副猪嗜血杆菌寡肽结合蛋白(OPPA)的序列分析及分子结构模拟

周伦江; 车勇良; 江斌; 陈如敬; 王隆柏; 魏宏; 吴学敏; 庄向生; 《中国兽医学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：通过研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)寡肽结合蛋白(Oligopeptide Binding Protein A,OppA)的生物学特性,为副猪嗜血杆菌亚单位疫苗的研制奠定基础。本试验设计了1对特异性引物,应用PCR方法来扩增副猪嗜血杆菌肽聚糖相关脂蛋白的全基因序列,并进行克隆和测序。并且采用生物信息学方法,对Hps的oppA基因核苷酸及其对应氨基酸序列进行比对,选取其中的血清学5型分离株,对其OppA蛋白的分子结构、理化性质及结构功能域、蛋白质二级结构等重要参数进行了预测和分析,并对OppA蛋白的三级结构进行了同源建模。PCR扩增出1 638bp的目的片段;测序结果显示出不同血清型Hps之间oppA基因核苷酸序列相似性有一定的差异,而所对应的氨基酸序列却差异更小;OppA蛋白的理论等电点为6.45,偏弱酸性;OppA蛋白的二级结构以α螺旋、不规则卷曲和β片层为主要构件;Hps的OppA蛋白的氨基酸序列与鼠疫耶尔森氏菌2Z23蛋白的同源性为57.20%,以2Z23蛋白结构为模板成功构建了Hps的OppA蛋白三维结构分子模型,该OppA蛋白三维结构中与2Z23蛋白相似,也有3个结构域,在疏水口袋中有1条5肽结构。Hps的OppA蛋白的成功模建为OppA蛋白功能的深入研究提供了参考依据。

关键词： 副猪嗜血杆菌 寡肽结合蛋白 序列分析 分子结构模拟

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花鳗鲡鱼体肌肉的氨基酸分析研究

林香信; 颜孙安; 钱爱萍; 姚清华; 宋永康; 《中国农学通报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：为了探讨不同体重花鳗鲡鱼体肌肉氨基酸的营养功效,指导消费者合理消费。本研究比较了不同体重(A组:360～420g;B组:250～300g;C组:200～250g)花鳗鲡肌肉蛋白质的氨基酸组成,并分析了其必需氨基酸、呈味氨基酸、药效氨基酸含量。结果表明:花鳗鲡肌肉含有18种氨基酸,氨基酸总量分别达14.40%、18.30%、18.16%,谷氨酸含量最高。不同组别花鳗鲡的8种人体必需氨基酸含量高低顺序一致,占氨基酸总量的比例分别41.60%、41.63%、41.63%,呈味氨基酸的分布依次为甜味类氨基酸含量(A组:6.91%;B组:8.73%;C组:9.37%)、苦味类氨基酸含量(A组:5.46%;B组:6.96%;C组:6.94%)、酸味类氨基酸含量(A组:3.71%;B组:4.87%;C组:4.87%)、鲜味类氨基酸含量(A组:3.22%;B组:4.22%;C组:4.19%),药效氨基酸的分布依次为C组:12.56%、B组:11.93%、A组:9.33%。根据分析结果,本研究认为花鳗鲡鱼体肌肉蛋白是一种药食两用、氨基酸全面、肉质鲜美的优质蛋白,建议如以常规滋补兼顾口味为目的,以250～300g的体重为宜;如以药用为目的,则选用200～250g较好。

关键词： 花鳗鲡 氨基酸 必需氨基酸 呈味氨基酸 药效氨基酸 氨基酸自动分析仪

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小瓜虫疫苗研究进展及突破方向——访美小瓜虫研究机构思考

潘厚军; 林天龙; 李安兴; 赵飞; 吴淑勤; 《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：小瓜虫病是世界范围内严重危害淡水养殖鱼类的主要寄生虫病。美国农业部水生动物健康研究所、佐治亚大学兽医学院和康奈尔大学兽医学院3家研究机构在鱼类小瓜虫病及疫苗研究方面走在世界前列。为提升我国鱼类寄生虫研究水平,我们访问了此3家小瓜虫病研究机构,并与美国小瓜虫研究学者进行了交流。在总结了访美收获的基础上,介绍了小瓜虫的研究进展,并就我国小瓜虫疫苗研究需要的科研设施建设、突破的主攻方向及国内外合作提出了建议。

