科研产出
水稻穗顶端退化突变体paa21的表型分析及基因克隆
《中国农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】水稻穗顶端退化严重影响产量，鉴定与克隆水稻穗顶端退化相关基因，可以丰富水稻穗发育调控的分子机理，为水稻高产分子设计育种提供理论基础和基因资源。【方法】从粳稻品种武运粳30号EMS突变体库筛选到一份稳定遗传的穗顶端退化突变体panicle apical abortion 21（paa21）。对退化一次枝梗比例、每穗退化粒数占比、每穗粒数、株高、穗长、单株产量等农艺性状进行统计。使用台盼蓝和伊文思蓝染色检测顶端小穗是否发生程序性细胞死亡。测定WT和paa21不同发育时期幼穗和不同穗部位的H2O2含量。paa21分别与籼稻II-32B、9311正反交进行遗传分析。利用paa21与籼稻II-32B杂交构建的F2群体进行基因定位和克隆。使用SWISS-MODEL网站预测野生型和突变体蛋白的三维结构。利用RT-qPCR分析ROS响应标志基因、程序性细胞死亡相关基因、过氧化氢酶相关基因的表达量。【结果】paa21突变体发生严重的穗顶端退化，统计paa21所有一次枝梗退化情况，发现退化小穗主要位于顶端的一次枝梗上。与WT相比，paa21的株高、每穗粒数、穗长和单株产量均降低。通过观察不同发育时期的幼穗，发现在paa21突变体幼穗发育至12 cm时，可见穗顶端退化表型。台盼蓝和伊文思蓝染色结果表明突变体顶端小穗发生程序性细胞死亡。在退化的paa21顶端小穗中观察到更强烈的DAB染色；H2O2含量测定结果表明，与WT相比，paa21穗中积累更高水平的ROS。遗传分析表明paa21突变表型受一对隐性核基因控制。图位克隆结果发现paa21中Os02g0673100第二外显子发生一个C到T的突变，导致丙氨酸突变为缬氨酸。该基因编码一个铝激活的苹果酸转运蛋白ALMT7。突变位点位于第4个跨膜螺旋上。SWISS-MODEL预测结果表明，该突变位点并未对突变体蛋白三维结构造成明显影响。RT-qPCR结果表明，在幼穗发育至10 cm时，paa21中ROS响应标志基因Os01g0826400、Os05g0474800和Os02g0181300，程序性细胞死亡相关基因VPE2和VPE3，过氧化氢酶编码基因CATA、CATB、CATC的表达量较WT大幅升高。此外，paa21 10 cm幼穗中过氧化氢酶（CAT）的活性较WT明显下降。【结论】paa21幼穗在发育后期顶端小穗中积累过量的ROS，产生程序性细胞死亡，最终导致顶端小穗发生退化。
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江苏地区屠宰场大肠杆菌O157:H7的分子流行病学研究
《畜牧业环境 》 2022
摘要：本研究用多重PCR检测44株大肠杆菌O157:H7的主要毒力基因,使用多位点序列分型和脉冲场凝胶电泳两种分型技术鉴定菌株之间亲缘关系,自动化仪器测定病原菌对常用抗生素的敏感性.结果表明,44株大肠杆菌O157:H7的毒力因子stx1、stx2、hly和eae检出率分别为59.09%、93.18%、75.00%和100%,共分为6个毒力基因表型;多位点序列分型研究发现所有菌株分属3个ST型,分别为ST11、ST4429和ST1423,其中ST11为优势型.脉冲场凝胶电泳聚类分析将所有菌株分成19个PT型,具有显著多态性.44株O157:H7对14种常用兽用抗生素具有不同程度的耐药性,其中对氨苄西林、磺胺异恶唑、链霉素和阿奇霉素强耐药.
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基于观景点作用的休闲农业促进研究
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要：观景点是观光旅游的重要节点之一,可作为给游客提供休息、交流、获取观光信息的场所.以日本福冈市为例,将含有观景点的观光和游览行为作为研究对象,分析观景点的作用,从游客的角度和观景点的作用来总结促进游览行为的条件.利用问卷调查验证观景台在观光休闲中的作用,总结出游客的游览行为特点以及目的地的选择趋势.结果表明,观景点的观景台高度和位置条件以及内部设置的观光信息及其设备均有望起到增加游客对于观光资源的访问次数和访问机会的作用.因此,编制促进游客的观光游览规划时,非常有必要考虑观景点与周围环境和观光信息之间的关系.进而探讨如何结合观景点并合理运用于休闲农业中,以期为休闲农业发展提供更多在创新上的启示.
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水稻可溶性淀粉合成酶基因SSⅡa和SSⅢa的功能、等位变异及其互作研究进展
《中国水稻科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：水稻淀粉合成对稻米品质的影响研究一直备受关注,是水稻基础科学研究的热点和难点之一.淀粉合成途径受众多酶催化调控,可溶性淀粉合成酶(soluble starch synthase,SSS)是其中较重要的一种,极大地影响稻米食味品质的形成.可溶性淀粉合成酶基因SSⅡa和SSⅢa是控制稻米糊化温度和胚乳支链淀粉生物合成途径中的两个关键基因.本文重点回顾并归纳了国内外关于SSⅡa和SSⅢa基因的功能、等位变异及其互作对稻米蒸煮食味品质影响的最新研究进展,同时对SSⅡa和SSⅢa基因的育种利用前景进行了展望,以期为稻米品质分子改良和育种提供参考依据.
