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中国对虾部分基因组文库构建和微卫星DNA序列的筛选

高技术通讯 2004 EI 北大核心 CSCD

摘要:以中国对虾为实验材料,提取肌肉的基因组DNA.经BSP143Ⅰ酶切后,回收500~1000BP的DNA片段,与经BAMHⅠ酶切并去磷酸化的PUC19重组,将重组载体转入大肠杆菌DH5α中.然后将其涂布于含氨苄青霉素的LB平板上,过夜培养后,经蓝白斑筛选,构建对虾部分基因组文库.采用载体质粒的通用引物进行PCR检测插入片段的大小,对基因组文库进一步进行筛选.从建立的文库中选取100个片段大小合适的克隆进行测序,其中54个克隆的DNA插入片段含有微卫星序列,共获得了111个微卫星序列,在GENBANK中注册了12个微卫星序列.本实验中还发现1个含有23BP的小卫星序列.

关键词: 中国对虾 基因组文库 微卫星DNA

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PCR-核酸探针斑点杂交法检测痕量白斑综合征病毒(WSSV)

高技术通讯 2004 EI 北大核心 CSCD

摘要:设计了2对引物用于检测对虾白斑综合征病毒(WSSV),外引物用于PCR扩增,内引物用于合成探针进行斑点杂交.结果表明,外引物PCR-电泳的检出极限为1PG WSSV DNA;PCR产物经内探针斑点杂交,可检出10FG的WSSV DNA;单纯的内探针斑点杂交只能检测出1NG以上的WSSV DNA.PCR-斑点杂交的检测灵敏度比PCR-电泳高2个数量级,比单纯斑点杂交高5个数量级.SOUTHERN杂交表明,PCR-斑点杂交检测WSSV特异可靠.该方法可用于痕量WSSV的检测.

关键词: PCR 斑点杂交 白斑综合征病毒

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流化床生物滤器净化循环水养鱼系统的工艺与特性研究

农业工程学报 2004 EI 北大核心 CSCD

摘要:封闭式集约化养鱼,需要选择和使用效果好、负荷率高的水处理方法,以提高单位水体的鱼载量和降低成本。该试验在封闭式集约养鱼系统中采用了流化床生物滤器水净化技术,并对其性能进行了研究。结果表明,在流化床生物滤器出水总氨平均值低于0.5mg/L时,鱼载量是固定床生物滤器的2~3倍,总氨负荷是固定床生物滤器的3倍,更节省水资源。采用该系统养鱼,鱼类生长正常,管理方便,占地面积和建筑费用可减少50%。

关键词: 流化床生物滤器 养鱼系统 循环水

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黄渤海中国对虾6个地理群的遗传结构及其遗传分化

高技术通讯 2004 EI 北大核心 CSCD

摘要:采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对黄渤海水域6个地理群(包括辽东湾、渤海湾、海州湾、乳山湾、海洋岛渔场及朝鲜半岛西海岸群)的中国对虾共114个个体进行了遗传多样性分析.筛选的13个随机引物共检测到96个位点(200~2500BP),利用POPGENE VERSION 1.31、TFPGA以及ARLEQUIN软件中的AMOVA进行分析.结果表明:中国对虾多态位点为25.00%~34.38%,SHANNON信息指数(H0)为0.1476~0.1852,并按朝鲜半岛西海岸-乳山湾-海州湾-渤海湾-辽东湾-海洋岛渔场群顺序呈递减趋势;有超过3/4的遗传变异来自群体内;无论是遗传分化指数GST、UPGMA聚类分析还是AMOVA群体间遗传分化ΦST分析等,均证实中国对虾群体间存在着一定程度的遗传分化,即除RSB和HZB两群间的遗传分化很弱外(GST=0.032、ΦST=0.0255),其余任意两群间的遗传分化达中等(GST、ΦST值均为0.05~0.15)或大的水平(GST、ΦST值均为0.15~0.25).

关键词: 中国对虾 地理群 RAPD 遗传结构 遗传分化

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AFLP分子标记构建中国对虾遗传连锁图谱的初步研究

高技术通讯 2004 EI 北大核心 CSCD

摘要:利用AFLP分子标记结合"拟测交"策略,以中国对虾的单对杂交亲本及其F1代为作图群体,应用MAPMAKER EXP/3.0软件,分别构建了中国对虾雌、雄的遗传连锁图谱.在中国对虾的雄性连锁图谱中,74个标记组成了5个连锁群(遗传标记数量大于3)、7个三联体、13个连锁对,总图距为951.5 CM,最大连锁群的长度为206.2 CM,最短的为7.4 CM,标记间的平均距离为12.8 CM;雌性连锁图谱中,由66个标记组成的5个连锁群,4个三联体,13个连锁对,总图距为712.7CM,连锁群的长度介于7.7CM~128.2CM之间,标记间的平均距离为10.7 CM.估算的中国对虾基因组总长度为2000 CM,所构建的连锁图谱分别覆盖了基因组长度的47.5%和35.6%.中国对虾遗传连锁图谱的构建为分子标记辅助育种、比较基因组作图以及基因定位与克隆创造了条件,并对今后其他海洋生物遗传图谱的构建具有理论价值和实践意义.

