科研产出
中华鲟苗种的集约化生产系统
《农业工程学报 》 2008 EI 北大核心 CSCD
摘要：以满足中华鲟苗种培育关键生态要素为依据,研制出中华鲟(Acipenser sinensis.Gray)苗种集约化生产系统,实现了中华鲟幼鲟的批量生产。该系统由生产主设施系统和配套设施系统构成,其中主设施包括4种不同规格养殖池共2534.8m2及授精和孵化设施;配套设施系统包括亲鲟运输车、供水及水处理、增氧、保温升温、饵料供应及其它辅助设施。该系统鱼池采用不同的池型、建筑材料和制作工艺以适应苗种不同发育阶段生态要求,水温可调控,进排水方式可灵活调节,自流式排污,保证了池水的不同流态及良好稳定的水环境。该系统4个月可催产中华鲟亲鲟16尾以上,孵化166.4万粒中华鲟受精卵,抚育235.5万尾1～15日龄仔鱼,培育全长10～15cm稚鱼31.31万尾。该系统的设施具有较好通用性,也适用于其它鱼类特别是珍稀名贵鱼类苗种的集约化批量生产。
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基于栅格局部细分的带约束条件的不规则三角网生成算法
《测绘学报 》 2008 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用数学形态学和局部细分的方法生成非凸壳三角网,再通过边界搜索和迭代处理,逐步添补三角网边缘三角形,最终得到具凸壳的Delaunay三角网。在此基础上,加入内部和外部的边界条件,生成具有复杂边界的带约束条件的Delaunay三角网。
关键词： Delaunay三角网 数学形态学 约束条件
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产脂肪酶海洋嗜冷菌的鉴定及酶学性质研究
《高技术通讯 》 2008 EI 北大核心 CSCD
摘要：从东海的深海底泥中筛选出一株产脂肪酶的海洋细菌 EastSeaG5-1415,该菌为革兰氏阴性好氧菌,短杆状,0.9～1.3μm×1.5～3.8μm,无鞭毛,无芽孢,无色素,菌落光滑不透明,过氧化氢酶和氧化酶阳性,甲基红实验阴性,氧化葡萄糖产酸,可耐受10%的 NaCl。此菌最适生长温度为18%,最高生长温度为35℃,在0℃也能生长,是典型的嗜冷菌。菌株脂肪酸种类为 C_(17∶1)(28.2%),C_(18∶1)9_c(49.7%),辅酶 Q-8是其主要的异戊烯醌类,DNA中 G+C 含量为45.2mol%。以16SrRNA 同源性为基础构建了相关种属细菌在内的系统发育树,在系统发育树中,分离菌株 EastSeaG5—1415与 Psychrobacter glacincola 在同一分支,二者的序列相似性为97.6%,DNA 杂交显示与 P.glacincola 最为相近,达到87%。结合形态和生理生化试验,将其鉴定为嗜冷杆菌 P.glacincola。同时对其所产脂肪酶的性质进行了初步研究。该菌所产碱性脂肪酶最适反应温度为35℃,在5℃时仍有较高酶活,酶活达到23%,最适 pH 值为9,属低温碱性脂肪酶。
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半滑舌鳎肝脏细胞系的建立与鉴定
《高技术通讯 》 2008 EI 北大核心 CSCD
摘要：以半滑舌鳎肝脏组织为材料,探索了组织细胞分离培养条件,建立了半滑舌鳎组织细胞培养技术及半滑舌鳎肝脏细胞系(HTLC)。该细胞系的培养基是添加了抗生素、胎牛血清(FBS)、花鲈血清(SPS)、成纤维生长因子(bFGF)的 MEM。HTLC 形态呈纤维状,在培养基中生长迅速,经200多天的培养,成功传代30多代。检测了温度、FBS 浓度、bFGF对其生长的影响,结果表明,在24～30℃生长良好,但当温度低于12℃时细胞生长速度明显减慢;在一定浓度范围内,其生长速度随血清浓度的升高而增快,血清浓度过高或过低对其生长不利;在培养基中添加 bFGF 可以使细胞生长速度显著提高;其二倍体核型为2n=21t。将绿色荧光蛋白(GFP)报告基因通过脂质体介导的方法转入 HTLC 中并成功地获得了表达,转化率为20%左右。该细胞系的建立为研究鱼类病毒学、免疫学、遗传学、功能基因组学提供了很好的实验材料。
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牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因的克隆及表达分析
《高技术通讯 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用同源克隆的方法设计简并引物从牙鲆(PARALICHTHYS OLIVACEUS)肝脏中克隆了牙鲆HEPCIDIN抗菌肽基因.牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因组DNA全长821BP,序列分析表明该基因具有3个外显子和2个内含子.CDNA全长588BP,包含一个270BP的开放阅读框,编码一个长89氨基酸的前体肽.RT-PCR分析表明:该抗菌肽基因在正常牙鲆的肝脏、头肾、鳃、脾脏中表达量较高,在心脏、小肠中表达量较低;受到病原鳗弧菌感染的牙鲆各组织该基因表达量明显上升.牙鲆抗菌肽基因的克隆为水产养殖等领域的抗耐病品种的选育提供了基因源,为开发新的生物工程药物提供了基础理论和实验数据.
