科研产出
西北太平洋巴特柔鱼渔场与环境因子关系研究
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：根据美国NASA提供的卫星遥感反演获取的海表温度、海水叶绿素及海面高度三级数据产品和我国在西北太平洋的巴特柔鱼生产统计资料,统计分析了该海域巴特柔鱼资源同海表温度、海水叶绿素浓度及海面高度之间的相关关系.结果显示:柔鱼的适温范围大致为10~22℃,最适温度为15~17℃.柔鱼渔场叶绿素浓度大致为0.1~0.6MG/M3,叶绿素浓度处于0.12~0.14MG/M3之间时,渔场出现频次最高.形成渔场海域的海面高度多高于平均海面高度(SSH>0).广义加性模型计算表明:柔鱼在每年6~8月的北上索饵洄游和10~11月的南下过程中同环境要素的关系表现出不同的特征.SST同柔鱼产量的关系在北上洄游时多为正相关,南下时为负相关.6~10月份叶绿素浓度同渔获产量为负相关,11月份其相关性较小.渔获产量整体上随经度变化无显著变化,相关性较低,渔获产量与纬度的关系密切,相关性好.
关键词： 西北太平洋 巴特柔鱼 广义加性模型 海表温度 叶绿素
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检测对虾白斑综合症病毒(WSSV)与宿主细胞结合的荧光素标记法
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用蔗糖梯度离心方法提取对虾的白斑综合症病毒(WSSV),用荧光素对病毒进行标记.标记的病毒同原代培养的日本对虾组织细胞进行结合试验.在4℃结合1H,洗板去除未结合的病毒成分后,在荧光显微镜下可观察到培养的血细胞和鳃细胞带有绿色荧光,而肌肉细胞和卵巢细胞没有荧光产生,荧光的产生说明病毒与细胞已经结合.该方法与过去所用的方法相比,具有操作简便、快速、直观、消耗试剂少、比较经济等优点,可成为研究白斑综合症病毒和细胞结合的一种新方法.
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肽聚糖制剂对日本对虾非特异免疫因子的作用
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：用含不同浓度肽聚糖制剂的饵料投喂日本对虾,养殖30D后取对虾血淋巴,分析血清中溶菌活力、凝集活力、酚氧化酶活力、超氧化物歧化酶活力、溶血活力.结果显示:添加肽聚糖饵料组对虾比对照组对虾血清中的酚氧化酶活力、凝集活力均显著提高(P<0.05),高浓度肽聚糖饵料组(1*10-3)对虾血清溶血活力显著高于低浓度组及对照组中对虾的溶血活力(P<0.05);试验组与对照组中对虾的溶菌活力、总超氧化物歧化酶活力差异不明显(P>0.05).表明饵料中使用一定浓度的肽聚糖可以通过提高对虾血清中酚氧化酶等因子活力而达到提高非特异免疫力的目的.
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RAPD标记在中国对虾FENNEROPENAEUS CHINENSIS单对交配亲本及其子一代的分离方式
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：利用RAPD标记对中国对虾单对交配亲本及其子一代(全同胞家系)的分离方式进行了研究.100个RAPD随机引物扩增结果的统计分析表明,标记在F1代的分离方式可归为3类,即符合孟德尔遗传比例、偏离孟德尔遗传比例和异常分离.符合孟德尔遗传的情况又包括:不分离,亲本均有而在子代不分离的标记(代表了亲本基因型的3种组合:AA*AA、AA*AA、A A*AA)和亲本中呈多态而在子代中不分离的标记 (代表了亲本基因型的 2种组合:AA*AA、A A*AA);亲本中呈多态而在子代中1∶1分离 (代表了亲本基因型的2种组合:AA*AA、AA*A A );亲本均有而在子代中3∶1分离 (代表了亲本基因型的 1种组合:AA*AA).偏分离的标记包括,亲本中呈多态而在子代中偏离1∶1分离的标记和亲本均有而在子代中偏离3∶1分离的标记 .异常分离的标记为在F1代出现双亲均不具备的标记.3种分离位点出现的频率分别为 89. 3%, 7.4%和2.8%.其中呈1∶1和3∶1孟德尔分离规律的位点占分离位点总数的69.5%.母本特有标记和父本特有标记中符合孟德尔分离(1∶1)分别占分离位点总数的27.8%和19.5%.本研究结果证明RAPD标记结合"双假测交构想"构建中国对虾遗传连锁图谱的可行性.
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花鲈肿瘤坏死因子基因及其在LPS和病毒刺激下表达的研究
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用同源克隆和锚定PCR技术,从花鲈(LATEOLABRAX JAPONICUS)中克隆到肿瘤坏死因子α(TUMOR NECROSIS FACTOR α,TNFα)CDNA的全序列.花鲈TNFα的CDNA全长990 BP,3′非编码区域(UTR)为192 BP,5′UTR为72 BP,开放阅读框(ORF)为723 BP,可编码241个氨基酸,分子量大约为26KDA.同源性分析表明该序列与其他鱼类甚至哺乳动物的TNFα基因具有很高的相似性,并含有TNF家族的签名序列(SIGNATURE).同时,利用RT-PCR技术,对不同刺激下该基因在鱼体内的表达情况进行了初步研究,发现TNFα基因在未受刺激鱼体的头肾和脾脏中有明显的表达.脂多糖(LIPOPOLYSACCHARIDE,LPS)和虹彩病毒(IRIDOVIRUS)都可以诱导TNFα基因高水平的表达,但是在不同组织内的表达存在差异.LPS刺激后表达较强的组织是头肾和脾脏,而病毒感染后TNFα在肝脏中的表达较强.研究结果表明花鲈TNFα基因存在组成型和诱导型两种表达调控机制,在抵御病原感染过程中发挥重要作用.
