科研产出
抗生链霉菌200-09的抗真菌活性成分研究
《中国抗生素杂志 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：目的研究一株抗生链霉菌次级代谢产物中的抗真菌活性物质。方法对抗生链霉菌200-09的发酵菌丝体采用95%乙醇提取,经过硅胶柱层析、Sephadex LH-20分子排阻层析、ODS开放柱层析和制备型反相高效液相色谱等手段,对具有抗真菌活性的乙酸乙酯部位进行了化学成分的分离纯化和结构鉴定,并采用纸片法和MTT法分别对化合物进行抗白念珠菌和细胞毒活性检测。结果从中分离得到了17个单体化合物。通过NMR、MS等方法,并结合与文献数据比对,鉴定分离得到的化合物分别为抗霉素A_(1a)(1)和A_(1b)(2)、A_(2b)(3)、A_(3a)(4)和A_(3b)(5)、A_(7b)(6)、A_(10a)(7)和A_(10b)(8)、A_(15)(9)、A_(16)(10)、kitamycin A(11)、urauchimycin B(12)、deisovaleryblastomycin(13)、streptomyceamide C(14)、麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6α-三醇(15)、麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(16)、过氧化麦角甾醇(17)。结论化合物3、6~13及15~17均为首次从抗生链霉菌种中分离得到,化合物1~13均有抗白念珠菌和细胞毒活性,其中化合物1~10的抗白念珠菌活性显著。
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坦桑尼亚晚花剑麻的组培快繁
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：剑麻是中国热区最重要的麻类经济作物,中国剑麻主栽品种H.11648经过近五十年的种植,出现了明显的早衰早花现象,给剑麻产业带来了严重的经济损失。为此,我们实验室从坦桑尼亚引进了几株晚花品种(A.sisalana Perr ex.Engelm)。为了将来能开展品种评比实验和杂交育种,需要对该晚花品种进行组培快繁。为此,我们以晚花剑麻吸芽苗的茎尖为外植体,比较了不同消毒方法、植物激素浓度配比对晚花剑麻组培快繁的影响,结果表明:最佳消毒方法为75%乙醇1 min+0.1%升汞30 min;芽增殖最佳培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L;生根最佳培养基为MS+IBA 1.5 mg/L。
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香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系的建立
《中国农业科学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系,为在香蕉上利用CRISPR/CAS9技术开展香蕉基因功能研究和香蕉育种工作开辟新的路径。【方法】根据香蕉A基因组八氢番茄红素脱氢酶(phytoene dehydrogenase,PDS)基因组序列,利用在线工具ZiFiT Targeter Version 4.2确定合适的CRISPR/Cas9靶标序列,选择其中一个位点作为靶标位点,设计包含靶标基因MaPDS序列的sgRNA。利用一套改良的CRISPR/Cas9多靶点载体系统,以pYLg RNA-Lac Z-U6a质粒为模版,Overlapping PCR法构建U6a-sgRNA表达盒,再利用Golden Gate Cloning法将U6a-sgRNA表达盒克隆到pYLCRISPR/Cas9载体中,构建以MaPDS为靶标基因的pYLCRISPR/Cas9-sgRNA载体。构建的质粒含Cas9p和sgRNA表达盒,其中Cas9p由P_(Ubi)启动子驱动,sgRNA由水稻来源的RNA启动子U6a驱动。将构建好的载体转入农杆菌EHA105,转化香蕉主栽品种巴西蕉胚性细胞悬浮系,获得抗性再生植株。设计PCR引物扩增包含靶标序列的MaPDS序列片段,检测和分析再生植株MaPDS被编辑的情况。【结果】试验选择MaPDS作为CRISPR/Cas9靶标基因,设计一个靶标位点,利用Overlapping PCR法获得了U6a-sgRNA表达盒,利用Golden Gate Cloning法将其克隆到pYLCRISPR/Cas9的Bsa I位点,成功构建了针对MaPDS的pYLCRISPR/Cas9-sgRNA载体。经过农杆菌浸染、抗性筛选、抗性胚诱导、萌发及生根,最终获得抗性独立转化株系129个。其中,71个株系出现白化表型,产生白化表型的几率达55%。失绿突变体的出现意味着MaPDS蛋白功能丧失。随机取转化株系中的白化表型株系33个和正常表型株系14个,提取其叶片基因组DNA,扩增含有MaPDS的靶位点片段,序列分析结果表明,白化表型株系的MaPDS靶位点序列发生了基因编辑。主要是在靶位点附近增加1个碱基T或A,或是在靶位点附近或下游发生碱基颠换或转换,出现非靶标位点突变。这些突变形式均能导致MaPDS蛋白翻译错误,从而使MaPDS蛋白丧失功能,表现为白化。转化株系中表型正常植株的MaPDS靶位点序列与野生型一致,未检测到变异。【结论】成功在香蕉体内实现了对内源MaPDS的定点敲除,获得了基因定点敲除的突变体株系,为进一步利用基因编辑技术在香蕉上的应用奠定了基础。
