科研产出
杂色鲍血细胞分类、结构和免疫功能的流式细胞术分析
《海洋科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：应用流式细胞术对杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve)血细胞的分类、结构和免疫功能进行分析。根据细胞前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)强度的不同,可将血细胞分为三个亚群:透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞,组成比例分别为32.71%、58.17%和8.55%。血细胞的平均总凋亡和死亡率为3.76%。血细胞对荧光微球的总吞噬率为63.67%,其中吞噬1个、2个、3个及以上荧光微球的血细胞分别占22.31%、16.39%、24.96%。线粒体数量、溶酶体数量、非特异性酯酶活性和非诱导性活性氧(ROS)含量均在大颗粒细胞中最高,透明细胞最低。结果表明,杂色鲍三类血细胞在结构和功能上均存在差异,两类颗粒细胞可能在鲍类免疫过程中发挥着更为重要的作用。
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黄灯笼辣椒核心种质资源比较构建研究
《热带作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：核心种质的构建为种质资源的研究和有效利用提供了便利条件。以146份黄灯笼辣椒种质资源为试验材料,基于10个性状表型数据,采用混合线性模型分析方法无偏地预测基因型值,利用马氏距离计算种质间的遗传距离,分别采用2种取样方法(随机取样法和优先取样法),2种聚类方法(离差平方和法和类平均法),按照30%的抽样比率构建黄灯笼辣椒核心种质库。采用均值、方差、极差和变异系数4个指标评价不同取样方法和聚类方法构建核心种质库的优劣。试验结果表明,优先取样法优于随机取样法,类平均法优于离差平方和法。基于马氏距离、优先取样法、类平均法获取的43份黄灯笼椒核心资源能够代表原群体的遗传多样性。
关键词： 黄灯笼辣椒 基因型值 核心种质 取样方法 聚类方法
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地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因的克隆、烟草瞬时表达及转化拟南芥的研究
《植物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：从地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中克隆到耐高温α-淀粉酶基因全长,构建了原核表达载体,转入大肠杆菌(Escherichia coli)中,使用IPTG于28℃诱导6小时后,通过SDS-PAGE检测到目的蛋白,分子量约为55 kDa,并通过酶活力检测实验证明该蛋白具有耐高温α-淀粉酶活性。同时构建了该基因融合GFP的植物表达载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导瞬时转化烟草(Nicotiana tabacun)下表皮细胞并在荧光显微镜下观察,发现在烟草下表皮细胞的细胞质和液泡中均有绿色荧光。使用I_2-KI溶液对乙醇脱色后的烟草叶片进行染色,显色反应表明在烟草中表达的耐高温α-淀粉酶具有酶活性。最后,采用农杆菌介导的花蕾浸泡法将重组载体转化到拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,筛选到稳定遗传的耐高温α-淀粉酶基因的拟南芥纯合子。研究结果为后期开展表达耐高温α-淀粉酶的转基因植物的相关研究奠定了实验基础。
关键词： 地衣芽孢杆菌 耐高温α-淀粉酶基因 烟草瞬时表达 拟南芥
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长豇豆种质资源主要农艺及品质性状分析
《南方农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】鉴定评价长豇豆种质资源,为海南长豇豆设施栽培及种质创新利用提供参考依据。【方法】在大棚设施内种植15份长豇豆种质资源,观测其农艺性状,测定其嫩荚的干物质、可溶性糖、维生素C、粗蛋白、粗纤维和16种氨基酸含量等品质性状并对各性状进行相关性分析和种质筛选。【结果】15份长豇豆种质的主要农艺性状具有较丰富的变异潜力,其中单株荚数、初花节位、小区产量及可溶性糖含量变幅较大。营养品质分析结果表明,长豇豆富含蛋白质、天冬氨酸和谷氨酸粗蛋白含量达18.35%~27.02%,7种人体必需氨基酸占16种氨基酸总量的30.52%~36.01%。相关分析结果表明,熟性与初花节位和干物质含量呈极显著正相关(P<0.01,下同),与可溶性糖和总氨基酸含量呈显著正相关(P<0.05,下同);初花节位与总氨基酸含量呈极显著正相关,与嫩荚长呈显著负相关;单株荚数与小区产量呈极显著正相关。【结论】选育适合大棚栽培的高产长豇豆需注意选用单株荚数多的种质;选育高营养成分含量的长豇豆应注意选用初花节位高或熟性晚的种质;筛选出的种质JD 1101和JD 1025适宜海南大棚设施栽培。
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香蕉MaTPS3基因序列及表达特性分析