关键词： 花鲈 肿瘤坏死因子(TNFα) 基因克隆 MRNA表达
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鲮生长激素CDNA的克隆及其重组表达产物的促生长活性
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素CDNA 片段,克隆的MCGH全长567BP,编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽.构建了表达载体PQE30-MCGH,转化大肠杆菌M15(PREP4),在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮MCGH在大肠杆菌中的高效表达,表达的重组蛋白占菌体总蛋白的32.13%,经WESTERN BLOTTING分析证实所表达的重组蛋白是MCGH.表达产物主要以包涵体的形式存在.重组蛋白变性、复性后,经NI-CHELATING SEPHAROSE亲和层析纯化,SDS-PAGE显示,纯化的MCGH纯度约为94%.纯化的MCGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼(OREOCHROMIS MOSSAMBICUS),经4周处理后,实验组1和2的体长增长率分别比对照组快9.38%和9.75%,体重增长率分别快23.42%和62.48%.经T检验统计分析表明,表达的重组MCGH具有显著的促罗非鱼生长作用(P＜0.05).
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中国对虾部分基因组文库构建和微卫星DNA序列的筛选
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：以中国对虾为实验材料,提取肌肉的基因组DNA.经BSP143Ⅰ酶切后,回收500~1000BP的DNA片段,与经BAMHⅠ酶切并去磷酸化的PUC19重组,将重组载体转入大肠杆菌DH5α中.然后将其涂布于含氨苄青霉素的LB平板上,过夜培养后,经蓝白斑筛选,构建对虾部分基因组文库.采用载体质粒的通用引物进行PCR检测插入片段的大小,对基因组文库进一步进行筛选.从建立的文库中选取100个片段大小合适的克隆进行测序,其中54个克隆的DNA插入片段含有微卫星序列,共获得了111个微卫星序列,在GENBANK中注册了12个微卫星序列.本实验中还发现1个含有23BP的小卫星序列.
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PCR-核酸探针斑点杂交法检测痕量白斑综合征病毒(WSSV)
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：设计了2对引物用于检测对虾白斑综合征病毒(WSSV),外引物用于PCR扩增,内引物用于合成探针进行斑点杂交.结果表明,外引物PCR-电泳的检出极限为1PG WSSV DNA;PCR产物经内探针斑点杂交,可检出10FG的WSSV DNA;单纯的内探针斑点杂交只能检测出1NG以上的WSSV DNA.PCR-斑点杂交的检测灵敏度比PCR-电泳高2个数量级,比单纯斑点杂交高5个数量级.SOUTHERN杂交表明,PCR-斑点杂交检测WSSV特异可靠.该方法可用于痕量WSSV的检测.
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流化床生物滤器净化循环水养鱼系统的工艺与特性研究
《农业工程学报 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：封闭式集约化养鱼,需要选择和使用效果好、负荷率高的水处理方法,以提高单位水体的鱼载量和降低成本。该试验在封闭式集约养鱼系统中采用了流化床生物滤器水净化技术,并对其性能进行了研究。结果表明,在流化床生物滤器出水总氨平均值低于0.5mg/L时,鱼载量是固定床生物滤器的2～3倍,总氨负荷是固定床生物滤器的3倍,更节省水资源。采用该系统养鱼,鱼类生长正常,管理方便,占地面积和建筑费用可减少50%。
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黄渤海中国对虾6个地理群的遗传结构及其遗传分化
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对黄渤海水域6个地理群(包括辽东湾、渤海湾、海州湾、乳山湾、海洋岛渔场及朝鲜半岛西海岸群)的中国对虾共114个个体进行了遗传多样性分析.筛选的13个随机引物共检测到96个位点(200~2500BP),利用POPGENE VERSION 1.31、TFPGA以及ARLEQUIN软件中的AMOVA进行分析.结果表明:中国对虾多态位点为25.00%~34.38%,SHANNON信息指数(H0)为0.1476~0.1852,并按朝鲜半岛西海岸-乳山湾-海州湾-渤海湾-辽东湾-海洋岛渔场群顺序呈递减趋势;有超过3/4的遗传变异来自群体内;无论是遗传分化指数GST、UPGMA聚类分析还是AMOVA群体间遗传分化ΦST分析等,均证实中国对虾群体间存在着一定程度的遗传分化,即除RSB和HZB两群间的遗传分化很弱外(GST=0.032、ΦST=0.0255),其余任意两群间的遗传分化达中等(GST、ΦST值均为0.05~0.15)或大的水平(GST、ΦST值均为0.15~0.25).
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