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几种帘形目贝类RDNA ITS序列的比较
《高技术通讯 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：扩增并测序了4种帘形目和1种蚶目贝类(外群)核糖体DNA的转录间隔区(ITS)序列.帘形目贝类序列长度在874BP到1466BP之间,GC含量在62%到67%之间,ITS序列在相近的3种帘蛤科贝类之间表现出长度保守性和碱基组成的相似性.采用ITS1,ITS2,以及ITS1与ITS2的连接序列进行聚类,结果表明:2种蛤仔聚为一枝,表现出较近的亲缘关系,帘蛤科的3种贝类聚在一起,再与同属帘形目的缢蛏相聚.研究的结果揭示了帘形目贝类的系统发生关系.
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基于水力学模型的三峡库区四大家鱼产卵场推求
《水利学报 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：卵场位置是长江流域四大家鱼资源调查的重点。对于四大家鱼产卵场位置的定位以及影响家鱼产卵繁殖的水文、水流条件等非生物的因素,一般以河段邻近水文站观测数据来推算或近似。本文采用MIKE 11商业软件,基于三峡库区622个河道断面,模拟了2002~2003年三峡库区水动力变化,而后以重庆市云阳断面为起点,根据该断面2002~2003年四大家鱼捞获卵、苗的发育时间,推求出长江上游重庆至云阳4个产卵场的位置,最后对模型法推求产卵场位置的不确定性进行了分析。
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菲律宾蛤仔重复序列28S RRNA及组蛋白H3基因的染色体定位
《高技术通讯 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：克隆了菲律宾蛤仔的28S RRNA基因(RDNA)及组蛋白H3基因,并应用FISH技术研究了它们在菲律宾蛤仔染色体上的定位情况.28S RDNA定位于一对中部着丝粒染色体的端部,在蛤仔的染色体上有一个位点;组蛋白基因定位于一对亚中部着丝粒染色体长臂的端部,在蛤仔的染色体上也有一个位点.28S RDNA基因和组蛋白基因的特异性定位准确地区分了菲律宾蛤仔的两对染色体,这两对染色体可以作为菲律宾蛤仔的染色体标记,为蛤仔统一核型的建立打下良好的基础, 也有利于对贝类细胞遗传学进行研究,同时还可辅助育苗产业的发展.
关键词： 荧光原位杂交(FISH) 28S RDNA 组蛋白H3基因 菲律宾蛤仔
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牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因在大肠杆菌中的融合表达
《高技术通讯 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：根据从实验室克隆的牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因(GENBANK登陆号DQ129693)的序列,设计了特异性引物,PCR扩增其成熟肽片段.重组至融合表达载体PGEX-4T-1中,构建成牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因融合表达载体PGEX-FHEP,转化至大肠杆菌BL21(DE3)PLYS中,筛选得到的阳性克隆用IPTG进行诱导.SDS-PAGE电泳显示在29KD处有特异性的蛋白条带出现,WESTERN-BLOTTING 检测表明已经成功表达了融合蛋白,表达的融合蛋白最高占总蛋白的21%.纯化得到的GST-FHEP用凝血酶切割后,用亲合层析得到牙鲆的抗菌肽HEPCIDIN.抑菌实验结果表明抗菌肽对大肠杆菌(ATCC25922)有一定程度的抑制作用.
关键词： 牙鲆 抗菌肽 HEPCIDIN 大肠杆菌 表达 活性
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