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应用抑制性差减杂交筛选副猪嗜血杆菌4型菌株可能毒力基因

文献类型： 中文期刊

作者： 李淼 1 ; 李春玲 1 ; 宋帅 1 ; 杨冬霞 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院兽医研究所

关键词： 副猪嗜血杆菌;抑制性差减杂交;毒力基因

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2012 年 27 卷 01 期

页码： 60-65

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了寻找副猪嗜血杆菌可能毒力基因,采用抑制性差减杂交技术,以HPS有毒力菌株SW124(血清4型)和无毒力菌株H465(血清11型)为研究对象,构建差减杂交文库,利用Southern Blot分析和PCR鉴定进行差异基因片段的筛选。从构建的文库中共筛选得到7个特异性差异基因片段,经同源性分析,其中5个片段分别与噬菌体重组蛋白、糖基转移酶/荚膜多糖磷酸转移酶、磷酸核糖甲酰甘氨脒合酶、核糖体蛋白丙氨酸转移酶和ABC型硝酸盐/磺酸盐/碳酸氢盐转运系统周质蛋白等编码的基因有同源性;2个差异基因片段与功能未知蛋白或假定蛋白编码基因有关。利用PCR对上述可能与毒力相关的差异基因片段在9种不同血清型HPS中的分布进行了检测,结果表明,7个片段存在于多数的有毒力菌株(血清4,5,12,14,15型)中,而在无毒力菌株(血清3,11型)中均未检测到。利用SSH技术成功构建了HPS有毒力菌株SW124和无毒力菌株H465的差异表达基因差减文库,筛选获得了7个差异基因片段,且上述片段在HPS不同血清型有毒力菌株中分布广泛。

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