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利用CRISPR/Cas9技术敲除BnERF019降低甘蓝型油菜对黑胫病的抗性

中国油料作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:为辅助抗病育种,研究被油菜黑胫病菌(Leptosphaeria biglobosa)诱导96 h后上调表达的转录因子BnERF019的功能。采用Golden Gate载体构建系统,改造基因编辑载体pHS-BnERF019,构建油菜转录因子BnERF019基因的CRISPR/Cas9多拷贝靶标基因编辑体系,使用农杆菌介导的遗传转化,通过侵染油菜下胚轴,将基因编辑载体pHS-BnERF019导入甘蓝型油菜Westar,共获得28株基因编辑阳性再生苗,阳性率为32.18%,其中靶标BnaC07g13470D序列编辑苗15株,靶标BnaA07g10270D序列编辑苗19株,靶标BnaA09g30360D序列编辑苗18株,靶标BnaC05g18050D序列编辑苗23株,3株再生苗发生单拷贝靶标基因编辑,11株再生苗发生双拷贝靶标位点基因编辑,6株再生苗发生三拷贝靶标位点基因编辑,8株再生苗发生了四拷贝靶标位点基因编辑。对突变苗和WT进行黑胫病抗性鉴定结果显示,四拷贝基因编辑再生苗抗病性显著弱于野生型苗。

关键词: CRISPR/Cas9 甘蓝型油菜 转录因子 BnERF019 遗传转化

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北方农牧交错区风蚀退化农田地力培育关键技术与应用

中国科技成果 2025

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高效低温纤维素降解菌的筛选及其酶活特性

畜牧与饲料科学 2025

摘要:[目的]筛选适合内蒙古地区粪污和秸秆高效堆肥处理的低温纤维素降解菌。[方法]以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为碳源,在18℃培养条件下从内蒙古地区的落叶腐殖土壤、羊粪污自然堆肥和牛粪污中对菌株进行分离和初步筛选;用纤维素刚果红降解圈试验对分离菌进一步筛选,通过16S rDNA序列分析技术确定分离菌的种属,利用滤纸条降解试验对分离菌做更进一步筛选;最后,利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法对筛选出的具有纤维素降解能力的菌株进行羧甲基纤维素酶(CMCase)活性测定,最终得到具有较高纤维素降解能力的低温菌株。[结果]在18℃培养条件下,初步分离得到了30株能降解纤维素的菌株,经纤维素刚果红降解圈试验筛选获得15株纤维素降解能力较好的菌株,分别属于芽孢杆菌纲、γ-变形菌纲、放线菌门、黄杆菌纲和β-变形菌纲,其中芽孢杆菌纲和γ-变形菌纲为第1优势菌群,放线菌门为第2优势菌群;在属水平上,芽孢杆菌属为第1优势菌属,假单胞菌属为第2优势菌属。利用滤纸条降解试验对15株分离菌进一步筛选,获得7株纤维素降解能力更好的菌株,在18℃培养后测定其CMCase活性,得到3株高效低温纤维素降解菌株F-1-1(芽孢杆菌属)、Y10(芽孢杆菌属)和T11(假单胞菌属),其CMCase活性分别为(29.25±0.98)、(20.73±0.27)和(20.60±0.14)U/mL,这3株菌株在30℃培养条件下CMCase活性也高于其他菌株。[结论]研究揭示了内蒙古部分地区在低温环境下可培养的纤维素降解菌的类群及其纤维素降解能力。筛选得到的3株具有较高CMCase活性的低温菌株,可以作为高效低温降解纤维素的潜力菌株应用于粪污堆肥发酵剂的研制。

关键词: 纤维素降解菌 低温 酶活性 分离筛选 芽孢杆菌 假单胞菌

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1例羊口蹄脓包病例病原菌分离鉴定及药敏试验分析

畜牧兽医杂志 2025

摘要:本研究采用PCR分子生物学技术和细菌分离鉴定的方法,对某养殖场病羊的皮肤组织和脓液的样本进行研究.结果表明:(1)四份痂皮样品均未检出羊痘、羊口疮及羊口蹄疫病毒;(2)两份口蹄脓液的细菌分离鉴定结果为金黄色葡萄球菌,该菌株对多种药物敏感,但对青霉素和氨苄西林不敏感.研究认为,本例羊口蹄脓包病例的主要致病菌为金黄色葡萄球菌,建议该养殖场加强对该病原菌的监测和防控,并根据药敏试验结果制定合理的治疗方案.