关键词： 香蕉 CRISPR/Cas9 MaPDS 基因编辑
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长脖黄×大叶密合重组自交系群体主要农艺性状遗传分析
《中国烟草科学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：了解烟草重要农艺性状的遗传变异可为烟草育种提供基础。本研究利用烟草品种"大叶密合"和"长脖黄"作亲本建立的重组自交系RILs(F6)群体为材料,对株高、节距、叶片数、最大叶叶宽、最大叶叶长、最大叶叶重和茎围等7个农艺性状进行方差分析、相关性分析、遗传力以及遗传模型分析。结果表明,7个性状在重组自交系群体中连续变异,变异范围在10.8%~25.6%,存在双向超亲分离现象,除了最大叶叶长外,都符合正态分布。由各性状之间相关分析得出,21对性状中18对达到显著或极显著水平,且均是正相关,其中有4对性状的相关系数大于0.5。7个性状的广义遗传力依次为:茎围>最大叶叶宽>节距>株高>叶片数>最大叶叶重>最大叶叶长,同时具有较高的相对遗传进度。主基因+多基因混合遗传模型分析表明,叶片数、最大叶叶宽和最大叶叶长分别符合2对隐性上位主基因遗传模型、3对独立完全等加性主基因遗传模型和4对加性上位主基因遗传模型。株高、节距、最大叶叶重和茎围等4个性状均受2对主基因+多基因控制,其中株高和最大叶叶重的主基因作用方式都为抑制作用,而节距和茎围都为显性上位。研究说明基于永久性的重组自交系群体,可解析重要农艺性状的遗传变异规律,为烟草育种提供理论基础。
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龙眼果肉提取物改善SAMP8小鼠学习记忆功能
《现代食品科技 》 2017 北大核心
摘要：探讨龙眼果肉醇提物的石油醚相(LP)和水相(LW)对小鼠学习记忆功能的改善效果及作用机制。以SAMP8小鼠为老年痴呆模型,采用Morris水迷宫观察小鼠的学习记忆能力;检测小鼠血清中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;Western blot法检测小鼠脑组织中β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)等相关蛋白(淀粉样前体蛋白(APP)、β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1))的表达水平。研究发现,与模型组相比,LP和LW能显著改善痴呆小鼠的学习记忆功能,分别不同程度地降低其血清中NO和MDA含量以及脑组织中Aβ1-42、APP和BACE1的蛋白表达,提高其血清中SOD和GSH-Px活力。以上结果表明LP和LW可能通过提高小鼠机体的抗氧化能力和抑制其脑组织中Aβ等相关蛋白的表达的共同作用来改善痴呆小鼠的学习记忆功能,具有预防老年痴呆症的潜在功效。
关键词： 龙眼果肉 老年痴呆 学习记忆功能 抗氧化 β-淀粉样蛋白
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荔枝密闭园和间伐园主要病害发生情况比较
《植物保护 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：回缩间伐是荔枝密闭园改造的一个有效措施,但改造后的病害发生情况尚未见有报道。为给荔枝密闭园改造提供病害防控方面的理论依据,本研究分别于荔枝花穗期、小果期、果实成熟期和冬梢期,在国家荔枝龙眼产业技术体系荔枝密闭园改造示范园,对4个荔枝品种于密闭园和间伐园发生的主要病害种类、病害危害程度进行了两年的调查。调查数据统计分析结果显示,间伐园与密闭园所发生的主要病害在种类上无差异,但各物候期间伐园的平均总病叶率、果实成熟期的平均总病果率均低于密闭园,其中3个品种的差异达到显著水平;从花穗期至果实成熟期,密闭园和间伐园的病害危害程度均逐渐升高,在果实成熟期达到最高峰,进入冬梢期时又有所下降;调查还表明对密闭园进行回缩间伐改造有利于荔枝病害管理,改造后果园的病害防治重点时期为花穗期至果实成熟期。
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檀香吸器维管组织的个体发育
