应用反义PEP基因表达技术提高稻米脂肪含量

吴关庭; 郎春秀; 胡张华; 陈笑芸; 王伏林; 金卫; 陈锦清; 《植物生理与分子生物学学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：以成熟种子为来源的胚性愈伤组织为受体材料,采用根癌农杆菌介导方法将反义磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvatecarboxylase,PEPCase)基因导入粳稻品种秀水11,获得一批转基因植株,并通过GUS组织化学染色、PCR检测和Southern杂交分析等方法进行了验证。对T1代的检测结果表明,所转基因已遗传给后代,且大多数株系的分离比符合3:1。T2代测定结果显示,转基因水稻株系的稻米脂肪含量比对照高出0.37±0.12个百分点,其差异大部分达到极显著水平。

关键词： 水稻 根癌农杆菌 遗传转化 反义PEP基因 脂肪含量

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兔病毒性出血症病毒基因组结构与功能研究进展

刘光清; 云涛; 倪征; 张玉颖; 《Virologica Sinica 》 2006 CSCD

关键词： 兔病毒性出血症病毒 基因组 结构 功能

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TILLING技术在植物功能基因组及育种中的应用(英文)

汪得凯; 孙宗修; 陶跃之; 《遗传学报 》 2006 SCI 北大核心 CSCD

摘要：随着拟南芥、水稻等模式植物基因组测序计划的全面完成,数据库中大量的DNA序列需要进行功能注释,而用传统的正向遗传学进行基因克隆和近年来发展的反向遗传学(如插入突变、反义RNA、RNAi等技术)方法已不能适应基因组学的发展需求,因此,研发大规模、高通量的基因功能分析方法成为当务之急。TILLING技术(Targetinginducedlocallesionsingenomes)就是在基因组生物学大背景下出现的一种全新的反向遗传学技术。TILLING技术的基本步骤是通过化学诱变方法产生一系列点突变,经过PCR扩增放大和变性复性过程产生异源双链DNA分子,再通过特异性酶切和双色电泳分析识别异源双链中错配碱基,从而检测出突变发生的准确位置。由于具有高通量、大规模、高灵敏度和自动化等特点,能够适应植物功能基因组学研究的要求,TILLING技术已经和即将在功能基因组领域发挥越来越重要的作用。TILLING技术应用于已测序完成的拟南芥和水稻中的突变位点检测并取得了巨大成功;TILLING技术应用于农作物的品种改良,可以帮助实现快速、定向改良作物的品种,同时由于TILLING采用的化学诱变技术与传统诱变育种并无二致,因此在作物改良中采用TILLING技术不存在外源基因转入引发的转基因作物(GMO)争论;由TILLING技术发展来的EcoTILLING技术,具有通量高、成本低、定位准确等优点,可以很好地进行多态性检测和研究基因的功能,已成为开展物种DNA多态性检测和不同物种演替进化研究的有力工具。本文简要介绍了TILLING的原理及操作步骤,讨论了TILLING技术的特点和优点及TILLING技术的应用前景。

关键词： TILLING 反向遗传学 突变 育种

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新型微生物杀虫剂—Spinosad(多杀菌素)的毒理学研究进展

陈建明; 左景行; 俞晓平; 郑许松; 陈列忠; 张珏锋; 《浙江农业学报 》 2006 CSCD

摘要：多杀菌素是一种大环内酯类化合物,由于其兼有生物农药的安全性和化学农药的速效性,而获得美国“总统绿色化学品挑战奖”。文章主要从多杀菌素对靶标昆虫的杀虫活性和对非靶标昆虫的毒性,多杀菌素的残留评价及分析检测方法,多杀菌素对昆虫的毒理机制等方面进行综述,并对多杀菌素的应用前景作了展望。

关键词： 微生物杀虫剂 多杀菌素 杀虫活性 毒理 残留

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三酶复合法提取大豆多肽工艺的研究

周利亘; 王君虹; 陈新峰; 王春辉; 陈坚; 袁亚; 谢磊; 《浙江农业学报 》 2006 CSCD

摘要：探讨并构建了三酶复合法提取大豆多肽的新工艺。即将大豆分离蛋白经三酶复合酶解、活性炭脱色、超滤、真空浓缩和离心喷雾干燥等提取工艺,最终获得大豆多肽。其制备的关键工艺条件为①最佳复合酶解条件:中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶比例为1∶2∶4,pH 7.0,底物浓度4.0%,酶解时间9 h;②最佳脱色处理条件:粉末活性炭用量2.0%,温度50℃,pH 3.0,吸附时间3 h;③超滤分离条件:NF-1纳滤膜,压力1.0 MPa,膜通量26.0 L/(m2.h)。