《广东农业科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：通过随机克隆测序的方法从香蕉根系c DNA文库中获得海藻糖合成酶基因,命名为Ma TPS3。Ma TPS3扩增获得的c DNA序列全长为2 874 bp,包含一个完整的开放阅读框1 971 bp,编码蛋白含656个氨基酸。其氨基酸理化性质分析表明,Ma TPS3蛋白属于不稳定、疏水性蛋白蛋白,等电点p I6.26,具有两个结构域TPS和TPP;序列预测分析表明,Ma TPS3蛋白定位于细胞质中,该蛋白含一个跨膜区域,不存在信号肽。通过与已知植物的TPS氨基酸同源序列比对,相似性为67.31%;其中与印度水稻、蒺藜状苜蓿TPS氨基酸的进化关系较近,同源性分别为55.13%、54.71%。器官特异性分析表明,Ma TPS3在香蕉植株的根、球茎、假茎、叶、花、果实各器官中均有表达,在叶片和花中表达量较多。q PCR分析表明,盐胁迫下Ma TPS3表达量增加,于24 h时达到最高;在冷胁迫处理下,Ma TPS3表达量较0 h时则明显下调;ACC胁迫处理下,Ma TPS3表达量逐渐增加,在24 h表达量为0 h时4倍。巴拿马病菌4号生理小种(Foc4)侵染后,Ma TPS3在根系中下调表达,在24 h时表达量显著低于0 h时。因此,Ma TPS3可能参与调控香蕉抗盐胁迫机制,从而提高香蕉耐盐性,并参与调控植物激素生物合成。
关键词： 香蕉 海藻糖-6-磷酸合成酶基因(TPS3) 生物信息学 表达分析
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海雀稗对镉胁迫的生理响应及积累特性
《江苏农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为研究海雀稗对镉胁迫的生理响应及其镉积累特性,本研究采用土培法对海雀稗进行镉胁迫,探究了不同镉浓度对海雀稗生长、根系活力、叶片膜透性、膜脂过氧化、保护酶活性以及镉积累的影响。结果表明:镉浓度>50.00 mg/kg时,随镉浓度增加,CAT活性显著下降,SOD与CAT的协同作用降低,MDA大量积累和根活力下降,植物生长受到抑制;镉浓度为0~50.00 mg/kg时,海雀稗根系活力未显著下降,保护酶活性(SOD、CAT)增强,MDA积累量和细胞膜透性未明显增加,植物受镉毒害较小。海雀稗根系对镉具有极强的富集能力,镉浓度为200.00 mg/kg时,其地上部分和地下部分镉含量分别为39.15 mg/kg和1 097.38 mg/kg。说明海雀稗对镉胁迫(0~50.00 mg/kg)能做出有效反应,并正常生长,可以作为修复土壤镉污染的备选种植植物。
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逐日太阳总辐射估算方法研究进展
《热带作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：太阳总辐射作为地球表层上的物理、生物和化学过程的主要能量来源,也是生态系统过程模型、水文模拟模型和生物物理模型研究中的必要参数。长期以来由于地面辐射观测站点的数量稀少和分布不均匀,导致逐日太阳总辐射观测数据远远不能满足研究工作需要,在很大程度上限制了作物模拟模型等模型的运用。本文从站点估算、区域估算的角度,介绍了目前国内外逐日太阳总辐射估算的主要方法,包括随机模拟、卫星遥感估算和经验模型估算。根据应用实际需要,重点总结比较了逐日太阳总辐射的经验模型估算特点,讨论了现有太阳总辐射估算存在的问题及未来研究趋势。
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蜻蜓凤梨中EIN3的克隆及其表达分析
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：乙烯诱导凤梨开花受植株年龄的影响。本研究根据从抑制差减杂交(SSH)文库中发现的c DNA片段,通过RACE技术得到EIN3(ethylene insensitive3)基因的全长c DNA序列。生物信息学分析表明,该基因与香蕉、水稻、玉米等多种植物中的EIN3同源,定名为Af EIN3。Af EIN3在凤梨植株各个部位的表达量不同,以叶片基部的表达量最高,花器官中最少;Af EIN3在不同年龄植株中的表达量不同,以成熟植株中表达量最高;乙烯处理后,在成株中,Af EIN3的表达量在1 h即达到峰值,然后逐渐下降;在幼株中,Af EIN3对乙烯的反应较迟缓,24 h时略有上升,2 d时达到一个峰值,然后下降,5 d时表达量最高。研究结果表明Af EIN3具有组织表达特异性,表达量与发育阶段有关,并受乙烯信号诱导,可能在乙烯诱导凤梨开花中起重要作用。
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一种简便有效的香蕉小分子RNA提取方法
《果树学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】提供一种简单、经济、高效的香蕉小分子RNA提取方法,以满足RT-PCR、Northern杂交等分子生物学研究的需要。【方法】以巴西蕉(Musa acuminata L.AAA group,‘Brazilian’)的叶片、雄花、果实和根系为材料,利用改良的CTAB法,结合使用PEG8000分级沉淀DNA和大分子RNA,从而获得小分子RNA。【结果】琼脂糖凝胶电泳显示小RNA带型清晰,无DNA和大分子RNA干扰,说明小RNA质量较好。获得的小RNA经紫外光谱分析其A260/A280的比值在1.872~2.020,产量可达35μg·g-1。以提取的各组织小分子RNA为模板,利用茎环RT-PCR方法在香蕉不同组织小RNA中均检测到mi RNA156a,其扩增片断大小约为70 bp,且测序结果与预测的香蕉mi R156a序列一致。【结论】本实验提供了一种简便高效的香蕉小分子RNA提取方法,可满足RT-PCR、Northern blotting及小RNA文库构建等后续分子生物学研究的需要,为研究人员在实际工作中提供了更多的选择。
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