关键词： 小瓜虫病 访问 疫苗 进展

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新型鸭呼肠孤病毒的分离与鉴定

陈少莺; 陈仕龙; 林锋强; 王劭; 江斌; 《病毒学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：本研究从临床表现为出血性坏死性肝炎的病死鸭肝脾中分离到病毒。病原特性鉴定显示,分离毒能致死番鸭胚和鸡胚;人工感染1日龄雏番鸭、雏半番鸭均能复制出与临床自然发病鸭相同的临床症状和病理变化,并能回收到病毒。分离毒能在MDEF等多种细胞中增殖并产生细胞病变。电镜下病毒在细胞浆中呈大量散在、成堆和晶格状排列,病毒粒子呈球形、无囊膜、双层衣壳、直径70nm左右。在SDS-PAGE中具有禽呼肠孤病毒10个RNA片段的特征,但M1-3和S1-4片段的迁移率明显不同于番鸭呼肠孤病毒(MDRV)。分离毒S3基因全序列与禽呼肠孤病毒(ARV)、火鸡呼肠孤病毒(TRV)和MDRV的核苷酸同源性分别为60%～60.2%,61.9%,62.3%～62.7%,氨基酸同源性分别为68.2%～69%,68.2%,69.3%～70.1%;S3基因编码的σB蛋白属于单独的进化分支,提示分离毒S3基因具有不同于ARV和MDRV的特征。结果表明鸭出血性坏死性肝炎的病原是一种属于呼肠孤病毒科正呼肠孤病毒属新型鸭呼肠孤病毒。

关键词： 鸭 新型鸭呼肠孤病毒 出血性坏死性肝炎 分离 鉴定

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广西黄皮等几份黄皮种质的耐寒性研究

张丽梅; 陈熹; 陈雪金; 林航; 赵依杰; 《中国南方果树 》 2012 北大核心

摘要：通过电导法测定黄皮叶片在不同低温和不同持续时间的电渗率,探讨低温及持续时间对其伤害程度。结果表明,1℃+6小时和-1℃+18小时处理下,广东无核黄皮叶片的电渗率差异不大;持续6小时低温条件下,受冻临界温度为-3～-4℃。-4℃+6小时条件下,广西黄皮最耐寒,冰糖黄皮最易冻,且无核品种比有核品种耐寒。

关键词： 黄皮 种质资源 耐寒性

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鸭源H9N2 AIV血凝素基因序列比较

万春和; 傅光华; 程龙飞; 施少华; 陈红梅; 彭春香; 林芳; 林建生; 黄瑜; 《病毒学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：为明确国内外鸭源H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)血凝素基因(hemagglutinin,HA)的遗传进化关系、血凝素蛋白裂解位点的氨基酸结构特征和血凝素蛋白受体结合位点的氨基酸变异特征,本研究选取GenBank中登录鸭源H9N2亚型AIV HA基因,通过MEGA4.1进行比对和分析,并绘制其遗传进化树。结果表明,鸭源H9N2亚型AIV在遗传进化上分为2大谱系:即Ck-Bj-1-94-like和North-Ame-like,中国大陆鸭源H9N2亚型AIV和亚欧美其它国家鸭源H9N2亚型AIV在遗传进化上分居完全不同的谱系,相互之间遗传进化关系较远。从血凝素受体结合位点看,亚欧美国家鸭源H9N2亚型AIV在第183、190和226位点的氨基酸均为鸭源AIV经典H、E和Q,且高度保守。但中国大陆地区H9N2亚型AIV第183位为N;第190位为A or V or T,与中国大陆鸡源H9N2亚型AIV一致;第226位中国鸭源H9N2亚型AIV有相当一部分为L,且近年福建省H9N2亚型AIV分离株在此处均为L。提示我们,中国大陆地区H9N2亚型AIV鸭鸡和鸡鸭相互交叉感染较为普遍。

