科研产出
高效液相色谱法检测鲫鱼不同组织中的胶原蛋白含量
《食品科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为提高水产品胶原蛋白的利用率,采用柱前衍生-高效液相色谱法对鲫鱼鱼皮、鱼肉、鱼鳞、鱼鳔组织中的羟脯氨酸含量进行检测,再将羟脯氨酸含量换算成相应胶原蛋白的含量。鲫鱼样品经盐酸110℃水解18 h,丹磺酰氯衍生,采用高效液相色谱-紫外法进行检测。色谱柱:反相C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:A为甲醇,B为四氢呋喃-甲醇-0.05 mol/L乙酸钠(1∶15∶84,V/V)溶液,采用梯度洗脱;流速1 m L/min;柱温40℃;检测波长254 nm。结果表明:羟脯氨酸在20~400μg/m L范围内呈现良好的关系(R2=0.999 8),最低检测限为0.18μg/g,不同水平的平均回收率为80.22%~83.33%,相对标准偏差范围为0.31%~1.84%。实际样品分析显示,鱼皮、鱼肉、鱼鳞、鱼鳔组织中胶原蛋白含量分别为106.62、24.75、166.94、115.05 mg/g。本实验建立的分析方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性,可用于水产品不同组织中胶原蛋白的定量分析。
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杜鹃花新品种‘江南春早’
《园艺学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：‘江南春早’是‘紫蝴蝶’ב红珍珠’杂交育成的杜鹃花新品种。花色为艳丽的玫粉色;花径4.5~5.5 cm;单瓣5裂,裂片较深;雄蕊8~10枚。植株长势强健,株形紧凑美观;耐高温高湿,适宜在长江中下游地区园林绿化中露地栽培。自然始花期4月上中旬,持续20~25 d。
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不同腌制条件对草鱼湿腌传质动力的影响
《食品工业科技 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：研究盐水浓度(5%、10%、15%)、料液比(1∶2、1∶3、1∶4)、腌制温度(5、10、20℃)三个因素对草鱼湿腌传质动力的影响。通过对腌制过程中鱼肉中的盐分、水分和重量变化进行测定,来获得不同腌制条件下,草鱼腌制的传质动力学数据。结果表明:盐水浓度对草鱼腌制影响极显著(p<0.01),料液比在腌制后期对草鱼腌制影响显著(p<0.05),温度对草鱼腌制影响显著(p<0.05)。盐水浓度单因素中15%的有效扩散速率De值最大;料液比单因素中1∶2的De值最大;温度单因素中10℃的De值较大。此外,草鱼湿腌的盐分预测模型和扩散公式计算得到的数据都有良好的线性关系,经验证,实验值与理论值误差较小,可以准确地预测鱼肉中盐分含量。
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植物莽草酸途径EPSPS蛋白的分子进化和基因结构分析
《植物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：EPSPS既是植物、微生物和真菌等生物芳香族氨基酸生物合成途径——莽草酸途径中的关键酶,也是除草剂草甘膦的靶标酶。EPSPS的克隆能为草甘膦抗性转基因作物的研发提供候选基因。该研究运用比较基因组学方法,通过对41种不同植物的43条EPSPS蛋白序列进行进化分析,取得主要结果如下:(1)不同植物EPSPS蛋白的相似性很高,且具有相同的结构域、保守基序和保守位点,但是其叶绿体转运肽序列差异显著;(2)系统发育分析表明,EPSPS基因按照双子叶植物纲和单子叶植物纲分为2个大的分支,各个小的分支又按照植物的种属亲缘关系进行分支和聚类;(3)基因结构分析表明,植物EPSPS基因基本都含有8个外显子和7个内含子,且所对应外显子的长度相当,而内含子的长度差异很大,说明在植物基因组进化过程中造成EPSPS基因结构差异的主要因素是内含子的改变。研究结果将为揭示植物EPSPS蛋白的结构功能提供参考。
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无核葡萄及其杂交组合胚挽救技术
《江苏农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为研究无核葡萄及其杂交组合胚挽救技术的影响因素,以无核葡萄莫利莎无核、希姆劳特及其正反交杂交组合为试验材料,分析了培养基种类、6-BA浓度、胚珠处理方式和取样时期对无核葡萄胚珠发育和萌发的影响。结果显示,莫利莎无核葡萄胚挽救种胚萌发的最佳培养基及其组分为WPM培养基+6-BA 0.2 mg/L+水解酪蛋白质50.0 mg/L+活性炭3.0 g/L+琼脂6.5 g/L+蔗糖20.0 g/L;不同的胚珠处理均可以提高其萌发率,其中以横切处理为最佳;不同品种及其不同杂交组合胚挽救的最佳取样时期不同;母本对胚珠的萌发起着关键作用。表明在无核葡萄胚挽救技术育种实践中,应当根据不同的亲本及其杂交组合进行不同的优化研究。
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稻秸还田与播后镇压对稻茬小麦产量与品质的影响
