科研产出
基于水力学模型的三峡库区四大家鱼产卵场推求
《水利学报 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：卵场位置是长江流域四大家鱼资源调查的重点。对于四大家鱼产卵场位置的定位以及影响家鱼产卵繁殖的水文、水流条件等非生物的因素,一般以河段邻近水文站观测数据来推算或近似。本文采用MIKE 11商业软件,基于三峡库区622个河道断面,模拟了2002~2003年三峡库区水动力变化,而后以重庆市云阳断面为起点,根据该断面2002~2003年四大家鱼捞获卵、苗的发育时间,推求出长江上游重庆至云阳4个产卵场的位置,最后对模型法推求产卵场位置的不确定性进行了分析。
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菲律宾蛤仔重复序列28S RRNA及组蛋白H3基因的染色体定位
《高技术通讯 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：克隆了菲律宾蛤仔的28S RRNA基因(RDNA)及组蛋白H3基因,并应用FISH技术研究了它们在菲律宾蛤仔染色体上的定位情况.28S RDNA定位于一对中部着丝粒染色体的端部,在蛤仔的染色体上有一个位点;组蛋白基因定位于一对亚中部着丝粒染色体长臂的端部,在蛤仔的染色体上也有一个位点.28S RDNA基因和组蛋白基因的特异性定位准确地区分了菲律宾蛤仔的两对染色体,这两对染色体可以作为菲律宾蛤仔的染色体标记,为蛤仔统一核型的建立打下良好的基础, 也有利于对贝类细胞遗传学进行研究,同时还可辅助育苗产业的发展.
关键词： 荧光原位杂交(FISH) 28S RDNA 组蛋白H3基因 菲律宾蛤仔
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牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因在大肠杆菌中的融合表达
《高技术通讯 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：根据从实验室克隆的牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因(GENBANK登陆号DQ129693)的序列,设计了特异性引物,PCR扩增其成熟肽片段.重组至融合表达载体PGEX-4T-1中,构建成牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因融合表达载体PGEX-FHEP,转化至大肠杆菌BL21(DE3)PLYS中,筛选得到的阳性克隆用IPTG进行诱导.SDS-PAGE电泳显示在29KD处有特异性的蛋白条带出现,WESTERN-BLOTTING 检测表明已经成功表达了融合蛋白,表达的融合蛋白最高占总蛋白的21%.纯化得到的GST-FHEP用凝血酶切割后,用亲合层析得到牙鲆的抗菌肽HEPCIDIN.抑菌实验结果表明抗菌肽对大肠杆菌(ATCC25922)有一定程度的抑制作用.
关键词： 牙鲆 抗菌肽 HEPCIDIN 大肠杆菌 表达 活性
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军曹鱼淋巴囊肿病毒的系统关系研究及基因型分析
《高技术通讯 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：从患淋巴囊肿病的养殖军曹鱼肿瘤中分离到一种虹彩病毒,命名为淋巴囊肿病毒军曹鱼分离株(LCDV-RC).为探讨LCDV-RC的系统地位,从DNA水平上分析了该病毒株与淋巴囊肿病毒中国牙鲆分离株(LCDV-CN)、淋巴囊肿病毒韩国鲈鱼分离株(LCDV-SB)、淋巴囊肿病毒日本牙鲆分离株(LCDV-JF)、淋巴囊肿病毒欧洲分离株(LCDV-1)和淋巴囊肿病毒日本岩鱼分离株(LCDV-RF)的系统关系.以核衣壳蛋白(MCP)基因为分子标记,通过PCR扩增和克隆测序获得了长度为1356BP的含178个信息位点的MCP基因序列;用最大简约法、最大似然法、邻接法和BAYESIAN法构建了分子系统树并进行了置信度检验.结果表明,构建的淋巴囊肿病毒ML、NJ、MP和BAYESIAN系统树的拓扑结构一致,LCDV-RC和LCDV-SB聚为一支,LCDV-CN和LCDV-JF聚为一支,LCDV-1和LCDV-RF分别各为一支.在35种虹彩病毒的系统关系分析中,LCDV-RC与另5株淋巴囊肿病毒在系统树上聚为一大支,说明LCDV-RC与淋巴囊肿病毒的关系近于其他虹彩病毒.根据遗传距离和系统关系分析认为,LCDV-RC属于一种新的基因型,称其为淋巴囊肿病毒Ⅳ型基因型.
