科研产出
拟穴青蟹苗种MCRV检测方法的建立及应用
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：拟穴青蟹(Scylla paramamosain)苗种携带青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus, MCRV)对后期养殖具有极大的风险。培育无MCRV苗种，从源头切断该病毒传播，已成为当前青蟹养殖中亟待解决的关键问题。为提高青蟹苗种MCRV检测的灵敏度，本研究选择MCRV的高表达基因VP11作为靶标，设计特异性引物和Taq Man-MGB探针，以标准品质粒和RNA为模板，通过优化反应体系和反应程序，建立了一种适用于青蟹苗种MCRV检测的TaqMan-MGB实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法，能够实现对MCRV的精准检测。在1×10～8～1×10～1 copies/μL标准品质粒(或dsRNA)的范围内，起始模板浓度对数值与反应循环数间呈良好的线性关系，最低可精确定量10 copies标准品质粒或dsRNA/反应的样品，该方法最低理论检测极限为2.5 copies标准品质粒/反应。以青蟹双顺反子病毒(MCDV)、对虾白斑综合症病毒(WSSV)、十足目虹彩病毒(DIV1)、虾肝肠胞虫(EHP)及副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)核酸样品作为模板进行检测，均未产生特异性扩增。该检测方法对质粒和dsRNA样品的变异系数分别为1.40%和0.98%，具有良好的重复性和稳定性。使用该方法和SYBR Green qRT-PCR方法同时对14份不同发育阶段蚤状幼体进行检测，MCRV检出率分别为78.57%和57.14%。上述研究结果表明，该检测方法稳定性好、特异性强、灵敏性更高，适用于不同发育阶段青蟹幼体的MCRV检测，可为无MCRV青蟹苗种的生产提供关键技术支撑。
关键词： 拟穴青蟹 MCRV 检测方法 TaqMan qRT-PCR 苗种
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大口黑鲈源迟缓爱德华氏菌的分离鉴定及中草药的体外抑菌试验
《中国预防兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为明确扬州地区桂鲈渔业养殖场大口黑鲈(Micropterus salmoides)出现体表、鳍条充血、肛门红肿等症状的致病原,并了解该病原的药敏性及对中草药的敏感性等,本研究从患病大口黑鲈的肝脏和肠道组织中分离纯化得到一株优势菌,命名为LYG221206株.采用LB固体培养基培养后可见圆形、光滑、湿润且边缘整齐的灰白色(略透明)的菌落;经革兰氏染色后镜检可见,分离菌为革兰氏阴性菌,呈短直杆状;经生理生化鉴定结果显示分离菌与标准株迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)特征一致;通过16S rRNA基因的PCR扩增并测序进一步表明分离菌为E.tarda.对分离菌株LYG221206进行回归试验,结果显示,该分离菌对大口黑鲈的半数致死量(LD50)为1.54×106 cfu/mL,且可从感染组患病大口黑鲈肝脏及肠道组织再次分离获得与分离菌形态及生化特征一致的菌株.通过Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法检测分离菌株LYG221206对9种抗菌药物的敏感性,结果显示,分离菌对强力霉素、恩诺沙星等6种药物敏感,对新霉素和复方新诺明2种药物中介,对多粘菌素1种药物耐药.采用平板打孔法测定分离菌LYG221206对36种单方中草药及10种复方中草药的敏感性,根据2倍稀释法测定中草药对分离菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果显示,分离菌对五味子、五倍子和石榴皮极度敏感,对丁香等6种中草药高度敏感,对赤芍等5种中草药中度敏感,对夏枯草等22种中草药不敏感.测得五味子与五倍子对分离菌的MIC和MBC分别为15.63 mg/mL和31.25 mg/mL;诃子等7种中草药对分离菌的MIC为31.25 mg/mL~62.50 mg/mL,MBC为62.50 mg/mL~125.00 mg/mL;黄连对分离菌的MIC为125.00 mg/mL,MBC为125.00 mg/mL~500.00 mg/mL;赤芍等中草药对该菌的MIC和MBC均为250.00 mg/mL~500.00 mg/mL.在复方中草药中,分离菌对五味子+石榴皮等5种复方中草药极度敏感;对五味子+丁香等5种复方中草药高度敏感.测得五味子+石榴皮等5种复方中草药对分离菌的MIC为15.63 mg/mL,MBC为31.25 mg/mL~62.50 mg/mL;五味子+地榆等5种复方中草药对该菌的MIC为31.25 mg/mL~62.50 mg/mL,MBC为62.50 mg/mL~125.00 mg/mL;上述结果首次表明单方中草药中五味子、五倍子的抑菌效果最好,复方中草药中五味子+石榴皮、五味子+五倍子、五味子+地榆、石榴皮+五倍子、石榴皮+丁香复方中草药的抑菌效果较好.本研究为E.tarda引起的大口黑鲈疾病的防控提供参考依据.