关键词: 金黄色葡萄球菌 分离鉴定 药敏试验

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基于Thermal Time模型预测高加索三叶草花序生长和花期发展

草地学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:Thermal time模型认为植物需要高于基准温度(Base temperature, Tb)累积固定量的热效应(Thermal time,Tt)来完成特定的发育阶段,低于Tb或未达到固定量的Tt,不发生发育阶段的转化。本文在中国青藏高原、内蒙古高原、东北平原和新西兰坎特伯雷平原设置5个试验区,以高加索三叶草(Trifolium ambiguum Bieb.)为研究对象,观测单个花序发育速率和种群开花进展速率。基于试验区温度,运用Thermal time模型预测花序生长和花期进展,旨在量化花序开放和花期推进所需的热量条件,以此指导高加索三叶草饲草利用和种子生产。结果表明,高加索三叶草从现蕾发育到最大花序尺寸约需在2℃以上累积25℃·d;从始花期到盛花期需在7.5℃以上累积635℃·d;从盛花期到结实期存在地形差异,高原地区需在8.7℃以上累积1813℃·d,平原地区需在3℃以上累积1290℃·d。在高原地区高加索三叶草更适合饲草利用,在平原地区有种子生产利用的潜质。

关键词: 高加索三叶草 温度 基温 花期 热效应

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河套灌区向日葵种植行距密度效应研究

安徽农业科学 2025

摘要:[目的]探明河套灌区向日葵合理的种植行距及密度。[方法]设置行距(大行行距1.0、1.1、1.2 m, R1、R2、R3处理)和密度(21 000、24 000、27 000株/hm2,D1、D2、D3处理)2因素3水平裂区试验,研究不同种植行距及密度对向日葵产量、产量构成、农艺性状、籽粒性状等因素的影响。[结果]扩行降密各处理对向日葵生育期无影响。同一行距水平下,随着种植密度的增加,向日葵株高增高,盘径降低,单盘粒重、百粒重、籽粒长度和宽度降低。在同一密度水平下,随着大行距增加株距减小,向日葵株高增加。同一密度水平下,R2处理(大行距1.1 m)单盘粒重最高,籽粒商品性较好,其中R2D2处理的经济效益表现最好。[结论]获得最高产量的向日葵种植大行距应为106 cm,小行距40 cm,密度为25 132株/hm2(株距55 cm),其产量及其构成因素、农艺性状、成本投入、经济效益综合表现最好,适宜在河套灌区大面积推广。

关键词: 向日葵 行距 密度 产量 经济效益

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高胰岛素-正血糖钳夹技术测定围产期母羊胰岛素敏感性的研究

饲料研究 2025 北大核心

摘要:试验旨在建立1种检测围产期母羊胰岛素(INS)敏感性的方法,探究酮病对围产期母羊能量平衡的影响。试验1选择3只围产期绒山羊母羊进行高胰岛素-正血糖钳夹处理,分别在灌注前后测定绒山羊血浆INS和血糖(GLU)含量。试验2选取与试验1处于同一牧场、相同围产期(产后7 d)的绒山羊母羊为研究对象,选取酮病羊[血浆β-羟丁酸(BHBA)含量≥1.6 mmol/L]和非酮病羊(血浆BHBA含量<0.8 mmol/L)各6只,颈静脉采血检测绒山羊血浆INS、GLU、BHBA、游离脂肪酸(NEFA)的含量。结果显示:与处理前期相比,试验处理期绒山羊母羊GLU含量无显著变化(P>0.05),血浆INS含量极显著升高(P<0.01)。整个试验过程中,试验处理期绒山羊母羊的血浆INS含量均高于处理前期。酮病组母羊血浆GLU、BHBA、NEFA含量显著高于非酮病组母羊(P<0.05),血浆INS含量显著低于非酮病组母羊(P<0.05)。研究表明,试验成功构建了利用高胰岛素-正血糖钳夹技术检测围产期母羊INS敏感性的方法。