关键词： 鸭源H9N2亚型禽流感病毒 血凝素 遗传进化 受体结合位点 分子特征

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水稻T-DNA插入雄配子不育突变体的创建

陈睿; 于法科; 刘华清; 杨绍华; 王锋; 《中国水稻科学 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：对6000多个转基因T-DNA插入水稻株系进行异常遗传分离分析(选择标记基因为潮霉素磷酸转移酶基因hpt),发现216个转基因株系的T-DNA呈现1∶1分离。接着利用测交方法检测T-DNA的遗传规律,初步确定其中57个候选株系为雄配子不育候选突变体。随后对候选突变株进行多代遗传分析及花粉细胞学观察,结果表明其中的38个突变体花粉黑染率约为50%,自交后代T-DNA的异常分离是由于转基因植株的花粉半不育所致,T-DNA的传递只能通过雌配子体。另外,利用ELISA定量测定突变体中cry1Ac(Bt)基因编码蛋白的表达量,发现花粉的这种不育性与外源基因的表达量之间没有直接关系,推测这38个雄配子突变体败育的原因主要是T-DNA插入引起内源基因变异。TAIL-PCR获得了22个水稻雄配子不育T-DNA插入突变体的侧翼序列,通过BLAST检索,定位了15个不同的插入位点,其中12个插入位点位于基因区或基因调控区。

关键词： 水稻 异常分离 雄配子不育 T-DNA插入 突变体

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京福1优943作烟后稻大面积示范高产栽培技术

林强; 王洪飞; 郑秀平; 《杂交水稻 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：京福1优943是福建省农业科学院水稻研究所用自育的大穗型不育系京福1A与福恢943配组育成的杂交中、晚稻组合,于2006年通过福建省品种审定(闽审稻2006019),2009年通过云南西双版纳审定[滇特(版纳)审稻2009032号]。2011年该组合在闽北山区顺昌县作烟后稻示范7.2 hm2,测产验收平均产量8.67 t/hm2,最高产量9.30 t/hm2;在遭受寒流等异常天气条件下,该组合仍表现出高产稳产、熟期转色好等特点。分别从芽管、苗管、肥管、水管和药管等5个角度总结其作烟后稻高产栽培技术。

关键词： 杂交水稻 京福1优943 烟后稻 种植表现 栽培技术

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双孢蘑菇子实体原基与菇蕾蛋白质表达变化分析

陈美元; 《食用菌学报 》 2012 北大核心

摘要：为探讨双孢蘑菇(Agaricus bisporus)子实体发育初期的蛋白质表达变化,采用双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技术对双孢蘑菇As2796子实体原基与菇蕾的蛋白质组进行分析,发现14个表达差异明显的蛋白质。经质谱分析(MALDI-TOF/TOF MS)和数据库检索,鉴定到10个差异蛋白质,其中乙醇氧化酶与醇类代谢相关,磷酸烯醇式丙酮酸水合酶与能量代谢相关,蛋白酶体、5-甲基四氢三谷氨酸-同型半胱氨酸甲基转移酶、维生素B12不依赖型甲硫氨酸合成酶、1-吡咯琳-5-羧酸脱氢酶、NADP依赖的谷氨酸脱氢酶与氨基酸或蛋白质代谢直接相关,而WD40重复蛋白、肌动蛋白、热激蛋白70则与细胞内多种生物过程有关,在细胞的生长发育分化等过程中起着重要的作用;其余4个仅在双孢蘑菇蛋白质组中鉴定到功能未知的蛋白质。

关键词： 食用菌 蛋白质组 双向电泳 质谱分析 蛋白质鉴定

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“次郎”甜柿高产优质高效栽培关键技术

刘友接; 谢特立; 傅加兴; 《中国南方果树 》 2012 北大核心

摘要：目前,我国甜柿产量仅占柿总产量的2%。2001年福建省农业科学院果树研究所从台湾引进"次郎"甜柿品种,经多年多点区域试验,表现适应性强、病虫害少、收益早、用工少,效益高,已在仙游县台湾农民创业园推广近0.2万hm2。通过多年研究和实践,总结出一套次郎甜柿高产优质高效栽培技术,嫁接苗种植后第2年株产2kg,3年生株产8kg,4年生株产13kg,5年生株产25kg,6年后进入

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