科研产出
银杏实时荧光定量PCR分析中内参基因的选择与验证
《植物生理学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选出银杏中稳定的内参基因用于实时荧光定量PCR (qRT-PCR)分析,本研究以银杏(Ginkgo biloba)的不同组织,不同发育时期雌株、雄株叶片为材料,使用3种软件geNorm, NormFinderand和Bestkeeper综合评估银杏中常见的7个内参基因(GbACT、GbUBQ、GbEF-1α1、GbEF-1α2、GbGAPDH、Gb18S和Gb26S)的稳定性,并用查尔酮合酶基因(Chalcone synthase, CHS)对内参基因稳定性进行验证。结果表明,候选基因的稳定性各异, GbUBQ是所有测试样品和不同发育时期雄株叶片中表达最稳定的基因, GbACT是不同时期雌株叶片表达最稳定的内参基因, GbGAPDH是不同组织中表达最稳定的基因。
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CO2气调贮存秸秆及对厌氧发酵产沼气性能的影响研究
《中国沼气 》 2019 北大核心
摘要：厌氧发酵产沼气是秸秆利用的主要途径之一,而秸秆的有效贮存是保障秸秆沼气工程周年稳定运行的关键.该研究以麦秸为试验材料,研究了含水率为75%的麦秸,在氧分压分别为21%(未气调),17%,13%条件下贮存30天的性状变化,通过中温厌氧发酵试验探索贮存后麦秸的发酵潜力.结果 表明,未气调的麦秸贮存30天后,干物质损失率为36.73%;而进行气调的处理组,氧分压分别为17%,13%,其干物质损失分别为12.56%和11.00%,分别较对照组降低了24.17%和25.73%;未气调贮存的麦秸TS产气量分别为66.25 ±0.53 mL·g-1TS,氧分压为13%的麦秸TS产气量(191.93--±1.54 mL·g-1TS)比氧分压为17%的麦秸TS产气量(171.43±1.22 mL·g-1TS)提高了11.9%.结果 表明:气调作为麦秸贮存与预处理方法,在技术上是可行的,可以确保沼气工程周年稳定运行的原料供应.
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桑葚浓缩汁的制备工艺优化及其抗氧化活性
《江苏农业科学 》 2019 北大核心
摘要：以桑葚为原料,通过单因素和响应面试验考察纤维素酶用量、果胶酶用量、酶解温度和酶解时间对桑葚出汁率的影响,对桑葚浓缩汁的加工工艺进行优化,探究酶添加量对桑葚汁中活性成分的影响并分析其抗氧化性能.结果表明,添加1.0%果胶酶、2.6%纤维素酶,50℃条件下酶解40 min,得到桑葚的出汁率最高,为81.1%.当果胶酶添加量为1.0%时,浓缩汁中花青素和维生素C含量最高,分别为95.184 g/L和1099.412 mg/L;当纤维素酶添加量为2.5%时,浓缩汁中花青素和维生素C含量分别为85.999 g/L和957.416 mg/L.真空旋转蒸发浓缩温度为65℃,其抗氧化能力较强,抗超氧阴离子自由基能力和DPPH自由基清除能力分别为31194.21 U/L和98.99%.
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百里香酚对食源阴沟肠杆菌生物膜形成的抑制作用
《食品工业科技 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：本文研究了百里香酚在亚抑菌浓度条件下对阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)C4生物膜形成的抑制作用.首先确定百里香酚对E.cloacae C4的最小抑菌浓度,然后测定亚抑菌浓度的百里香酚对生物膜内菌落总数、菌体泳动能力和胞外多糖含量的影响,观察生物膜内的细菌形态以及三维结构的变化,并进一步测定与生物膜形成相关基因的相对表达量.结果表明:百里香酚对该菌的最小抑菌浓度(MIC)为256μg/mL.1/4 MIC百里香酚在不影响浮游细菌生长和生物膜内活菌总数的情况下,显著(P<0.05)抑制菌体的泳动能力和生物膜内胞外多糖的合成,与生物膜形成相关(细胞粘附和胞外多糖合成)基因相对表达量显著下调.百里香酚处理后生物膜内细菌菌体变长、生物膜厚度降低,膜结构松散.因此百里香酚在亚抑菌浓度下对阴沟肠杆菌C4生物膜形成有抑制作用.