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聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯/淀粉复合单丝的人工海水降解性能
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：[目的]开发可降解渔具材料,解决因丢失渔具造成的"幽灵捕捞"和"白色污染"问题. [方法]采用熔融纺丝法制备聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)单丝与PBAT/淀粉复合单丝,对比分析不同人工海水降解环境下降解5 个月的PBAT单丝和PBAT/淀粉复合单丝热力学、力学性能、降解失重率、红外光谱和微观结构变化,研究温度、pH对 2 种单丝的降解性能的影响. [结果]淀粉的添加使得PBAT复合单丝熔融温度(Tm)移向低温,结晶熔融峰变宽;力学性能上,单丝的断裂强力有一定的下降,但结节强力保持率由 63.86%提升到 97.56%,初始阶段 2 种单丝样品的红外光谱吸收峰出现的位置与纯PBAT及纯淀粉特征峰位置大体一致.PBAT/淀粉复合单丝的降解性能显著提升,平均失重率增量达 4.92%,单丝表面的侵蚀加重,孔洞裂隙加深;从环境因素角度分析,2 种材料的降解速率随着降解环境中温度升高与pH的增加而加快. [结论]本实验系统研究了PBAT/淀粉复合单丝的海水降解性能,可为渔用降解新材料的开发与应用提供参考.
关键词： 渔具材料 聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT) 淀粉 海水降解 失重率线性拟合 微观形貌
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水产养殖鱼类粪便的特性、影响因素及基于营养调控的优化处理
《上海海洋大学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：随着集约化水产养殖尤其是工厂化循环水养殖系统（Recirculating aquaculture systems,RAS）的迅猛发展，养殖水体中固体废物的高效管理已成为关键挑战。在RAS中，悬浮固体的去除效率不仅直接决定系统的运行效能，更关乎其长期稳定运行。作为养殖水体中固体废物的主要来源，鱼类粪便的物理成形性与水中稳定性是实现养殖用水高效循环利用的关键前提。而且，粪便的过度累积不仅会直接损害鱼类鳃部及体表健康，还会通过加剧微生物竞争、促进氨氮与活性磷等营养盐异常积累，引发水体富营养化与生态系统功能失衡。本研究系统梳理了养殖鱼类粪便物理化学特性、关键影响因素及营养调控策略的最新研究成果。研究发现，鱼类粪便的水中稳定性、沉降速率和颗粒形态等物理特性存在显著种间差异，并受养殖环境与饲料组成的双重调控；尽管粪便化学组成与饲料存在同源性，但其营养成分存在显著差异，其中氮、磷等元素的高度富集是造成水体污染的主要诱因。在营养调控策略方面，饲料优化作为源头治理的核心路径，可通过调整营养成分、添加蛋白酶、植酸酶等外源酶制剂提升营养消化率；借助黏合剂与浮力调节剂优化粪便物理性状；以及利用益生菌、功能性寡糖等添加剂调节肠道微生态，间接改善粪便组成。尽管当前研究已取得阶段性进展，但针对不同养殖模式与品种的特异性研究仍有待加强。本研究旨在为创新饲料技术研发、推动水产养殖业绿色可持续发展提供系统性理论依据。
关键词： 粪便特性 粪便清除效率 营养调控 养殖鱼类 工厂化水产养殖
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基于RAA-CRISPR/Cas13a的鲤春病毒血症病毒快速检测方法的建立
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus, SVCV)是一种高致病性病原，对鲤科鱼类造成巨大危害，被世界动物卫生组织列为必须通报疫病。2002年，鲤春病毒血症(spring viremia of carp,SVC)在中国首次检出后，迅速在全国蔓延，给我国鲤鱼养殖业造成巨大威胁。因此，我国农业农村部将其列为二类动物疫病。迄今为止，早期、快速、准确的诊断仍然是控制其传播和流行的重要手段。本研究基于CRISPR/Cas13a系统结合重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided amplification, RAA)，通过对GenBank上登录的SVCV全基因序列比对，针对SVCV聚合酶L基因高度保守的区域设计了一组RAA扩增引物和相应cr RNA；建立了一种可用于SVCV现场快速检测的RAA-CRISPR/Cas13a的方法，可以覆盖SVCV的4种不同基因型(Ia、Ib、Ic和Id)。按照世界动物卫生组织推荐的检测方法验证程序，经实验验证该检测方法有较好的重复性，最低检出限为115 copies/μL，与其他病原之间不发生交叉反应。通过对实验室分离保存的60份来自进出境水生动物疫病监测、国内重大水生动物疫病监测以及攻毒实验的样本进行检测，RAA-CRISPR/Cas13a检测结果与实时荧光定量PCR、套式RT-PCR和病毒分离培养结果完全一致，诊断灵敏度和诊断特异性均达到100%。采用本研究建立的方法在4个不同实验室开展比对，在相同条件下对20份样本进行检测，4个实验室的检测结果一致。结果表明，本研究建立的方法重现性良好，为首次采用CRISPR-Cas13a系统进行SVCV检测的研究，对SVCV快速诊断和防控具有重要现实意义。