关键词: 围产期 母羊 胰岛素敏感性 高胰岛素-正血糖钳夹

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不同修复措施对西乌珠穆沁旗退化草原的生态修复效果分析

畜牧与饲料科学 2025

摘要:[目的]选择内蒙古西乌珠穆沁旗退化草原为研究对象,探讨不同修复措施对退化草原的生态修复效果,旨在为当地及周边地区开展退化草原植被恢复与重建工作提供参考。[方法]2020—2022年在轻度退化草原采用围栏封育+管护修复措施,对照区为毗邻修复区本底基本一致的自由放牧草原。在重度退化草原采用沙障+补播措施(在围栏封育+管护修复措施的基础上),对照区为重度退化样地围封+管护后不采用沙障+补播措施的地块。监测样方内植物群落高度、盖度、地上生物量和物种数量等指标。[结果]与对照区相比,在轻度退化草原实施围栏封育+管护修复3年后,修复区植物群落的高度、盖度、地上生物量极显著(P<0.01)提高;重度退化草原实施沙障+补播3年后样地植物群落的高度、盖度显著(P<0.05)提高,地上生物量极显著(P<0.01)提高。在植物物种组成方面,项目实施区围栏封育3年内退化草原物种数量无明显变化,物种组成方面呈现多年生牧草增加,一、二年生牧草减少的趋势。[结论]综上所述,不同程度退化草原采用不同生态修复措施使得草原生产性能和植物群落特征得到明显提升。

关键词: 退化草原 生态修复 围封 沙障 补播

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防治苜蓿小光壳叶斑病室内药剂筛选及不同苜蓿品种抗性评价

草地学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:近年来在内蒙古多地发现由三叶草小光壳(Leptosphaerulina trifolii)造成的苜蓿小光壳叶斑病,为筛选苜蓿(Medicago sativa)小光壳叶斑病的高效化学药剂和抗病品种,本研究通过室内药效测定,比较了14种杀菌剂对苜蓿小光壳叶斑病病原菌的抑制作用,并通过盆栽试验对46份紫花苜蓿品种进行了抗性鉴定。结果表明,嘧菌酯、吡唑醚菌酯和恶醚唑对NM05菌株的菌丝生长有较好的抑制效果,有效抑制中浓度(Median effective concentration,EC50)值分别为0.0091,0.0383和0.1073 mg·L-1;经抗病性评价,供试品种中有高抗品种4份,中抗品种17份,中感品种23份和高感品种2份,其中高抗品种为‘苜蓿801’、杂花苜蓿、‘赛特’和‘呼伦贝尔’杂花。综上所述,本研究筛选出3个苜蓿小光壳叶斑病高效杀菌剂和4个苜蓿高抗品种,为苜蓿小光壳叶斑病的田间防治奠定了基础。

关键词: 苜蓿小光壳叶斑病 杀菌剂 筛选 品种抗性 评价

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褪黑素诱导罕山白绒山羊绒毛生长发育及脱落的蛋白组学分析

中国畜牧杂志 2025 北大核心

摘要:为探究褪黑素(Melatonin,MT)诱导罕山白绒山羊绒毛生长发育及脱落的蛋白质组特征,本研究选取6只2周岁、雌性半同胞白绒山羊,随机分为对照组和埋植组,埋植组自12月起每月以2 mg/kg BW剂量埋植1次MT至翌年12月,采集4—9月皮肤样品,利用Label-free DIA的定量蛋白质组学技术分析皮肤差异蛋白(DEPs)的亚细胞定位及其功能。结果显示:埋植组绒长在5—9月高于对照组(P<0.05),且对照组绒毛5月脱绒、7月长绒;埋植组4月和8月经历2次脱绒,5月提前长绒。4—9月2组间共鉴定1 369个DEPs,主要定位在细胞质、细胞核和线粒体等。GO&KEGG结果表明,MT诱导下第1次脱绒(4月)的DEPs主要参与细胞凋亡过程相关信号通路;第2次脱绒(8月)的DEPs富集信号通路既包含上述信号通路,也包含与生长相关的黏着斑和PPAR等信号通路;5—7月(MT诱导下长绒)的DEPs主要富集在角蛋白丝、ECM-受体互作和黏着斑等信号通路。在蛋白质网络互作(PPI)中,CTNNB1、DSG4、COL1A1、KRTAP3-1、COL1A2和THBS1等蛋白联系较紧密且在埋植组中有不同的表达模式。因此推测,外源MT可能通过上调CTNNB1、DSG4、KRTAP3-1和THBS1促进细胞增殖,影响绒毛生长;通过下调COL1A1和COL1A2诱导绒毛脱落。该研究结果为探明MT诱导绒山羊绒毛生长发育及脱落过程的调控机制提供基础资料。

关键词: MT 生长 脱落 罕山白绒山羊 蛋白质组

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