关键词： 水稻 可溶性淀粉合成酶 基因功能 等位变异 基因互作
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地塞米松促进鹅胚垂体生长激素细胞的分化
《西南农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]垂体是动物重要的内分泌器官,生长激素细胞是垂体的重要组成细胞之一,探究生长激素细胞的分化规律对于研究垂体组织的发育以及动物发育生物学至关重要.[方法]通过体内和体外研究糖皮质激素类激素地塞米松在鹅胚垂体发育中的作用.通过向发育不同阶段的鹅胚内注射地塞米松,向体外培养的原代垂体细胞添加地塞米松,利用放射免疫法、实时荧光定量PCR法、免疫荧光染色等方法检测地塞米松对GH蛋白、GH mRNA以及GR mRNA表达变化,研究地塞米松对垂体生长激素细胞分化的影响.[结果]胚内注射的地塞米松显著提高了胚胎血浆中的GH蛋白含量,同时提高了垂体组织中的GH mRNA和GR mRNA表达量;体外培养液中添加的地塞米松提高了含有GH的垂体细胞数量,也提高了细胞中GH mRNA和GR mRNA表达量.可见,不管是蛋内注射还是体外培养液中添加地塞米松,都能有效诱导GH mRNA和蛋白在垂体细胞中表达.[结论]糖皮质激素在鹅胚垂体发育过程中具有重要作用,能促进鹅胚垂体表达GH,诱导垂体生长激素细胞的分化.
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猪圆环病毒2型亚单位疫苗的研制及其ELISA抗体评价
《特产研究 》 2022
摘要：为制备并筛选出安全性更好、免疫效果更佳的猪圆环病毒2型(PCV-2)亚单位疫苗,本研究选取本地流行毒株PCV2TX01株,通过杆状病毒表达系统对Cap蛋白进行高效表达,采用水性佐剂制备成灭活疫苗,从临床症状、日增重和ELISA抗体水平等方面评价免疫后对仔猪的安全性和血清学效力.结果表明,疫苗免疫后仔猪精神、食欲和行为活动均正常,接种部位未见红肿等不良症状,证实疫苗对仔猪安全.免疫组仔猪ELISA抗体效价在1∶400~1∶800,说明该疫苗免疫后可以有效地刺激仔猪产生体液免疫,可以作为预防猪圆环病毒相关疾病的候选疫苗.
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茭白叶斑病病原鉴定及其对5种杀菌剂的敏感性测定
《中国瓜菜 》 2022 北大核心
摘要：为鉴定茭白叶斑病病原,筛选可用于病害防治的化学药剂,对来自扬州市邗江区的茭白病样进行组织分离和分离物致病性测定,形态和分子生物学鉴定及杀菌剂敏感性测定.结果表明,分离获得的2个菌株JBYB1和ZLC1为稻平脐蠕孢Bipolaris oryzae和竹节蓼弯孢Curvularia muehlenbeckiae,分别引起茭白胡麻叶斑病和茭白弯孢叶斑病.JBYB1和ZLC1最适生长条件为:在25~28℃或25~30℃,pH值6~7,以葡萄糖或蔗糖为碳源、以硝态氮为氮源的PDA培养基,光照或光暗交替培养.5种杀菌剂(己唑醇、吡唑醚菌酯、咪鲜胺、氟环唑和咯菌腈)对JBYB1和ZLC1均有较好的抑制作用,其中咯菌腈毒力最强.综上所述,分离获得的茭白叶斑病的病菌为B.oryzae和C.muehlenbeckiae,供试的5种杀菌剂均可用于茭白叶斑病的田间防治.
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长春鳊的胚胎和仔鱼早期发育特征
《贵州农业科学 》 2022 北大核心
摘要：[目的]研究长春鳊早期发育特征,为长春鳊的人工繁殖和苗种培育提供参考.[方法]以人工繁殖的第三代长江下游水域长春鳊为亲本,干法受精获得受精卵,观察并分析长春鳊的受精卵(胚盘形成期)、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官分化期、卵黄囊仔鱼及晚期仔鱼等8个生理阶段的形态特征和发育时间.[结果]长春鳊的卵无黏性,在水温(26±0.5)℃环境下,胚胎发育历时35 h 10 min,胚后发育至晚期仔鱼历时约25 d.胚胎发育时序中,肌肉效应期出现在眼晶体形成之后.[结论]长春鳊早期发育特征与其他常养草食性鱼类相似,在发育时序上存在一定差异.
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蓝莓叶多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性研究
《天然产物研究与开发 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：采用超声法提取蓝莓叶多酚,测定纯化前后提取物中总酚含量.以对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用为评价指标研究其体外降血糖活性,并运用液相色谱-质谱联用(LC-MS)法对蓝莓叶多酚的化学成分进行鉴定.通过不同的温度和不同的pH处理蓝莓叶多酚,探究它的稳定性.以阿卡波糖为阳性对照,半数抑制浓度(IC50)为α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性评价指标,测定提取物的抑制活性.最后经酶促动力学与Lineweaver-Burk双倒数法探讨蓝莓叶多酚的抑制类型.结果表明,蓝莓叶多酚纯化后总酚含量、α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制率分别较纯化前增加了 41.19%、138.70%和12.42%.蓝莓叶多酚在低温(30~50℃)和偏酸性(pH 2.0~8.0和3.0~5.0)环境下比较稳定,能够保持较高的α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性.蓝莓叶多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的IC50分别为10.926和7.276 μg/mL.动力学结果表明蓝莓叶多酚对两种酶的抑制作用均为混合型可逆抑制.以上结果表明蓝莓叶多酚提取物具有良好的体外降血糖活性,为蓝莓叶研究与开发提供理论性依据.
关键词： 蓝莓叶 多酚 α-淀粉酶 α-葡萄糖苷酶 抑制类型 动力学
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