科研产出
黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因(bgl1)的克隆及其在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达
《农业生物技术学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：β-葡萄糖苷酶是纤维素酶系三大成员之一,被认为是纤维素糖化的限速酶。本研究克隆黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因(bgl1),并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中进行表达分析。以GenBank上黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因(bgl1)序列为模板,设计特异性引物,从黑曲霉(Asperjillus niger)基因组DNA中扩增目的片段,通过SOE-PCR的方法将猪腮腺分泌蛋白信号肽序列sp和bgl1相连,成功构建分泌型真核表达载体pc6-sp-bgl1,利用脂质体介导法瞬时转染哺乳动物CHO细胞,通过RT-PCR和Western blot检测,最后通过DNS(dinitrosalicylic acid)法测定表达产物酶学活性。PCR扩增得到的目的序列与文献报道序列的相似性为91%,预测的蛋白氨基酸序列相似性为99%。RT-PCR和Western blot检测证明,外源基因bgl1在CHO细胞中得到表达;分泌到细胞培养上清中的重组蛋白对水杨素的水解活性为1.74U/mL,说明重组蛋白具有β-葡萄糖苷酶活性。本研究克隆得到黑曲霉bgl1基因并在哺乳动物CHO细胞中进行表达,为β-葡萄糖苷酶在单胃动物中的利用提供了基础研究资料。
关键词： 黑曲霉 β-葡萄糖苷酶BGL1 克隆表达 CHO细胞 酶活测定
全文链接
请求原文
兜兰查尔酮合成酶基因的克隆与表达分析
《热带作物学报 》 2012 CSCD
摘要：以同色兜兰为试材,采用RT-PCR和RACE方法从花中获得一个兜兰查尔酮合酶基因(chalconesynthase,CHS)的cDNA全长,命名为PcCHS,GenBank登录号JQ030889。序列分析表明,PcCHS全长1 424 bp,包含106 bp的5′非编码区、133 bp的3′非编码区和一个长度为1 185 bp编码394个氨基酸的开放阅读框。氨基酸序列分析显示,PcCHS具有CHS家族保守的功能活性位点和特征多肽序列。序列比对表明,PcCHS与兰科植物的蝴蝶兰、文心兰和石斛兰等的CHS蛋白有很高的同源性。系统进化分析显示,PcCHS与兰科植物的CHS分支2的蛋白亲缘关系比较近。表达分析表明,PcCHS在花芽发育过程中均有表达,在花中的表达量最高,其次是蕊柱,再次是苞叶、子房、花瓣和萼片,在唇瓣中表达量最低,在根、叶和花茎中几乎检测不到。
关键词： 兜兰 查尔酮合成酶基因 RT-PCR 基因克隆 基因表达
全文链接
请求原文
禽呼肠病毒σC基因的表达及ELISA抗体检测方法的建立
《动物医学进展 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：将RT-PCR扩增得到的禽呼肠病毒(ARV)S1133毒株的σC基因克隆至pMD-18T-Simple载体,经酶切及测序鉴定,证明该基因片段为ARVσC基因。将该基因亚克隆至pET32a(+)成功构建了表达载体pET32a-σC。该重组质粒在大肠埃希菌BL21中经1.0mmol/L IPTG诱导5h得到最佳表达。pET32a-σC蛋白的分子质量为55ku,Western blot分析表明,该重组蛋白能与ARV阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性。将纯化好的ARVσC蛋白作为包被抗原,确定了该方法的抗原最适包被浓度为2μg/mL,血清的最适稀释度为1∶400。用建立的ELISA方法检测接种过ARV疫苗的65份临床血清样品,测得44份为阳性,阳性率为67.7%;未接种ARV疫苗的30份血清样品检测结果均为阴性。
