科研产出
鸭IFN-βmRNA SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立
《福建农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[目的]建立一种检测鸭IFN-βmRNA转录水平的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法.[方法]根据GenBank中鸭IFN-β(KT428159)核苷酸序列设计并合成特异性引物,将鸭IFN-β基因克隆至pET-30a载体,以此构建的pET-30a-IFN-β阳性重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测,构建标准曲线,并进行引物特异性、灵敏度及重复性试验.[结果]该扩增特异性强,无引物二聚体及非特异性产物,熔解曲线单峰(Tm=87.94±0.16℃);Ct值在8.9~34.0线性拟合程度高,相关系数R2>99.5%;灵敏度高,最低检测限为2.84 copies·μL-1;重复性好,对来自临床的3种组织样品检测的组内变异系数小于0.13%,组间变异系数不超过1%.[结论]该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为鸭IFN-βmRNA表达水平的定量分析提供了技术手段.
关键词： 鸭;IFN-β;荧光定量RT-PCR;SYBR Green Ⅰ;mRNA
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新品系'606'乌龙茶加工过程中呈味物质的变化与品质分析
《食品工业科技 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：新品系'606'是由黄旦自然杂交后代单株选育而成的茶树新品种,加工乌龙茶香气持久,品种风格独特,制优率高.为了解新品系'606'乌龙茶在加工过程中呈味物质的变化和滋味品质特征,本实验以茶树新品系'606'为研究对象,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱等方法,对其加工过程中的氨基酸和儿茶素含量进行测定与分析,并与黄旦毛茶的含量和感官品质进行比较.结果表明:新品系'606'乌龙茶氨基酸含量总体先增后降,茶氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、γ-氨基丁酸、丝氨酸、天冬酰胺是不同加工过程中的差异氨基酸;儿茶素含量持续下降,做青和揉捻是主要的影响工序.甜味类、苦味类、酸味类和芳香类氨基酸含量均极显著高于黄旦(P<0.01);鲜叶和毛茶中表没食子儿茶素-3-O-(3-O-甲基)没食子酸酯(epigallocatechin-3-o-(3-o-methyl)-gallate,EGCG3"Me)含量(分别为12.22和7.99 mg/g)远高于其他茶树品种,可能是高EGCG3"Me的乌龙茶资源.感官审评结果表明新品系'606'呈味物质层次感丰富,具有鲜爽醇厚、顺滑回甘、水香较显的滋味特色.本实验为乌龙茶新品系品质分析、生产加工及推广应用提供参考.
关键词： 新品系’606’;乌龙茶;氨基酸;儿茶素;加工过程;呈味物质;品质分析
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低温胁迫下苦瓜叶片转录组差异基因分析及生理响应特征
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：苦瓜在生长季节遇到低温会影响其生长发育和产量,限制了种植分布区域.为了研究苦瓜耐寒性的分子机制,本研究以苦瓜自交系43为试验材料,在8℃低温胁迫处理后观察其表型并测定相关生理生化指标,再利用转录组测序技术从生理角度结合分子水平对苦瓜低温胁迫机制进行生物信息学分析.结果表明,在8℃低温胁迫下,苦瓜表现出耐低温适应性,在低温胁迫下丙二醛(MDA)含量、脯氨酸含量及电解质渗透率均呈现显著变化.分析了低温胁迫0和12 h后的转录组变化,结果发现低温胁迫处理后有916个基因上调,369个基因下调.对差异表达基因进行通路注释分析,发现大量与低温胁迫相关的代谢途径.进一步筛选到10个在其他物种报道过可能与冷胁迫相关的基因,包括MYB、WRKY以及NAC转录因子等.对植物耐低温相关的候选基因进行了实时荧光定量PCR(qRT-PCR)表达谱分析,结果与生理表型变化相吻合,同时进一步证实了RNA-seq数据的准确性.本研究基于全基因组水平分析苦瓜在低温胁迫下的转录组变化,以及耐低温相关基因动态变化和生理反应的分子机制,为揭示苦瓜中的耐寒性机理和筛选遗传改良候选基因提供了一定基础.
