高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备

龚殿; 孙玉娟; 张雨良; 王健华; 刘志昕; 《生物技术通报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)是世界上分布最广的侵染甘蔗的病毒之一,引起甘蔗花叶病,对甘蔗产业危害很大。根据SrMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列合成一对引物,以海南(SrMV-HN)染病植株总RNA为材料,采用RT-PCR方法克隆了长约987 bp的目的片段。将CP基因与质粒pET32a(+)连接,构建了含SrMV CP基因的融合蛋白原核表达载体pET32a-SrMVCP。然后用正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测出一条约36kD的特异融合蛋白表达谱带。融合蛋白主要以可溶性蛋白形式稳定表达。通过优化诱导条件,确立了CP基因表达的最佳条件:IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为4 h,诱导温度为30℃。用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白,免疫家兔制备出抗血清。通过酶联法(ID-ELISA)测定本试验制备的SrMV CP抗血清工作浓度为1∶1 000,Western blotting检测结果表明,抗血清与SrMV-HN诱导表达的CP蛋白发生特异性反应。对田间25个甘蔗样品进行检测,结果表明该抗血清的效价高、灵敏度高、特异性强,可以应用于田间样品的检测。

关键词： 高粱花叶病毒 外壳蛋白 原核表达 抗血清

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细菌介导RNAi研究甘蔗二点螟蜕皮调节转录因子CiHR3基因功能

张雨良; 黄启星; 张树珍; 王健华; 伍苏然; 王俊刚; 刘志昕; 《应用昆虫学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：甘蔗Saccharum officinarum L.是热带和亚热带地区种植的主要作物之一,也是许多国家和地区重要的糖料来源。为了解决甘蔗在农业生产中常常被甘蔗螟虫为害,重点控制甘蔗二点螟Chilo infuscatellus Snellen是一条显著提高甘蔗产量和品质的有效途径。近年来,RNA干扰技术已发展成为控制虫害、提高作物品质的新方法,通过dsRNA诱导的RNA干扰可以用来研究昆虫功能基因。本文以甘蔗二点螟蜕皮调节转录因子CiHR3基因为靶标,建立细菌介导的RNAi方法表达CiHR3基因dsRNA,通过提取靶标基因dsRNA,喂饲甘蔗二点螟3龄和5龄幼虫,结果显示:3龄甘蔗二点螟幼虫在一周内发生形态显著变化、体重明显下降;5龄甘蔗二点螟幼虫在一周内形态也出现显著变化,更明显的是出现畸形蛹,非正常化蛹。本研究结果验证了昆虫蜕皮调节转录因子CiHR3可作为甘蔗二点螟生物防治的靶标基因,为后续植物介导的RNAi表达dsRNA防治甘蔗螟虫打下很好的基础。

关键词： 细菌介导RNAi 甘蔗二点螟 CiHR3 生物活性测定

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次氯酸钠有效氯降解规律分析

李丽; 杨琼; 邢东旭; 《广东蚕业 》 2013

摘要：次氯酸钠消毒高效、广谱,尤其消毒后能使家蚕微粒子孢子消失解体或明显变形,方便判断检测消毒效果而成为广东蚕种生产中首选的消毒剂。但次氯酸钠有效成分易降解、浓度不稳定,若使用时间控制不当,会影响到消毒效果。本文调查次氯酸钠不同浓度溶液有效氯的降解规律,拟为生产应用提供参考。

关键词： 次氯酸钠 有效氯 降解

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感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价

谭老喜; 张雨良; 周朋; 章绍延; 王健华; 张秀春; 刘志昕; 《植物研究 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your Own"Mate&PlateTM"Library System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经SfiI酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0×106的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。

关键词： 香蕉束顶病毒 香蕉叶片 酵母双杂交cDNA文库

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增城丝苗型优质杂交稻广8优2168的种植表现及栽培技术

李作伟; 李传国; 何高; 梁世胡; 《农业科技通讯 》 2013

摘要：广8优2168是广东省农业科学院水稻研究所育成的增城丝苗型优质三系杂交稻组合,2012年1月通过广东省农作物品种审定委员会审定。该组合在广东省东源县种植表现丰产性突出,米质达国标和省标优质3级,高抗稻瘟病,中感白叶枯病,耐寒性中等,适宜东源县晚造种植及早造搭配使用。晚稻栽培,宜于7月10日前后播种,7月22日前后抛秧;早稻栽培,宜于3月5日前后播种,3月22日前后抛秧,最适抛秧叶龄为3.5叶。一般抛秧密度以1.8万穴/亩为宜,基本苗以达4.5万/亩为宜;施肥以中高施肥水平较为适宜;苗数达到穗数苗的90%时开始露晒田,抽穗结实期活水养稻、间歇灌溉,防早衰,增粒重,提高稻米品质。

