科研产出
番鸭小鹅瘟病毒PT分离株全长DNA克隆的构建
《中国兽医学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为构建番鸭小鹅瘟病毒感染性克隆,进行水禽细小病毒基因组结构及功能研究,根据NCBI发表的GPV B株、MDPV FM株与MDGPV PT株核苷酸序列设计并合成了MDGPV特异性引物,进而应用PCR技术分4段扩增并克隆了覆盖MDGPV全长基因组的4个片段。经过拼接与测序,将MDGPV全长DNA定向克隆到质粒pBluescriptⅡKS(+)中,获得了MDGPV PT株全长基因组DNA克隆pSK-PT1234。与MDGPV亲本PT株及NCBI登录的其他水禽细小病毒代表株序列比对发现,该克隆在NS与VP编码区间隔处存在人为引入Bsp1407Ⅰ酶切位点。番鸭小鹅瘟病毒PT株全长DNA克隆成功构建,为下一步病毒的拯救奠定坚实的基础。
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RAPD及SRAP 2种标记对苦瓜‘如玉5号’杂交种纯度的鉴定
《中国农学通报 》 2015 CSCD
摘要：为获得理想的方法鉴定‘如玉5号’苦瓜杂交种子的纯度,以苦瓜杂交一代品种‘如玉5号’及其父母本为材料,利用RAPD(随机扩增多态性DNA)及SRAP(相关序列扩增多态性)2种技术进行其基因组总DNA指纹分析,以获得F1代杂交种与其亲本差异目的基因条带。经过对3种苦瓜新鲜幼嫩叶片总DNA提取,RAPD-PCR和SRAP-PCR扩增以及扩增产物的琼脂糖凝胶电泳分析,在供试的52条RAPD引物及144对SRAP引物中,共筛选出2对SRAP引物(Me2-Em9、Me3-Em8)能区分杂交种与其母本种子,1条RAPD引物(R10)能区分杂交种与其父本种子,通过SRAP(引物Me3-Em8)及RAPD(引物R10)2种分子标记技术对来自于河西走廊3地‘如玉5号’苦瓜种子进行检测,结合田间观察,结果表明,该方法成本低,操作简单,能很好地对‘如玉5号’苦瓜杂交种子的纯度鉴定。
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酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)和刺鼠信号蛋白(ASIP)基因对白绒乌骨鸡黑色素沉积的遗传效应
《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为研究白绒乌骨鸡(Gallus gallus domesticus Brisson)黑色素沉积分子机制,本研究采用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)的2-ΔΔCt检测酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、刺鼠信号蛋白(agouti signaling protein,ASIP)和小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)基因在乌骨鸡皮肤、肌肉、肝脏、肾脏和肌胃的表达情况,采用紫外分光光度法测定不同组织黑色素含量,探索3个基因在不同组织中m RNA表达量与黑色素沉积之间的关系。结果表明,TYR、MITF和ASIP在所有组织中均有表达,且各基因m RNA相对表达量在各组织间差异极显著(P<0.01),其中MITF和TYR m RNA表达量依次为皮肤>肾脏>肌胃>肝脏>肌肉,与乌骨鸡各组织黑色素沉积规律基本一致;ASIP基因表达量则与其相反,表现为肌肉>肝脏>肌胃>肾脏>皮肤。相关性分析表明,TYR和MITF基因在各个组织中的表达量与其黑色素含量呈显著正相关(P<0.05),ASIP基因表达量与其呈显著负相关(P<0.05)。由此提示,TYR、MITF和ASIP与白绒乌骨鸡黑色素沉积均具有一定的相关性,其中TYR和MITF基因的高表达可能促进乌骨鸡黑色素沉积,ASIP则相反。本研究为进一步阐明黑色素沉积的遗传调控机制提供了理论基础。
关键词： 白绒乌骨鸡 黑色素沉积 实时荧光定量PCR(q RT-PCR) 酪氨酸酶(TYR) 刺鼠信号蛋白(ASIP) 小眼畸形相关转录因子(MITF)
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芽胞杆菌来源尼日利亚菌素的检测与分析
《福建农业学报 》 2015
摘要：对千叶短芽胞杆菌Brevibacillus choshinensis FJAT-10008中尼日利亚菌素成分进行分析与检测。采用高效液相四级杆飞行时间质谱分析千叶短芽胞杆菌B.choshinensis FJAT-10008发酵液中胞外代谢物的成分。利用MassHunter软件,对原始数据进行分子特征提取,通过Metlin代谢物质谱数据库检索比对获得代谢物的信息。在千叶短芽胞杆菌B.choshinensis FJAT-10008发酵液中检测到1 246种代谢物,通过Metlin谱库搜索获得初步鉴定的有206种。其中,发现了具有生物活性的物质尼日利亚菌素Nigericin,其匹配得分达到92.12,占发酵液总代谢物相对含量的1.45%,保留时间为28.701 7min,精确质量数为724.467 9。尼日利亚菌素的发现为千叶短芽胞杆菌来源的多醚类抗生素的开发与利用提供理论依据。
关键词： 千叶短芽胞杆菌 胞外代谢物 尼日利亚菌素 液相四级杆飞行时间质谱
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茶丽纹象甲白僵菌广东分离株的鉴定及生物学特性研究
《茶叶科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：通过形态学鉴定和r DNA-ITS序列分析,明确了从广东英德茶园中采集到的一株寄生茶丽纹象甲的白僵菌为球孢白僵菌,并命名为Bb1-1。为明确该菌株的生防潜力,以本实验室保存的2株茶丽纹象甲高毒力球孢白僵菌菌株(XJBb3005和XJBb3008)为参考菌,研究了菌株Bb1-1的生长速率、产孢量、孢子萌发率、耐热力和抗紫外能力等生物学特性,并测定了该菌株在25℃、29℃和32℃下对茶丽纹象甲的毒力。结果表明,3个菌株的生长速率、孢子萌发率和抗紫外能力没有明显的差异;3个菌株产孢量大小顺序为XJBb3005>Bb1-1>XJBb3008;但Bb1-1具有最强的耐热力。在25℃下,3个菌株对茶丽纹象甲成虫的累积校正死亡率之间差异不显著,都超过93.94%;但在高温(29℃和32℃)下,菌株Bb1-1对茶丽纹象甲的杀虫毒力优于两个参考菌株,处理7 d累计校正死亡率分别为90.91%和80%,LT50分别为3.83 d和5.28 d。鉴于菌株Bb1-1耐热力较强,且在高温下对茶丽纹象甲成虫具有较好的杀虫毒力,将在今后该虫的生物防治中发挥重要的作用。
关键词： 茶丽纹象甲 白僵菌 广东分离株 鉴定 生物学特性 毒力
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