细胞胚发生早期过程的蛋白质表达变化有了较全面的了解,蛋白质表达数量呈先减低后升高再减低的趋势,龙眼体细胞胚发生早期能量和糖代谢旺盛,氧化胁迫反应相关蛋白对体细胞胚早期的发生和发育有重要的调控作用。
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福建地区副猪嗜血杆菌的主要生物学特性
《中国兽医科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为明确福建地区副猪嗜血杆菌的耐药性、血清型及其外膜蛋白P5(OmpP5)的同源性,对来自福建地区的患病猪进行了副猪嗜血杆菌的分离与鉴定,并采用琼脂扩散试验对其进行血清型鉴定和药敏试验;选取10株不同血清型代表株进行致病性试验;测定5株不同血清型菌株的OmpP5基因序列,比较相互间的同源性及与其他生物学特性的关系。结果显示,分离株的生化特性基本一致,代表株对小鼠有一定的致病性;所有分离菌株具有一种以上的耐药性,100%的菌株对青霉素、氨苄青霉素、新霉素和洁霉素敏感,93%和87%的菌株分别对链霉素和杆菌肽耐药;分离获得的52株菌株分属于5种血清型,其中24株为血清13型,12株为血清4型,11株为血清5型,2株为血清2型,3株未定型;5株代表菌株中OmpP5基因序列的同源性在93%以上,氨基酸序列同源性在91%以上。研究表明,该外膜蛋白P5基因与菌株的血清型和菌株的致病性无直接关系。
关键词： 副猪嗜血杆菌 血清型 耐药性 致病性 外膜蛋白P5基因
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南方珍珠豆型花生籽仁蛋白质积累及亚基肽组分分析
《中国农学通报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为研究南方珍珠豆型花生荚果发育过程中,蛋白质的积累及各类蛋白亚基的分布、可溶性蛋白质相对浓度变化规律,采用凯氏定氮法和SDS-PAGE电泳分析花生籽仁蛋白质及亚基肽组分,利用Bio-RadImagelabTM分析软件对花生蛋白质条带的相对浓度进行测算。结果表明,珍珠豆型花生籽仁蛋白质含量随生育进程,在开花40～50天急剧增加,后平缓上升。花生蛋白质合成积累一直伴随花生籽仁发育的全过程中,蛋白质高值出现在成熟期。因基因型的差异蛋白质合成积累的速度和强度有所不同,蛋白质增长曲线存在差异。花生蛋白种类存在较高的多态性,不同基因型花生,蛋白质的亚基构成不同,蛋白质积累过程的亚基条带数量均比成熟时丰富。不同基因型花生可溶性蛋白质相对浓度存在差异。可溶性总蛋白质相对浓度的峰值在70～80天,蛋白质亚基相对浓度分布在0.01～4.59,不同基因型存在差异。亚基相对浓度变化可分未缺型和缺失型2类亚基,缺失型亚基有前期缺失、中期缺失、后期缺失和前后期缺失亚型;前期缺失、中期缺失亚型亚基与未缺型亚基共同形成不同基因型花生的蛋白质构成。后期缺失亚型和前后期缺失亚型亚基在花生蛋白质积累的某个时期参与花生蛋白质的合成,终因后期被降解而得不到表达。2种基因型花生蛋白质亚基相对浓度变化除68kDa条带呈抛物线型积累外,其余条带均呈波动性积累。
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无鱼粉蛋白饲料必需氨基酸平衡模式研究
《粮食与饲料工业 》 2012 北大核心
摘要：研究以罗非鱼肉作为参考蛋白模式,采用5种化学分析方法评估无鱼粉罗非鱼实验配方及对照组中必需氨基酸的营养价值。结果表明实验配方及对照组的氨基酸组成合理,必需氨基酸平衡。配方1的必需氨基酸指数、氨基酸比值系数分及必需氨基酸相对比值均优于其他各组,各实验配方组的必需氨基酸的化学评分都达到了平衡。养殖试验的结果表明:实验配方1为最佳配方组,氨基酸组成模式基本符合罗非鱼生长的营养需求,罗非鱼的增重率为158%,饵料系数为124%。因此利用无鱼粉饲料氨基酸的平衡,可有效提高罗非鱼的生长性能、饲料转化率及蛋白效率。
关键词： 罗非鱼 鱼粉 饲料配方 氨基酸平衡 化学评价 养殖试验
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闽引2号圆叶决明的适应性研究
《草地学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选出更优质的亚热带豆科牧草,从澳大利亚牧草种质资源中心(ATFGRC)引进的41个决明属牧草中筛选出闽引2号圆叶决明(Chamaecrista rotundifolia‘Minyin 2’,原品系号ATF3248),并于2011年通过全国草品种审定委员会审定。1997-2010年进行品种比较试验、区域试验和生产试验,结果表明:闽引2号圆叶决明系多年生直立型热带豆科牧草,干草产量达12000～15000kg.hm-2,比对照品种闽引圆叶决明(C.rotundifolia‘Mi-nyin’)增产27.7%以上,种子产量200～400kg.hm-2,比对照品种增产25%以上(P<0.05),盛花期植株含粗蛋白质16.9%,适宜在我国热带、亚热带红壤山地种植。
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