科研产出
香蕉MaCSase基因的克隆和表达分析
《中国农学通报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:旨在克隆香蕉(Musa acuminataL.AAA groupcv.Brazilian)半胱氨酸合成酶(cysteine synthase,CSase)基因,并进行序列特征、器官表达特异性和逆境胁迫下表达特性分析。通过对香蕉根的cDNA文库的测序和分析,获得了一段香蕉半胱氨酸合成酶基因的片段,运用RACE扩增技术获得基因全长,命名为MaCSase,并进行序列分析,最后利用荧光定量PCR技术分析该基因在香蕉不同器官中的表达特异性及在外源胁迫下的表达特性。序列分析显示,该基因全长1367bp,存在1个完整的开放阅读框1065bp,编码355个氨基酸。通过和已知植物的半胱氨酸合成酶基因相比,同源性达到79%以上。其中与水稻、苜蓿、葱、玉米的CSase编码的氨基酸序列的同源性分别为86%、85%、84%、84%,器官特异性分析表明,MaCSase在香蕉的根、球茎、叶片、花和果实中均有所表达,其中在球茎中表达量最高。通过对其在高盐胁迫下的表达分析显示,该基因在香蕉根中的表达随着处理时间的增加呈现上升趋势,在胁迫6h时被大量诱导。
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纤维素酶-甲醇协同提取柑橘皮总黄酮的条件优化
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:为提高柑橘皮中总黄酮的提取效率,在单因素试验的基础上,采用响应曲面法对纤维素酶-甲醇协同提取柑橘陈皮总黄酮的条件进行了优化,建立并分析了酶添加量、酶解时间、酶解温度、酶解液pH值与总黄酮得率关系的数学模型。结果表明,建立的数学模型能很好地反映各因子与黄酮得率的关系,最佳工艺条件为:酶添加量0.6%,酶解时间3 h,酶解温度63℃,酶解液pH值3.7。经试验验证,在此条件下,总黄酮得率为9.87 mg/g,与理论值9.92 mg/g无显著差异。
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不同氮肥群体最高生产力水稻品种的氮素吸收利用差异
《作物学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:选用长江中下游地区有代表性的50个早熟晚粳品种(系),设置7个氮肥水平(0、150.0、187.5、225.0、262.5、300.0、337.5kg hm^-2),得出各品种在各个氮肥水平下出现的最高生产力及其对应施氮水平,将该最高生产力定义为氮肥群体最高生产力。在此基础上,比较研究不同氮肥群体最高生产力水稻品种问氮素吸收利用的差异。结果表明,生产力处于顶层与高层水平品种的颖花量极显著高于中层、低层品种,颖花量的增加主要表现为每穗粒数的极显著增加。各生育阶段的植株吸氮量和氮素吸收速率均随着生产力等级的增加而显著增加。4个生产力等级品种间在移栽至拔节和拔节至抽穗阶段氮素积累比例差异均不大,但随着生产力等级的增加呈减小趋势;抽穗至成熟阶段氮素积累比例随着生产力等级的增加呈显著增加趋势,顶层水平品种在抽穗至成熟阶段氮素积累比例为14.94%。氮肥表观利用率、农学利用率和生理利用率均随着生产力等级的增加而增加。初步筛选出13个集高产与氮高效于一体的品种。
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应用基因芯片技术研究小鼠脾脏T细胞激活后与老龄化相关的基因表达的变化
《畜牧与兽医 》 2012 北大核心
摘要:老龄化与免疫失调有关,而T细胞发育对免疫功能的调节发挥重要作用。本实验应用抗CD3/CD28抗体刺激小鼠脾脏T细胞,应用基因芯片技术研究与老龄化相关的基因在不同时间点的变化。分别取C57BL年幼小鼠(4~6月龄)与年老小鼠(22~24月龄)的脾脏,提取T细胞,进行体外培养,并加入CD3/CD28抗体刺激T细胞后0.5 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h
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去铁胺对T淋巴细胞体外增殖、活化以及细胞周期的影响
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:分别采用MTT法、CFSE染色结合流式细胞术、双色荧光抗体染色结合流式细胞术、PI染色法检测去铁胺(DFO)对小鼠T淋巴细胞的药物毒性、对T淋巴细胞增殖、对Con A刺激下的小鼠T细胞CD69表达和淋巴细胞周期的影响。研究结果表明:DFO对淋巴细胞的毒性T细胞体外增殖、活化和细胞周期无影响;不同浓度的DFO(5、10、20、40μmol/L)能显著抑制受Con A刺激48 h和72 h后的T淋巴细胞增殖;低浓度的DFO(5、10μmol/L)对小鼠T淋巴细胞CD69的表达没有影响,高浓度(20、40μmol/L)的DFO可抑制T淋巴细胞CD69的表达;Ph能将T淋巴细胞抑制在G0/G1期。说明DFO除可通过抑制T淋巴细胞活化外,可能还通过其他机制抑制T淋巴细胞增殖,且DFO可以将淋巴细胞周期抑制在G0/G1期,可望发展成为一种新的免疫抑制干预药物。
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宽皮柑橘单核苷酸多态性的高分辨率熔解曲线分型
《园艺学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:高分辨率熔解曲线分析(High resolution melting analysis,HRM)可以检测单碱基改变引起的DNA双链熔解温度(Tm)值变化,从而可以对样本在单核苷酸多态性分子标记(Single nucleotide polymor-phism,SNP)上进行基因分型。通过分析NCBI数据库中宽皮柑橘的表达序列标签(Expressed sequence tag,EST)数据鉴别SNP位点,并用小片段扩增法高分辨率熔解曲线分型技术(High resolution melting analysis of small amplicons)分析11个宽皮柑橘(Citrus reticulata)品种以及柳橙(Citrus sinensis Osbeck var.‘Liucheng’)的5个SNP位点的基因型。结果显示,小片段扩增法高分辨率熔解曲线分型可以快速、清楚地分辨纯合与杂合基因型,在校正温度差异后也可以很好地分辨同一个SNP位点不同的纯合型。统计分析表明样本在所有SNP位点上均存在多态性,5个SNP位点的平均多态性信息含量(PIC)为0.3190,显示样本在这组SNP位点上具有较高的杂合率。
关键词: 宽皮柑橘 高分辨率熔解曲线 单核苷酸多态性 基因分型
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儿茶素单体对3T3-L1细胞损伤的保护与修复作用
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:探讨了4种儿茶素单体对Na2S2O4诱导的3T3-L1细胞缺氧损伤和H2O2诱导的细胞氧化损伤的保护与修复作用。体外培养3T3-L1细胞,利用Na2S2O4诱导细胞缺氧损伤和H2O2诱导细胞氧化损伤,采用先加入诱导剂后加入儿茶素单体和先加入儿茶素单体后加入诱导剂两种处理方式,MTT法检测3T3-L1细胞存活率的变化。结果表明,先加入诱导剂可严重损伤3T3-L1细胞,再加入4种儿茶素单体均能对3T3-L1细胞进行修复,显著地提高细胞的存活率;而先加入4种儿茶素单体再加入诱导剂,细胞受损程度则显著降低,表明4种儿茶素单体对3T3-L1细胞缺氧或氧化损伤都具有较好的保护与修复作用。
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