《核农学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为探明秸秆还田与镇压处理对稻茬小麦产量形成与籽粒品质的影响,在田间设置了秸秆还田(稻秸全量还田S1和稻秸不还田S0)与镇压(播后镇压R1和播后不压R0)2因素随机试验。结果表明,稻秸还田显著降低了小麦出苗率,平均下降了25.1%,导致最终成穗数显著下降,但穗粒数与千粒重都有所增加,有效弥补了穗数的不足,最终产量与秸秆不还田处理无显著差异。与稻秸不还田处理相比,稻秸还田处理籽粒蛋白质含量平均提高了12.7%,出粉率平均提高了5.0%,而湿面筋含量、面团形成时间与稳定时间没有变化。秸秆还田条件下小麦播后镇压显著提高了小麦出苗率,与不镇压相比,平均出苗率提高了39.0%,单位面积成穗数、穗粒数和千粒重也略有增加,实际单产显著增加,增产幅度达16.5%;小麦籽粒品质得到一定改善,吸水率、出粉率、湿面筋含量、面团形成时间和稳定时间都略有提高。在稻麦轮作区,秸秆还田后小麦播后及时进行镇压将有助于提高产量,改善籽粒品质,本研究对于推动秸秆还田与提高稻茬小麦生产水平具有重要意义。
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猪Viperin主要抗原区的原核表达及多克隆抗体的制备
《畜牧与兽医 》 2015 北大核心
摘要：采用PCR方法扩增猪Viperin蛋白主要抗原区基因,克隆入原核表达载体p ET32a,转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE鉴定蛋白得到表达,分子质量约为40 ku。进一步优化蛋白表达条件为:IPTG终浓度为0.6 mmol/L,诱导5 h。采用His标签单抗对重组蛋白进行Western blot鉴定表明蛋白具有良好的抗原性。将蛋白质纯化后免疫新西兰大白兔,间隔14 d免疫4次,并采集血清。用间接ELISA方法测定血清抗体效价,结果表明,经过4次免疫血清抗体效价达到1∶409600,间接免疫荧光检测出现特异荧光,表明其能与Viperin蛋白发生反应。本试验为研究Viperin的功能、建立特异的检测方法奠定了基础。
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大豆转录因子基因GmMYB111的克隆及功能分析
《中国农业科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】克隆大豆MYB转录因子基因,进行序列分析和表达模式分析,并对其功能进行鉴定。【方法】通过对盐胁迫相关的数字表达谱(DGEP)数据分析,获得一个MYB转录因子Gm MYB111;以盐胁迫处理的c DNA为模板,利用RT-PCR法分离克隆MYB基因c DNA编码序列;根据Gm MYB111蛋白序列进行同源性搜索,得到与Gm MYB111蛋白序列相似度较高的其他物种的蛋白序列;使用MEGA5.05对Gm MYB111蛋白序列及其同源序列进行多序列比对分析并构建同源物种间系统进化树;利用实时荧光定量PCR方法检测目的基因在大豆中受非生物胁迫诱导表达情况及组织特异性表达情况;利用拟南芥原生质体转化体系分析Gm MYB111的亚细胞定位情况;通过酵母杂交系统检测其转录激活活性以及体外结合活性。【结果】根据前期江苏省农业科学院农业生物技术研究所盐土农业研究室盐胁迫相关的数字表达谱(DGEP)数据获得盐胁迫响应显著上调(27倍)的Gm MYB111,利用RT-PCR方法从栽培大豆根组织中克隆该基因片段,序列比对发现其与已公布的Williams82基因组数据库序列一致,生物信息学分析表明,其编码的氨基酸序列具有MYB类转录因子的共同特征,其N端具有R2、R3两个MYB结构域,同时其C-端还存在一个富含酸性氨基酸的转录激活区;系统进化树分析表明,该基因编码的蛋白与Gm MYB76、Gm MYB12a以及苜蓿Mt MYB61的亲缘关系最近;Gm MYB111在大豆中的表达受高盐、干旱、冷害和ABA诱导表达,实时荧光定量PCR检测结果显示,在高盐和冷害胁迫下,Gm MYB111呈上调表达,在干旱胁迫诱导后呈先上调后下调的表达模式,在ABA诱导下其表达量呈现波动式上调和下调表达;时空表达分析表明,Gm MYB111为组成型表达,在大豆幼苗期和成熟期的表达量相对较强,成熟期的表达量相对较低,从不同组织来看,Gm MYB111在茎、叶和花中表达量最高,在根中表达量相对较低,在豆荚中不表达;亚细胞定位结果显示Gm MYB111定位于细胞核中,为典型的转录因子;酵母杂交系统检测表明,Gm MYB111具有转录激活功能,并且能够与顺式作用元件TAACTG基序相结合。【结论】Gm MYB111为典型的R2R3-MYB转录因子基因,具有转录激活活性及DNA结合活性,在大豆中的表达可能与大豆的非生物胁迫和ABA信号转导途径有关,推测其可能通过调节下游基因的表达来调控大豆对非生物胁迫的应答。
关键词： 大豆 GmMYB111 表达分析 结合基序 转录激活活性
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施氮水平与播种量对多花黑麦草种子结实性及产量的影响
《江苏农业科学 》 2015 北大核心
摘要：为明确在江苏盐城地区繁种的苏畜研2号多花黑麦草最佳播种量和施氮水平,提高其本地种子产量,满足市场需求,试验将尿素施用量N0(对照)、N1(75.0 kg/hm2)、N2(112.5 kg/hm2)、N3(150.0 kg/hm2)、N4(187.5 kg/hm2)作为主区,播种量B1(1.0 g/m2)、B2(1.5 g/m2)和B3(2.0 g/m2)作为副区进行裂区试验设计,形成15个组合,重复3次。结果表明:播种量和施氮水平对苏畜研2号多花黑麦草的穗长、小穗数、每穗粒数以及样方产量等指标均可产生调节作用;施尿素112.5 kg/hm2、播种量1.5 g/m2的组合可使苏畜研2号多花黑麦草在盐城地区繁种获得较佳水平。
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