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基于转录组的百香果ARF基因家族的鉴定及表达分析
《福建农林大学学报(自然科学版) 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：基于转录组数据对百香果ARF基因家族（PeARFs）进行鉴定,利用生物信息学软件分析其编码蛋白的理化性质、保守结构域、保守基序、系统进化情况,同时比较了它们在‘福建3号’（黄果）和‘福建1号’（紫果）不同果实成熟阶段的表达差异.共鉴定得到13个PeARF成员,其编码的蛋白质含有365～970个氨基酸,分子质量约为39.95～106.33 ku,等电点为5.40～8.94.保守结构域分析结果显示,所有PeARF蛋白质均具有典型的B3和Auxin-resp结构域,仅4个成员（PeARF6、PeARF8、PeARF12、PeARF13）具有Aux/IAA结构域.保守基序分析表明,PeARFs共包含15个保守基序,每个成员包含保守基序类型和数目不同.亚细胞定位预测结果显示,13个PeARFs均定位于细胞核.系统进化分析结果显示,PeARFs蛋白可分为4个亚家族.13个PeARFs基因在果实不同发育期呈现一定的时间和品种表达特异性,其中PeARF1、PeARF6、PeARF7、PeARF8和PeARF10在两品种中的表达均随着果实的成熟而下降,而PeARF12则随着果实的成熟而上升.本研究表明PeARFs家族中的部分成员可能与果实的成熟密切相关,结果可为进一步揭示百香果ARF基因的功能提供依据.
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芽胞杆菌FJAT-2349脂肽对枇杷采后炭疽病菌抑制作用
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：[目的]探究解淀粉芽胞杆菌FJAT-2349脂肽对枇杷采后炭疽病菌的抑制作用.[方法]通过平板抑菌试验和活体接种试验测定脂肽对枇杷采后炭疽病的抑制效果,通过电镜分析脂肽对枇杷炭疽病菌生长的抑制作用.[结果]芽胞杆菌菌株FJAT-2349能够有效抑制枇杷采后炭疽病菌的生长,抑制率达87.8%.该菌株产生的脂肽由iturin、fengycin和surfactin组成,其中fengycin为主要成分.该脂肽对枇杷炭疽病菌抑菌圈直径可达22 mm,且抑制效果呈剂量效应.电镜结果显示,解淀粉芽胞杆菌菌株FJAT-2349脂肽会导致菌丝肿胀变形、细胞壁变薄或消失、细胞内容物减少,从而影响枇杷炭疽病菌菌的正常生长.活体接种试验表明,该脂肽能够推迟枇杷炭疽病发病时间1 d,降低枇杷炭疽病的发病率,其中治愈性脂肽处理组和预防性脂肽处理组接种枇杷炭疽病菌第4天的相对防效分别为29.2%和72.7%,平均病斑直径为4.67~5.00 mm,低于清水对照组(6.89~7.25 mm),表明先用脂肽预防性处理枇杷,能更有效地降低枇杷采后炭疽病的发生率,减轻枇杷采后炭疽病的发病程度.[结论]解淀粉芽胞杆菌FJAT-2349脂肽能够有效地抑制枇杷采后炭疽病菌.
关键词： 芽胞杆菌脂肽;枇杷炭疽病菌;抑菌;发病率
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双孢蘑菇'福蘑58'的选育报告
《菌物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：双孢蘑菇'福蘑58'是W2000单孢分离筛选的新品种.菌落形态为贴生型,菌丝在10-32℃下均能生长,最适生长温度24-28℃.结菇温度10-22℃,最适结菇温度14-20℃.子实体单生为主,丛生少,较结实,不易开伞,菌盖扁半球形,表面光滑,颜色较白,直径3.5-5.0cm,高度2.4-2.8cm.在适宜栽培条件下,平均单产比亲本菌株W2000提高10%-15%,鲜菇质量与W2000相当,比W192提升明显,成品菇比例较高,品质优良,适合鲜销市场及罐头加工.该品种可用于周年工厂化、设施化及季节性农法栽培.