关键词： 禽呼肠病毒 σC基因 克隆与表达 酶联免疫吸附试验
全文链接
请求原文
桑叶总多酚含量与体外抗氧化能力的相关性研究
《蚕业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为揭示桑叶抗氧化作用的物质基础,于不同生长季节采摘6个代表性桑品种的桑叶,测定桑叶提取液中的总多酚含量以及体外总抗氧化能力、清除.OH能力和清除O2-.能力,分析桑叶总多酚含量与体外抗氧化活性的量效关系。6个供试桑品种以抗青10号的桑叶提取液抗氧化活性较强,不同生长时期采摘桑叶样品以5月份采摘桑叶的提取液抗氧化活性较高。不同桑品种桑叶提取液的抗氧化、清除.OH和O2-.活性与桑叶提取液中的总多酚含量的相关性都达到极显著水平,二者之间具有良好的量效关系。研究结果说明桑叶中的总多酚是其抗氧化作用的重要物质基础之一,桑叶总多酚含量可以作为评价不同桑品种及不同生长季节药用桑叶抗氧化作用的参考标准。
全文链接
请求原文
春甜橘及其芽变品种明柳甜橘特性的比较研究
《热带作物学报 》 2012 CSCD
摘要：‘明柳甜橘’是从‘春甜橘’中选育出来的柑橘品种,果实品质优良,在粤东地区成熟期为2月下旬至3月中旬。本研究经过多年田间观察和分析,比较系统地分析了明柳甜橘与春甜橘形态特征,表明两者物候期、生长和结果习性相似,但明柳甜橘树势生长相对旺盛,坐果率高,平均单果重约比春甜橘大37.0%,而且果皮较厚,果面有明显柳纹,采前裂果少。果实品质方面,两者可溶解性固形物、总糖、Vc和果肉中膳食纤维含量差异不显著,但明柳甜橘的总酸含量、果肉及果皮中粗纤维含量显著高于春甜橘。
全文链接
请求原文
中早熟辣椒新品种‘汇丰3号’
《园艺学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：‘汇丰3号’辣椒是中早熟优质杂交一代新品种, 果实羊角形,青果深绿色,成熟果大红色。果长 17.0～18.1cm,果宽 2.83～2.94cm,肉厚0.32～0.37cm,单果质量42.3～44.7g,单株产量 0.42～0.59kg。商品性好,耐贮运,品质佳。田间表现中抗病毒病,耐热性、耐寒性、耐涝性和耐旱性均强。适合在华南地区露地栽培。
全文链接
请求原文
生态条件对籼粳交F_2穗部性状与程氏指数的影响
《植物遗传资源学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：选用籼粳交组合(晚轮422×沈农265)F2为试材,分别在四川、上海、辽宁同年种植,研究在不同生态条件下穗部性状和程氏指数的变化趋势以及二者的关系。结果表明:在四川和上海穗较长、2次枝梗数较多、结实率较低并且与着粒密度呈极显著负相关,而在辽宁穗较短、1次枝梗数较多、结实率较高并且与着粒密度关系不显著。从北到南,程氏指数、叶毛、1-2穗节长、抽穗时壳色和子粒长宽比均呈偏粳分布,并且偏粳程度呈增加趋势。程氏指数与穗颈弯曲度相关性在各地区均未达显著水平;在四川与着粒密度呈显著负相关,与结实率和千粒重呈显著正相关;在上海与结实率呈显著正相关;在辽宁与着粒密度、1次枝梗数、2次枝梗数、粒数呈极显著负相关,与穗长呈显著正相关。因此,水稻超高产育种必须根据生态条件的差异合理地将协调穗部结构与亚种间杂交优缺点互补相结合。
全文链接
请求原文
不同生境类型茶园对茶蚜种群特征的影响
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：田间调查了不同生境条件茶园对茶蚜种群特征的影响。结果表明:小乔木茶园茶蚜分布在中层部位较多,数量大小依次为中层>上层>下层,但总个体数在3类茶园中相对较少;脱叶楹茶园茶蚜分布在上层部位较多,数量大小依次为上层>中层>下层,但总个体数在3类茶园中相对较多。3类茶园中茶蚜在不同季节间发生动态有显著差异;小乔木茶园和相思树茶园的茶蚜数量在春茶与夏茶期间发生较多,分别占56.05%、36.05%和31.46%、46.10%;托叶楹茶园的茶蚜数量在夏茶与秋茶期间发生较多,分别占41.17%和37.89%。由此可知生境条件改变对茶园茶蚜种群数量有较大影响。
全文链接
请求原文