关键词： 增城丝苗型 优质 杂交稻 广8优2168 种植表现 栽培技术

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白叶单枞黑茶降血糖活性成分的高速逆流色谱分离

叶琼仙; 尹胜; 周盈利; 苗爱清; 李绮汶; 刘静; 朱龙平; LESLIE Brown; 王冬梅; 《食品工业科技 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：采用白叶单枞黑茶的60%乙醇提取物,在α-葡萄糖苷酶抑制活性的导向下,经D101大孔吸附树脂柱层析获得活性流分,进一步采用高速逆流色谱法(HSCCC)进行分离纯化研究。结果显示,黑茶60%乙醇提取物具有较显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性,经D101柱层析所得的流分D-6、D-7及D-8在25μg/mL浓度下具有较黑茶60%乙醇提取物强的酶抑制活性,酶活性抑制率分别为69.31%、77.53%及75.23%。对活性流分D-7采用溶剂系统:乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水-乙酸(4∶1∶1∶4∶0.1,v/v)进行了HSCCC分离,得到化合物1、2,纯度均大于95%,经结构鉴定确定二者分别为牡荆苷、异牡荆苷。

关键词： 黑茶 白叶单枞 α-葡萄糖苷酶 高速逆流色谱

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植物基质金属蛋白酶的研究进展

刘迪林; 赵普艳; 《西北植物学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：基质金属蛋白酶(MMPs)是高度保守的锌依赖型内肽酶家族。医学研究表明,人体MMPs不仅在一系列生理过程中发挥关键作用,而且与很多重大疾病关联。例如,MMPs在恶性肿瘤组织中的表达量大幅度上升,和肿瘤的侵袭转移密切相关。MMPs也广泛存在于高等植物,它可能参与植物发育调控、免疫应答及非生物逆境胁迫响应等多个方面。该文对近年来国内外有关植物MMPs的分布、结构特点、活性调节以及生物学功能等方面的研究进展进行综述,并对该领域的研究趋势和重点问题进行了讨论。

关键词： 植物 基质金属蛋白酶 结构 功能

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亚洲H_5N_1高致病性流感流行情况综述

靳玉珠; 王世山; 柴磊; 左英芳; 蔡春梅; 《中国畜牧兽医文摘 》 2013

摘要：WHO数据显示,从2003年H5N1高致病性流感暴发以来,H5N1型病毒已经感染了565人,其中331人死亡,造成的经济损失更是难以估量。大多数国家暴发禽流感后,均采取有效的措施,减少了人类感染流感的可能性。但是,2009~2011年的3年间,H5N1高致病性禽流感活跃期间,禽流感暴发量的增多意味着发生疫情的国家人类感染的风险增加,尤其是在亚洲地区。最新的死亡是2013年8月份柬埔寨发生的感染死亡,2011年柬埔寨有8例人类感染的案例,且都是致命的。对于家禽和人类而言,H5N1高致病性禽流感仍是一个全球性的威胁,2010~2011年,人类感染数量的

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优质水稻新品种粤油丝苗的选育与应用

何秀英; 陈钊明; 廖耀平; 程永盛; 陈粤汉; 刘维; 《中国种业 》 2013

摘要：粤油丝苗是广东省农业科学院水稻研究所近年育成的常规优质水稻新品种,稻米品质达国标和省标优质1级。该品种丰产性好,分蘖力和抗倒性较强,后期熟色好,抗稻瘟病,中抗白叶枯病。2009年晚季参加广东省区域试验,2010年晚季进入复试和生产试验,2011年6月通过广东省农作物品种审定委员会审定,审定编号为粤审稻2011024。2012年参加广东粤北单季稻品种表证试验,2012年早季参加海南省区域试验,2013年早季进行海南省区试复试。该品种适合广东粤北以外早、晚稻,粤北单季稻,以及海南省早、晚稻种植。

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龙眼原浆喷雾干燥助干剂组成及对多酚含量的影响

卜智斌; 唐道邦; 徐玉娟; 肖更生; 吴继军; 林羡; 《热带作物学报 》 2013 CSCD

摘要：以龙眼原浆为原料添加一定比例的助干剂喷雾干燥生产龙眼粉,采用单因素和L9(33)正交试验相结合,研究麦芽糊精、β-环状糊精和阿拉伯胶3种助干剂的添加量对龙眼粉品质特性的影响。通过正交直观分析和方差分析结果表明:麦芽糊精对出粉率、水分含量、b*值、流动性影响极显著;β-环状糊精对b*值、溶解性、流动性影响极显著;阿拉伯胶对溶解性、流动性影响极显著,且3种助干剂对龙眼粉多酚总量的影响主次顺序为:β-环状糊精>阿拉伯胶>麦芽糊精,β-环状糊精影响显著,阿拉伯胶和麦芽糊精影响不显著;优化助干剂的最佳配比为麦芽糊精20%、β-环状糊精2%、阿拉伯胶5%。

关键词： 龙眼原浆 喷雾干燥 助干剂 龙眼粉 多酚总量

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