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阳光玫瑰葡萄标准化栽培技术
《江苏农业科学 》 2019 北大核心
摘要：针对阳光玫瑰葡萄生产中幼苗生长势弱、投产树产量过高、果穗过大、同一果穗中果粒之间糖度差异大、果面果锈严重和整形修剪、土肥水管理以及病虫害防治不规范等问题,自2012年开始,江苏丘陵地区镇江农业科学研究所在句容市华阳镇镇江农科所葡萄试验园,通过连续6年对阳光玫瑰葡萄栽培技术的研究,创新了一套较为完善的阳光玫瑰葡萄标准化栽培技术.在分析阳光玫瑰葡萄的品种特性及种植现状的基础上,从产地环境、建园、架式、整形修剪、新梢管理、花果管理、土肥水管理、病虫害防治、采收等方面对阳光玫瑰葡萄标准化栽培技术进行了阐述.
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猪肺炎支原体醛缩酶原核表达及致猪气管上皮细胞凋亡的研究
《动物医学进展 》 2019 北大核心
摘要：为了研究Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(FBA)是否为猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)的毒力因子,并参与其致病作用,根据已发表的猪肺炎支原体醛缩酶全基因序列设计特异性的引物,以猪肺炎支原体168株基因组为模板,通过Overlap PCR点突变扩增醛缩酶基因。将FBA克隆至pET-28a(+)载体后进行序列测定和分析,结果表明,FBA基因全长864 bp。将构建的重组表达质粒pET-28a(+)/FBA转化至大肠埃希菌BL21(DE3),通过筛选获得阳性克隆,重组工程菌在IPTG诱导下成功获得表达融合蛋白猪肺炎支原体Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(Mhp FBA),大小约为35 ku。纯化蛋白并接种于猪气管上皮细胞至FBA终浓度分别为0、10、50、100、150、200μg/mL,孵育24 h后进行上清中丙酮酸浓度的检测和细胞凋亡检测。结果上清中丙酮酸浓度随着FBA浓度的上升,出现先极显著上升(P<0.01)、后急剧下降的现象;细胞平均凋亡率依次分别为3.54%、10.91%、13.99%、27.19%、32.84%和40.71%,并随着FBA浓度的升高而升高,且相比阴性对照组差异均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。成功构建了Mhp FBA重组菌,表达获得了Mhp重组蛋白FBA,该蛋白可能为猪肺炎支原体的毒力因子,参与猪肺炎支原体的致病作用,从而为进一步开展Mhp致病机理和药物研究奠定基础。
关键词： 猪肺炎支原体 果糖二磷酸醛缩酶 原核表达 气管上皮细胞 凋亡
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肉种鸡饲粮添加肌苷酸对生长后期子代肉鸡生长性能及血清生化指标的影响
《畜牧与兽医 》 2019 北大核心
摘要：本试验旨在研究肉种鸡饲粮中添加不同水平肌苷酸(IMP)对生长后期(22～42日龄)子代生长性能和血清生化指标的影响。试验选取遗传背景相同、体重相近的20周龄健康爱拔益加(Arbor Acres)肉种鸡480只,随机分为4组,Ⅰ组(基础日粮)、Ⅱ组(基础日粮+0.2%肌苷酸)、Ⅲ组(基础日粮+0.5%肌苷酸)和Ⅳ组(基础日粮+1%肌苷酸)。子代肉鸡根据肉种鸡饲粮中肌苷酸添加情况相应分为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组,每组6个重复,每个重复80只,子代肉鸡仅饲喂基础日粮,试验期为子代肉鸡22～42日龄。结果显示:与Ⅰ组相比,22～42日龄子代肉鸡各组生长性能无显著差异(P>0.05);在子代肉鸡42日龄时,与Ⅰ组相比,Ⅱ组、Ⅳ组子代肉鸡血清中总蛋白(TP)的含量显著提高(P<0.05);与Ⅰ组相比,Ⅲ组、Ⅳ组血清中低密度脂蛋白(LDL-c)含量显著提高(P<0.05);与Ⅰ组相比,Ⅱ组、Ⅳ组血清中甘油三酯(TG)含量显著降低(P<0.05)。以上结果表明,肉种鸡饲粮中添加肌苷酸对子代生长性能无显著影响,但饲粮中添加0.2%肌苷酸可显著提高生长后期子代血清中TP的含量,降低TG的含量,添加0.5%和1%肌苷酸可显著提高生长后期子代血清中LDL-c含量,且添加1%肌苷酸可显著提高TP含量。