《热带亚热带植物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了解檀香吸器维管组织的发育过程,采用激光共聚焦显微镜、光学显微镜和透射电镜观察檀香吸器维管组织的个体发育。结果表明,檀香维管组织的分化分为两个时期:入侵前和入侵后。吸器维管组织发育始于盘状吸器时期,起源于吸器基部具有分生能力的细胞,后分为两束。侵入前无向顶的分化,处于吸器基部。侵入后随吸管深入寄主根与寄主根维管束连通,形成具有吸收功能的维管组织。成熟吸器维管组织呈倒烧瓶结构,仅处于吸器烧瓶核心两边,由木质部组成而无韧皮部。檀香的吸器维管组织发育有两个因素诱导,一个是遗传因素,另一个为寄主。这些为檀香半寄生性特性研究提供了形态解剖学基础。
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茶树水分胁迫建模及试验
《排灌机械工程学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：通过观测冬季和春季塑料大棚中不同灌溉条件下茶树的冠层温度、空气温湿度、土壤热流密度、土壤湿度、太阳净辐射照度及风速等因素,利用Idso经验模式确定了冠气温差的下限方程.通过观察不同水分处理条件下茶树作物水分胁迫指数的日变化和季节变化,得出了反映茶树水分状况的关系曲线.研究分析了Jackson的理论模式与Idso的经验模式反映茶树水分胁迫的差异性,针对华南地区经常出现的冬旱及春旱,首先通过人工田间数据采集的方法,分9—12月和1—3月2个阶段测量茶树作物水分胁迫指数中所涉及的各个参数,建立了茶树冬季和春季的作物水分胁迫指数模型.研究结果发现,茶树冬季和春季作物水分胁迫指数模型相差不大,冬季经验模型中,系数A和B的值分别为1.265和-0.220,而春季经验模型中,系数A和B的值分别是1.230和-0.214,这可能与茶树属于多年生植物,冬季和春季叶面积指数等变化不大相关.
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响应面分析法优化耐高温假黄色单胞菌硫氧化性能
《微生物学通报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：【目的】采用响应面分析法对耐高温假黄色单胞菌的硫氧化性能进行优化。【方法】利用Plackett-Burman试验筛选影响菌株硫氧化性能的关键因子。通过最陡爬坡试验逼近最佳值区域,确定响应面试验中心轴,利用Box-Behnken设计和响应面分析法获得关键因素的最佳浓度。采用经典的改良硫酸钡比浊法测定硫酸根含量。【结果】牛肉膏、麦芽糖、镁离子(Mg~(2+))3个因素是影响菌株硫氧化性能的关键因素。响应面分析表明牛肉膏和镁离子的交互作用对硫酸根转化率的影响最大,优化后的结果为:麦芽糖(%)=0.07,牛肉膏(%)=0.11,Mg~(2+)(%)=0.04时,模型有最大值。模型的F值为52.60(P<0.000 1),相关系数R2=0.980 2,说明该二次方程是显著的,该模型在整个回归区域内的拟合较好。经模拟堆肥试验验证该菌株可以有效增加堆肥中硫酸根含量。【结论】该模型可用于分析和预测耐高温假黄色单胞菌优化培养基配方,经优化后该菌株硫氧化性能大幅提升,硫酸根转化率由36.89%提高到80%以上,加入堆肥后与基础发酵条件下菌液相比更加有效增加了堆肥中SO_4~(2-)的含量,具有较好的应用前景。
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华南水稻白叶枯病菌致病性分化检测与分析
《植物保护学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了解华南稻区水稻白叶枯病菌的致病性分化和变异动态,采集华南地区水稻白叶枯病病叶标样分离病原菌,应用中国鉴别寄主IR26、南粳15、爪哇14、特特普、金刚30和国际水稻已知抗病基因的近等基因系IRBB5、IRBB13、IRBB3、IRBB14、IRBB2、IR24两套鉴别寄主,在水稻孕穗期采用剪叶法接种,依据寄主和菌株的互作反应检测病菌的致病性分化。结果显示,参试菌株可划分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅸ六个致病型和R1、R2、R3、R4、R5、R8、R10七个致病小种。Ⅴ、Ⅳ致病型和R8、R5小种出现频率分别为27.40%、19.30%和44.67%、15.34%,为华南稻区优势种群。Ⅸ、Ⅴ、Ⅳ致病型和R8、R5小种对500份华南稻区品种资源的致病率依次为96.40%、95.00%、50.40%、62.00%和42.60%;Ⅸ致病型毒性最强且发展很快;强致病菌系Ⅴ型已替代Ⅳ型发展为华南优势致病菌系。
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