关键词: 中国对虾 AFLP 遗传连锁图谱 拟测交策略

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牙鲆淋巴囊肿病的诊断技术研究

高技术通讯 2003 EI CSCD

摘要:使用本实验室设计的PCR引物 ,在标记反应体系下 ,通过PCR反应合成了碱基数为 172bp的牙鲆 (Paralichthysolivaceus)囊肿病 (Lymphocystisdisease ,LCD)的地高辛标记探针。在其琼脂糖凝胶电泳图 172bp处有明显的亮带 ,由软件分析得出 ,合成探针的浓度为 5 0 0ng/ μl,此结果证明 ,该产物确是所需的探针 ,且具有很好的合成效率。通过实验证明本文采用的核酸探针 杂交诊断方法可以有效地定性和定位LCDV。实验结果还提示 ,LCDV是通过血液在牙鲆体内传播的、并可能同时存在垂直和水平两种传播方式。

关键词: 牙鲆 LCD 探针-杂交

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从三门峡水库水沙条件变化看潼关高程

水力发电学报 2003 EI 北大核心 CSCD

摘要:本文根据三门峡水库建库前后的水沙变化 ,特别是近年来沙量减少、泥沙粒径变细 ,以及近年来入库水量尽管大量减小 ,而三门峡库区河道及潼关以上相当长度范围河段比降并没有明显增加的事实 ,说明水沙条件变化不是导致近期潼关高程居高不下的唯一原因。分析降低潼关高程的可能性时 ,必须全面分析这些因素的变化。单独强调目前入库水量减少而否定潼关高程降低的可能性是不正确的。即使在 1 986年以后入库水量大量减少的条件下 ,库区、渭河下游和小北干流下段仍然属溯源淤积性质。溯源淤积的根源是下游壅水。所以 ,降低潼关高程的必要条件是降低三门峡水库的运行水位。

关键词: 泥沙 三门峡水库 潼关高程 泥沙淤积 水沙条件

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三门峡潼关高程可能降低的幅度研究

水力发电学报 2003 EI 北大核心 CSCD

摘要:本文根据三门峡水库长期运行和水库冲淤的资料对潼关高程可以降低的幅度进行了分析。若现在起完全敞泄三门峡水库 ,在较枯的水沙条件下 (如 1 986~ 1 993年系列 ) ,可以将潼关高程降低到 32 6m附近 ;在近年极枯的水沙条件下 ( 1 994~ 1 999年 ) ,将潼关高程降低到32 7m以下也是可能的。所以 ,小浪底水库建成后 ,放弃三门峡水库发电等任务就可以降低潼关高程 ,一定程度上消除三门峡水库长期以来对于渭河造成的不利影响 ,为渭河流域的持续发展创造条件。

关键词: 泥沙 三门峡水库 潼关高程 泥沙淤积 可能性 生态恢复

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从历史看潼关高程变化

水力发电学报 2003 EI 北大核心 CSCD

摘要:渭河在潼关流入黄河。历史上 ,潼关上、下河道受地质构造的控制 ,河槽沉降导致大量淤积。在三门峡建库前的一个短期内 ,由于水沙条件变化 ,潼关和渭河有较大的抬高。但渭河下游一直为地中河 ,说明迄今淤积还没有导致潼关高程长期大量抬高。小北干流的淤积和抬高与其河性有关 ,和潼关以下的黄河河道在河流动力学 (河势及水沙条件等 )方面有本质区别。根据小北干流长期淤积抬高而认为潼关高程也会同样淤积抬高、论据似嫌不足。三门峡水库建库后 ,潼关高程大量抬高主要是水库壅水的结果。所以降低三门峡水库的运行水位 ,可为潼关高程的降低创造必要的条件。

关键词: 泥沙 三门峡水库 潼关高程 泥沙淤积 历史

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从三门峡水库的运行看潼关高程的变化

水力发电学报 2003 EI 北大核心 CSCD

摘要:本文根据三门峡水库长期的运行资料 ,对三门峡水库淤积和潼关高程的变化进行了分析研究。潼关高程和入库水沙减少有重要的关系 ,但是水库运行也很大程度影响潼关高程。资料显示 ,三门峡水库潼关以下的淤积量和连续三年平均坝前水位有正比关系 ,而潼关高程和上述淤积又有正比相关关系。所以 ,降低水库的运用水位是降低潼关高程的必要条件。切实降低水库运行水位 ,潼关高程降低到 32 6m附近是可能的。即使在目前水沙减少的条件下 ,结合降低水位运行的溯源冲刷和中小洪水的沿程冲刷 ,降低潼关高程仍然是可能的。

关键词: 泥沙 三门峡水库 潼关高程 泥沙淤积 运行

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