关键词： 鲤春病毒血症病毒 恒温扩增 CRISPR 重组酶介导等温核酸扩增技术
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三峡库区四种小型鱼类能量溯源及时空差异
《水生生物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为评估三峡库区食物利用和食物链的营养转化效率,研究运用碳氮稳定同位素方法探究了浮游藻类、沿岸带C3植物、C4植物及着生藻类四种基础碳源对银鮈(Squalidus argentatus)、蛇鮈(Saurogobio dabryi)、似鳊(Pseudobrama simoni)和?(Hemiculter leucisculus)四种小型鱼类能量贡献比例的时空差异.结果显示,各种碳源生物的δ13C值和δ15N值均存在显著性差异(P<0.05),能很好地区分各基础碳源.Bayesian混合模型结果表明,浮游藻类均对四种小型鱼类的能量贡献比例最高,外源性碳源对小型鱼类能量的贡献率在不同水文时期无显著性差异(P>0.05),但是在空间尺度上存在极显著性差异(P<0.01).研究表明,内源性碳源是库区小型鱼类的主要能量来源,但外源性碳源对小型鱼类的贡献率在三峡库区河流纵向梯度上有较为明显的变化规律.越靠近库首,外源性碳源的贡献率越高,这可能与不同区域消落带的淹没特征和在库首静水环境下外源性碳源颗粒沉积有关.
关键词： 三峡库区 稳定同位素分析 小型鱼类 营养溯源 基础碳源
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急性高温胁迫对河鲈组织损伤、抗氧化酶活性及热休克蛋白基因表达的影响
《淡水渔业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究急性高温胁迫下河鲈(Perca fluviatilis)组织损伤、抗氧化指标以及应激相关基因的变化规律，揭示河鲈机体对高温胁迫的响应及耐受限度，为河鲈在高温环境下的科学养殖提供参考依据。采用突变升温的方法，以29℃作为急性高温胁迫温度，于0、3、6、12、24 h后取河鲈肝脏、鳃样本，分别开展组织病理学分析、抗氧化指标分析以及应激相关基因hsp70和hsp90的qPCR检测。结果表明：河鲈肝脏和鳃组织随着胁迫时间的延长，都表现出明显的损伤。在高温胁迫24 h后肝脏细胞出现水肿，空泡化，细胞核萎缩；鳃小片末端出现细胞水肿、膨大、弯曲变形的现象，部分鳃小片甚至还会出现表皮脱落的情况。抗氧化指标方面，高温应激后抗氧化酶活性均有不同程度的变化。随着高温胁迫时间的延长，河鲈肝脏中CAT活性呈先升高后降低的趋势；SOD活性呈升高的趋势；GSH-Px活性呈先升高后降低的趋势；MDA含量呈升高的趋势。河鲈肝脏的hsp70基因相对表达量呈先升高后降低再升高再降低的趋势；hsp90基因相对表达量呈先升高后降低再升高趋势。结果表明急性高温胁迫下河鲈机体为应对高温胁迫带来的损伤，通过激活抗氧化系统、提高hsp70和hsp90的基因表达量来进行自我调节，但胁迫时间过长或胁迫温度超过其自身调节能力，导致河鲈出现组织病理损伤。本研究揭示了河鲈对高温的耐受能力，为河鲈的抗高温应激技术研究奠定了科学基础，对河鲈在高温季节的养殖管理具有指导意义。
关键词： 河鲈(Perca fluviatilis) 高温胁迫 抗氧化酶 组织病理 热休克蛋白基因
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不同障碍物对3种幼鱼游泳能力的影响
《中国水产科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为了解不同障碍物所形成的复杂水流环境对鱼类游泳能力的影响,以青鱼(Mylopharyngodon piceus)、中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)和长鳍吻鮈(Rhinogobio ventralis)幼鱼为对象,通过在游泳水槽中放置圆形、方形和半圆形柱状障碍物,研究3种幼鱼的临界游泳速度及感应流速差异.结果表明,青鱼幼鱼在半圆形障碍物影响下临界游泳速度与无障碍物组无显著性差异(P>0.05),在圆形和方形障碍物影响下临界游泳速度显著降低(P<0.05),绝对临界游泳速度(Uacrit)分别降低了 36.3%和15.6%,相对临界游泳速度(Urcrit)分别降低了 34.9%和15.3%;中华倒刺鲃幼鱼在方形障碍物下Urcrit为(15.20±0.84)BL/s,相较于对照组[Urcrit=(17.42±0.55)BL/s]降低了 12.7%(P<0.05);长鳍吻鮈幼鱼在3种障碍物影响下的临界游泳速度均显著低于无障碍物组(P<0.05),其中圆形障碍物组影响最为显著,Uacrit和Urcrit为(62.83±7.52)cm/s和(8.17±0.73)BL/s.青鱼、中华倒刺鲃幼鱼感应流速在无障碍物和不同形式障碍物下均无显著性差异(P>0.05),长鳍吻鮈幼鱼感应流速在圆形和方形障碍物影响下差异显著(P<0.05),3种幼鱼绝对感应流速(Uaind)范围为1.60~5.20 cm/s,相对感应流速(Urind)范围为0.17~0.62 BL/s.在相同障碍物环境中,中华倒刺鲃Urcrit和Urind均显著高于青鱼和长鳍吻鮈.3种实验鱼临界游泳速度均大于感应流速.研究发现,障碍物对鱼类的临界游泳能力具有显著影响,而对幼鱼感应流速的影响仅在种类间表现出显著性差异.结果可为鱼类栖息场所和鱼道设计提供参考.