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不同浓度NaCl处理对发芽玉米中类胡萝卜素富集的影响
《现代食品科技 》 2019 北大核心
摘要：本文旨在研究不同浓度NaCl处理对发芽玉米籽粒中类胡萝卜素富集、抗氧化能力及其合成途径中关键酶基因表达量的影响。结果表明,NaCl胁迫下,发芽3 d玉米籽粒的发芽率和芽长显著下降,呼吸强度显著增加。随NaCl浓度升高,发芽玉米籽粒中类胡萝卜素含量及其合成途径中关键酶基因表达量先上升后下降,300 mmol/L NaCl处理下均达到最大值,其中叶黄素和玉米黄质含量分别为对照的1.19和1.30倍。同时,其超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性及总抗氧化能力显著增加。NaCl浓度大于300mmo/L时,关键酶基因相对表达量均下降,类胡萝卜素的合成被抑制。NaCl处理可提高类胡萝卜素合成相关酶基因表达量,促进叶黄素、玉米黄质等类胡萝卜素富集,同时其抗氧化能力有所提高。研究结果为玉米籽粒富集类胡萝卜素开创了新思路,并为开发玉米籽粒保健功能食品提供理论依据和技术支撑。
关键词： NaCl胁迫 类胡萝卜素 玉米籽粒 发芽 关键酶基因
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IBDV和NDV共感染对DF-1细胞的协同致病作用
《中国兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)共感染对DF-1细胞的致病作用,本试验将IBDV和NDV以单独/共同形式感染DF-1细胞,镜下观察可见共感染组最早在感染48 h后出现细胞病变现象(CPE),其他感染组在72 h后出现明显CPE;细胞活性检测结果显示共感染组在48 h出现明显下降,在72 h显著低于其他组.感染上清中共感染组与单感染组病毒增殖曲线基本一致,均表现为24~72 h处于病毒增殖期.荧光定量PCR检测结果显示,共感染组细胞内NDV核酸载量均显著高于单感染组,其IBDV核酸载量在48 h高于单感染组;共感染组MDA5转录水平在24 h显著低于其他组,在48 h显著高于其他组;各感染组Ⅰ型IFN转录水平受到明显抑制,其中共感染组IFN-β转录水平显著低于单感染组.本研究结果表明IBDV与NDV共感染导致细胞病变加剧并促进胞内病毒复制,明确了病毒共感染具有协同致病作用;还发现病毒共感染导致MDA5-IFN信号通路出现异常,这为下一步解析IBDV与NDV共感染对宿主天然免疫系统的影响及协同致病机制奠定基础.
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叶面喷施硒肥对小麦籽粒及面粉硒含量的影响
《核农学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了探明叶面喷施硒肥对小麦籽粒及制粉各粉路硒含量的影响,本研究选用4个小麦品种,在拔节和抽穗期分2次喷施0. 017%亚硒酸钠叶面肥,并对成熟期籽粒进行制粉,分析各粉路的总硒、无机硒和有机硒含量.结果表明,叶面喷硒对小麦籽粒和面粉的总硒、有机硒和无机硒含量的影响存在品种间差异.喷施硒肥后,4个小麦品种籽粒的总硒含量提高了26. 4~35. 8倍,但小麦籽粒产量无显著变化.皮磨粉、心磨粉、统粉、小麸和大麸5种粉路中,小麸的总硒含量最高,其次为大麸,皮磨粉、心磨粉和统粉的总硒含量较低.与硬质小麦相比,软质小麦出粉率低,面粉的总硒量损失较多.经制粉,对照和喷硒样本的总硒积累量分别损失52. 97%~69. 28%和36. 73%~44. 51%.对照样本中,各粉路的有机硒含量略高于无机硒含量;而喷硒处理样品中,除宁麦20的小麸外,各粉路的有机硒含量均略低于无机硒含量.本研究揭示了制粉粉路硒分布规律,这对于富硒小麦的加工利用具有重要的指导作用.
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