关键词： 虹彩病毒 淋巴囊肿病毒军曹鱼分离株(LCDV-RC) 系统关系 基因型
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表达绿色荧光蛋白基因的花鲈胚胎干细胞株的建立及其体外分化
《高技术通讯 》 2006 EI 北大核心 CSCD
摘要：以带有绿色荧光标记的基因(PCMV-EGFP)为报告基因,用GENEJAMMER、GENEJUICE和METAFECTENE三种脂质体介导花鲈胚胎干细胞(LJES1)的基因转移.实验发现,GENEJAMMER介导的细胞转化效率最高,高达27.3%,其余分别为12.1%和5.3%.转移绿色荧光蛋白(GFP)基因的LJES1细胞经过药物筛选和单克隆化培养,获得了表达GFP基因的阳性克隆细胞株,经PCR对GFP阳性细胞株的基因组DNA及提取的RNA扩增,获得了目的条带,证实了GFP基因已经整合到LJES1细胞的基因组中,并获得了正常的表达.通过体外诱导,GFP阳性细胞能够分化为神经细胞、肌肉细胞、成纤维细胞等,用悬滴法培养获得了GFP阳性细胞的拟胚体,证实了经过长期的药物筛选后,LJES1细胞仍然保持着发育的多能性.这一研究,为进一步利用海水鱼类胚胎干细胞进行遗传操作及基因工程的研究提供了方法上的探索.
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牙鲆选择性养殖群体遗传结构的微卫星分析
《高技术通讯 》 2006 EI 北大核心 CSCD
摘要：应用10对微卫星引物对三个牙鲆群体各30个个体进行了群体遗传多样性分析.普通群体的平均等位基因数为7.6,显著高于感病群体的5.80,略高于抗病群体的7.2.普通群体的10个位点的平均基因型数为11.4,而感病群体和抗病群体分别只有8.3和9.0.普通群体的平均有效等位基因数为3.97,略高于感病群体和抗病群体的3.78和3.72.普通群体10个位点最高频率等位基因的平均频率值为0.388,而感病群体和抗病群体分别为0.407和0.425.普通群体低频等位基因(0-0.05)总共有27个,而感病群体和抗病群体分别只有15个和19个.普通群体共得到14个私有等位基因,感病群体和抗病群体仅各得到3个等位基因.研究结果表明了感病群体和抗病群体两个选择性养殖群体遗传多样性的降低.
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中国对虾人工选育快速生长群体不同世代间的AFLP分析
《高技术通讯 》 2006 EI 北大核心 CSCD
摘要：利用7对AFLP引物组合检测了中国对虾连续五代选育群体基因组DNA的遗传结构,根据AFLP分析结果计算了选育世代群体间的遗传相似系数和遗传距离.结果表明,AFLP标记表现出较高的多态检测效率,7对引物共产生500余条带,平均每对引物组合检测到33.7个多态性标记,平均杂合度为0.0854~0.1025,非常适合于遗传多样性分析.结果显示,随着选育世代的增加,选育群体的遗传多样性呈现下降趋势,但随着选育时间的延长,群体之间的分化逐渐降低,群体的遗传结构开始趋于稳定,成为一个品系.
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真鲷肌肉生长抑素(MSTN)基因的克隆及表达分析
《高技术通讯 》 2006 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用同源克隆的策略,设计了3对引物,首次分离、克隆了2820BP的真鲷肌肉生长抑素(MSTN)基因组序列,该序列在GENBANK上注册(注册登录号为AY965686).经过剪接、比较,分析了真鲷MSTN基因的序列和结构特征.真鲷的MSTN基因具有3个外显子、2个内含子,整个开放阅读框编码着384个氨基酸,第1个外显子上有一个连续11个Q氨基酸的残基,C-末端具有9个保守的半胱氨基酸及一个RVRR的蛋白酶解加工位点.在第1、第2内含子和3''非翻译区上分别具有一个微卫星重复序列.RT-PCR分析表明,MSTN基因在真鲷不同组织中都有表达,但表达量具有明显的差异;MSTN在肌肉中表达量最高,其次是脑、小肠、头肾、鳃和性腺,心脏、眼睛、肝脏中只有极少量表达,脾脏中没有检测到MSTN的表达.
关键词： 真鲷 CHRYSOPHRYS MAJOR 肌肉生长抑素基因 CDNA 表达分析
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花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建
《高技术通讯 》 2006 EI 北大核心 CSCD
摘要：旨在通过花鲈胚胎干细胞(LJES1)移植构建嵌合体,证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性.采用脂质体介导法将线性化PCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内,细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达率为5%~10%,以此为供体,通过显微注射方法把20~50个LJES1细胞移植到花鲈囊胚中,共移植囊胚478枚,获得了20枚表达GFP的嵌合体胚胎,其中的15枚胚胎发育成鱼苗.荧光显微观察和PCR检测显示了LJES1细胞可在宿主胚胎内片状嵌合和单细胞分散嵌合,嵌合部位可分布于胚体的三个胚层;同时也证明GFP是一种优良的遗传标记.本实验结果为证实LJES1细胞的发育全能性提供了有力证据.
关键词： 花鲈胚胎干细胞(LJES1) 绿色荧光蛋白(GFP) 细胞移植 显微注射 嵌合体
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