关键词： 障碍物 青鱼 中华倒刺鲃 长鳍吻鮈 临界游泳速度 感应流速
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禁捕初期石臼湖鱼类早期资源现状及其与环境因子的关系
《水生生物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为了解石臼湖鱼类早期资源现状及环境影响因素,于2023年5月9日—2023年8月9日期间,针对石臼湖鱼类早期资源开展了逐日调查。结果显示,共采集仔稚鱼14251尾,鉴定出鱼类39种,隶属于9目10科,其中鲤科鱼类最多共27种,占总物种数的69.23%。优势种共5种,为子陵吻虾虎鱼（Rhinogobius giurinus）、贝氏餐（Hemiculter bleekeri）、餐（Hemiculter leucisculus）、陈氏新银鱼（Neosalanx tangkahkeii）、飘鱼（Pseudolaubuca snensis）。群落构成以小型鱼类为主,种类数占总物种数的56.41%。依据产卵类型划分,产沉性卵鱼类物种数最多共23种,占总物种数的58.97%;产沉性卵鱼类采集数量最多共12394尾,占总数量的86.97%。就时间特征而言,共出现5次密度峰值,最大值出现在5月13日,为548 ind./100 m2;7月30日出现最后一个峰值,为365 ind./100 m3,此后仔稚鱼密度开始波动下降。就空间特征而言,北岸仔稚鱼密度均值最高为108 ind./100 m3,南岸最低为79 ind./100 m3,南岸、河道中线和北岸仔稚鱼密度差异不显著（P>0.05）。冗余分析（RDA）表明,水温、水位、溶氧量和透明度与仔稚鱼密度关联性较强。研究结果填补了石臼湖水域鱼类早期资源的研究空白,可为通江湖泊鱼类资源养护和生态修复提供科学依据。
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温度对美洲鲥胚胎发育的影响
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究不同孵化温度对美洲鲥胚胎发育、仔鱼孵化的影响。【方法】实验设置16、18、20、22和24℃共5个孵化温度，观察胚胎发育情况和鱼苗存活率，并分析孵化温度为18℃时美洲鲥不同胚胎发育阶段基因表达情况。【结果】16、18、20和22℃4个孵化温度下都能观察到胚胎的完整发育过程。随着孵化温度的升高，孵化总时长减少，孵化温度为16℃、18、20和22℃时，从受精卵到仔鱼出膜总用时分别为103 h 50 min、84 h 40 min、78 h 40 min和64 h 50 min。孵化水温为18和20℃时，孵化率、仔鱼存活率显著升高。孵化水温22℃时，胚胎死亡率显著高于16、18和20℃。18℃孵化温度下，美洲鲥胚胎中hif1α、hspb1、fbf1、hec、asgr1和vegfα等基因在细胞增殖期表达抑制，而细胞分化期表达显著激活。在出膜期和出膜前的器官形成期，hec的表达被显著激活。在胚胎发育早期sod和gst高表达，而hspb1和hif1α则是在器官形成后期和出膜期高表达。Rbpj在胚胎发育早期的多细胞器和囊胚期显著高表达，并随着胚胎的发育表达下调。【结论】美洲鲥孵化最适温度为18～20℃，囊胚期是美洲鲥胚胎发育的关键时期，从此时期开始，与细胞形成、细胞分裂相关的基因表达开始下调，而与器官形成、细胞分化等功能相关的基因表达明显上调。本研究为美洲鲥早期发育的调控及苗种繁殖、选育提供了参考依据。
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