关键词： 大豆多肽 复合酶解 脱色 超滤

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GA_3诱导的单性结实‘宁海白’白沙枇杷糖代谢的研究

陈俊伟; 冯健君; 秦巧平; 刘晓坤; 吴江; 谢鸣; 《园艺学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：研究了花蕾期GA30·5、1·0g·L-1处理诱导的单性结实‘宁海白’无核白沙枇杷的糖积累与代谢特性。结果表明:两种浓度的GA3诱导的无核枇杷中,其蔗糖、葡萄糖、果糖和总糖的含量均低于正常有核果,并随处理浓度的增加而下降,其中成熟时处理与对照之间各种糖的含量差异达到显著水平。不同浓度GA3处理后,果实中蔗糖代谢酶(SS、SPS、转化酶)、己糖代谢酶(HXK、FRK)和山梨醇脱氢酶(SDH)等的活力均低于正常有核果,并随处理浓度的增加而下降。上述结果表明,GA3诱导无核,导致果实糖代谢酶活力的下降,是无核枇杷果实含糖量下降的主要因子。

关键词： 枇杷 GA 单性结实 糖代谢 糖积累

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低温弱光对生态型瓠瓜幼苗生长和生理生化特性的影响

刘永华; 吴晓花; 李国景; 汪宝根; 鲁忠富; 《浙江农业学报 》 2006 CSCD

摘要：对不同生态型瓠瓜的耐低温弱光特性研究表明,低温弱光下设施早熟栽培型瓠瓜的种子发芽率、幼苗生长速率、PSⅡ最大光化学量子产量(Fv/Fm)和净光合速率(Pn)显著高于露地栽培型。而质膜透性、丙二醛(MDA)含量和冷害指数则显著低于露地栽培型。低温弱光处理后不同类型瓠瓜的抗氧化酶(SOD,POD,CAT)活性均显著升高,且设施栽培型瓠瓜上升幅度显著高于露地栽培型。

关键词： 低温弱光 瓠瓜 抗氧化酶 光合作用 叶绿素荧光

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三种稻飞虱成虫体内酵母类共生菌的形态差异

陈法军; 曾敏; 张珏锋; 陈列忠; 吕仲贤; 叶恭银; 俞晓平; 《动物分类学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：试验采用冷冻切片技术结合显微摄像系统观察法研究了酵母类共生菌在3种稻飞虱成虫体内的存在状态、形态特性以及种类和组成。光学显微镜观察证实,3种稻飞虱成虫的头部和胸部均未观察到共生菌,在其腹部脂肪体中有大量酵母类共生菌,且以出芽进行无性繁殖,并伴有菌胞的出现。3种稻飞虱成虫体内共生菌的形态和组成明显不同。其中,褐飞虱体内的共生菌个体较大,以梭形、杆状和卵形为主,分别占共生菌总数的30·7%、53·5%和15·1%;灰飞虱和白背飞虱体内的共生菌个体较小,以卵形为主,分别占共生菌总数的93·4%和94·7%。此外,褐飞虱成虫体内的各类共生菌都显著大于灰飞虱和白背飞虱成虫体内的同种类型个体,且灰飞虱和白背飞虱体内的同种共生菌个体大小之间也存在一定差异。

关键词： 褐飞虱 灰飞虱 白背飞虱 酵母类共生菌 形态特性

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利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒

刘光清; 倪征; 云涛; 张玉颖; 杜青云; 盛祖恬; 梁华丽; 华炯刚; 李双茂; 陈剑平; 《科学通报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：在前期构建的兔出血症病毒(rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)全长cDNA分子的基础上,利用SP6RNA聚合酶系统,在体外转录合成了病毒RNA.用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞,12h后可见明显致细胞病变(CPE),用间接免疫荧光方法在RK13细胞中检测到了病毒抗原的产生.将收获的细胞培养物再次接种RK13细胞,仍然能产生明显病变.大量收取细胞培养物,经差速离心法纯化病毒后,在电子显微镜下可观察到RHD病毒粒子.结果表明,利用反向遗传学技术获得了可适应于RK13培养的RHDV,为将来研究RHDV的分子致病机理和新型疫苗等提供了有利的工具.

关键词： 兔出血症病毒 反向遗传学 全长cDNA RK13细胞

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家蚕蛋白质组研究现状与趋势

王永强; 靳远祥; 何秀玲; 徐孟奎; 孟智启; 《蚕业科学 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：蛋白质组研究是在蛋白质水平定量、动态、整体研究生物体,由此可获得疾病过程、细胞生理生化过程以及调控网络的相关信息。家蚕是鳞翅目昆虫的模式生物,随着蛋白质组学、生物信息学的迅速发展和家蚕全基因组序列的测定完成,家蚕蛋白质组研究方面也逐步展开,已在家蚕丝腺、雌性附腺、胚胎、血液及中肠蛋白质组的研究方面取得进展。利用差异蛋白质组学技术发现家蚕重要经济性状相关的功能蛋白,并探明其作用机制及调控模式,则是今后的主要研究方向。

关键词： 家蚕 蛋白质组 功能蛋白 调控机制

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