科研产出
柔嫩艾美耳球虫裂殖子全长cDNA文库的构建及应用
《动物医学进展 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为克隆柔嫩艾美耳球虫裂殖子阶段的功能基因的全长序列,利用SMART技术,采用Clontech公司的Creator TMSMARTTMcDNA Library Construction Kit构建了鸡球虫裂殖子的全长cDNA文库。用试剂盒提取mRNA后,以cDNA合成试剂盒合成cDNA。连接至pDNR-LIB载体,用电转化法将重组质粒转化到E.coli DH10B内得到原始文库,扩增后保存于-80℃冰箱内;最后以文库为模板,分别以研究室已成功克隆序列(EtSAG2、EtMIC-2、EtMCAT)及Sanger的部分EST序列(Contig1218)设计引物,进行PCR扩增并测序检验文库的实用性。经测定,构建的初级cDNA文库约含有8.72×107个重组子,插入的片段多在1kb～3kb之间,平均插入片段长度约1.8kb,扩增后文库保存的滴度为2.4×104 cfu/mL;通过文库的PCR扩增,不仅可以成功扩增出研究室已成功克隆的序列(EtSAG2、EtMIC-2),并成功获得EtMCAT和EST序列(Contig1218)的全长cDNA序列,经比对分析Contig1218所编码的蛋白为组织蛋白酶B样半胱氨酸蛋白酶(Cathepsin B)。结果表明,已成功构建了柔嫩艾美耳球虫裂殖子高质量的全长cDNA文库,从而为筛选鸡球虫的功能基因全长序列奠定了基础。
关键词： 柔嫩艾美耳球虫 裂殖子 cDNA文库 SMART技术
全文链接
请求原文
应用抑制性差减杂交筛选副猪嗜血杆菌4型菌株可能毒力基因
《华北农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了寻找副猪嗜血杆菌可能毒力基因,采用抑制性差减杂交技术,以HPS有毒力菌株SW124(血清4型)和无毒力菌株H465(血清11型)为研究对象,构建差减杂交文库,利用Southern Blot分析和PCR鉴定进行差异基因片段的筛选。从构建的文库中共筛选得到7个特异性差异基因片段,经同源性分析,其中5个片段分别与噬菌体重组蛋白、糖基转移酶/荚膜多糖磷酸转移酶、磷酸核糖甲酰甘氨脒合酶、核糖体蛋白丙氨酸转移酶和ABC型硝酸盐/磺酸盐/碳酸氢盐转运系统周质蛋白等编码的基因有同源性;2个差异基因片段与功能未知蛋白或假定蛋白编码基因有关。利用PCR对上述可能与毒力相关的差异基因片段在9种不同血清型HPS中的分布进行了检测,结果表明,7个片段存在于多数的有毒力菌株(血清4,5,12,14,15型)中,而在无毒力菌株(血清3,11型)中均未检测到。利用SSH技术成功构建了HPS有毒力菌株SW124和无毒力菌株H465的差异表达基因差减文库,筛选获得了7个差异基因片段,且上述片段在HPS不同血清型有毒力菌株中分布广泛。
全文链接
请求原文
高产抗瘟软米三系杂交稻新组合五优376
《杂交水稻 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：五优376是广东省农业科学院水稻研究所用不育系五丰A和恢复系广恢376配组育成的高产、稳产、抗稻瘟病的软米三系杂交稻新组合,适宜广东省中北稻作区和粤北稻作区早晚季种植,2012年1月通过广东省农作物品种审定委员会审定,审定编号为粤审稻2012010。
全文链接
请求原文
猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白质研究进展
《中国畜牧兽医 》 2012 北大核心
摘要：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种折叠的正义RNA病毒,属于动脉炎病毒科(Arteriviridae),尼多病毒目(Nidovirales)。除了动脉炎病毒科,尼多病毒目还包括冠状病毒科(Coronaviruses)。15.1～15.2kb长的PRRSV基因组通过互相重叠的开放性阅读框编码蛋白质。ORF1a翻译过程中产生pp1a多聚蛋白。ORF1b表达产生了pp1ab多聚蛋白。pp1a和pp1ab经病毒蛋白酶处理后又生成了14个非结构蛋白。一些非结构蛋白为蛋白酶(NSP1、NSP1β、NSP2和NSP4)、RNA-依赖性RNA聚合酶(NSP9)、解旋酶(NSP10)和核酸内切酶(NSP11)。ORFs2-5编码GP2-GP5,ORF6编码M,ORF7编码N蛋白。ORF2b完全包括在ORF2内,表达小的非糖基化E或2b蛋白。相当一部分的囊膜蛋白是nidoviruses所特有的,所有的结构蛋白都是感染所必需的。
全文链接
请求原文
24%甲萘威·吡蚜酮可湿性粉剂对稻飞虱的控制作用
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：2009—2010年在广州番禺进行24%甲萘威·吡蚜酮可湿性粉剂防治水稻稻飞虱田间药效试验,结果表明,24%甲萘威·吡蚜酮可湿性粉剂制剂每667 m2用量110、140、170 g处理对水稻稻飞虱速效性差,但持效期长,具有较好的防治效果;药后1、3、7 d,3个剂量处理对稻飞虱连续两年的防治效果分别为64%～71%、75%～84%和80%～95%,能有效控制稻飞虱的危害。生产上,推荐24%甲萘威·吡蚜酮可湿性粉剂防治稻飞虱的制剂用量为每667 m2用110～140 g。
关键词： 24%甲萘威·吡蚜酮可湿性粉剂 稻飞虱 药效试验
全文链接
请求原文
黄皮尖椒秀黄F1种子纯度的RAPD鉴定
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：使用180条RAPD引物对黄皮尖椒秀黄F1及其亲本模板DNA进行PCR扩增,筛选出8条特异引物,其中2条偏父型(SPS-H2、SPS-H7)、2条互补型(SPS-V10、SPS-Z6)、4条偏母型(SPS-X3、SPS-X4、SPS-Z10、SPS-Z2)。用筛选出的引物SPS-H2对该品种一批商品种进行鉴定,发现其种子纯度为96.6%,与根据果实性状进行的田间鉴定结果(95.8%)吻合,表明RAPD技术用于种子纯度鉴定所获的结果准确可靠,可节省大量的人力、物力及时间。
全文链接
请求原文