关键词： 双孢蘑菇;新品种;单孢分离;菌株改良
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双孢蘑菇新型颗粒原种配方的优化
《生物技术通报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：旨在研发菌丝含量高、菌丝活力强、萌发点多、松散均一的双孢蘑菇新型颗粒原种。采用单因素和正交试验,以相对菌丝量为指标,考察了颗粒基质配方的C/N、起始pH、含水量和珍珠岩添加量对双孢蘑菇颗粒原种的影响,并优化新型颗粒原种配方;以谷粒原种为对照,通过多项指标比较了新型颗粒原种扩繁栽培种效果。结果表明,双孢蘑菇颗粒基质配方的C/N越小,相对菌丝量越大;珍珠岩添加量越少,相对菌丝量越大;颗粒原种最优配方组合A1B1C3D3,优化配方为菜籽粕78 g,麸皮10 g,粪草发酵料20 g,硅藻岩20 g,珍珠岩5 g、轻质碳酸钙15 g,起始pH 7.6,含水量54%;新型颗粒原种颗粒数280-300 n/g,多于小米原种颗粒数180-200 n/g,显著多于麦粒原种颗粒数16-18 n/g,新型颗粒原种相对菌丝量为326.5 mg/g,分别是小米原种相对菌丝量252.9 mg/g的1.29倍和麦粒原种139.2 mg/g的2.35倍。在接种量为0.2%条件下,新型颗粒原种扩繁透气袋栽培种平均菌丝满袋时间为15.8 d,短于小米原种的18.4 d和麦粒原种的19.6 d。说明新型颗粒原种较谷粒原种扩繁栽培种具有优势。
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杂交兰花色花香生物合成途径的转录组分析
《西北植物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：该研究以杂交兰(Cymbidium hybrid)不同花色花香品种‘玉凤’(K18,黄色)和‘福韵丹霞’(K24,紫红色)为材料,采用RNA-Seq技术获得杂交兰不同花期的花朵转录组数据,分析杂交兰不同时期花色/花香相关基因的表达变化,探讨杂交兰花色花香形成的分子机理,为杂交的定向改良和新品种选育提供依据.结果表明:(1)K18和K24分别获得11914和6793个差异表达基因;KEGG注释显示,有58个差异基因与花色花香合成相关;进一步分析发现,类黄酮是K18和K24的主要花色素,其合成基因在小花蕾期显著上调,其中K18通过查尔酮异构酶基因(CHI)、类黄酮-3',5'羟化酶基因(F3'5'H)和黄酮醇合酶基因(FLS)途径生成黄酮醇,K24则通过花青素合成酶基因(ANS)途径生成花青素.(2)qRT-PCR验证表明,萜类骨架基因羟甲基戊二酰辅酶基因(HMGS)、羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因(HMGR2)和甲羟戊酸-5-焦磷酸合酶基因(MVD)等的表达量均在K18盛花期最高,同时6个下游的萜烯合酶(TPS)基因在K18中表达量比K24上调100倍以上.(3)定量分析表明,K24、K18中的花色素苷总含量分别为608.74、122.28μg·g-1,K18花色苷含量仅为K24的20%;K24花中色素物质主要成分为矢车菊素苷,使其花色呈红色;K18中飞燕草素苷含量相对较高(花色为黄色).研究推测,ANS基因的较高表达可能是K24花瓣中花色苷含量高于K18的原因之一,K18通过CHI、F3'5'H、FLS途径积累了大量黄酮醇而不是花青素,从而影响了花朵颜色的决定.
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口服三七总皂甙对大黄鱼免疫功能的影响
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：将含不同浓度三七总皂甙（PNS）的饲料(0、10、50、250 mg·kg-1)连续14 d投喂大黄鱼,检测肝、脾、头肾组织部分免疫相关基因的表达,以及血清部分免疫因子的活性,结合人工注射感染变形假单胞菌的抵抗力,评估口服PNS对大黄鱼免疫功能的影响。实验结果显示,各浓度组大黄鱼血清超氧化物歧化酶（SOD）、溶菌酶（LZM）、酸性磷酸酶（ACP）和碱性磷酸酶（ALP）活性与对照组相比无显著差异;高浓度组(250 mg·kg-1)大黄鱼脾组织粘病毒抗性蛋白（Mx）的相对表达水平显著高于对照组,中浓度组(50 mg·kg-1)脾组织和低浓度组(10 mg·kg-1)头肾组织的Mx相对表达水平略高于对照组,但差异不显著;各浓度组各组织肿瘤坏死因子α链（TNF-α）的相对表达水平与对照组无显著差异,但均低于对照组;各浓度组各组织中白细胞介素10（IL-10）和主要组织相容性复合体Ⅱ类α链（MHCⅡ-α）的相对表达水平与对照组无显著差异。感染变形假单胞菌后各浓度组大黄鱼的死亡率与对照组无显著差异。结果表明,饲料中添加10～250 mg·kg-1的PNS连续投喂14 d未能明显增强大黄鱼免疫机能。
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