科研产出
用于水生病原菌的3种高通量活菌计数方法的比较
《渔业科学进展 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：以一株副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)作为研究对象,比较了MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]比色法、ATP生物发光法和高通量生长曲线法在活细菌高通量计数上的应用效果.用96孔培养板进行不同浓度细菌活菌计数,确定了上述3种方法在副溶血弧菌活菌计数的标准曲线和线性范围.结果显示,副溶血弧菌的MTT比色法以DMSO溶解的MTT产物甲瓒在555 nm的吸光度(OD555 nm)为计数依据,活菌数的对数(Lg C)与Lg OD555 nm线性关系的标准曲线为Lg C=(1.0439±0.0200)LgOD555 nm+(8.0565±0.0125),相关系数R2=0.9965,线性检测范围为7.8*106~2.5*108CFU/ml;ATP生物发光法以ATP产生的相对发光度值(RLU)为计数依据,Lg C与LgRUL线性关系的标准曲线为Lg C=(0.9590±0.0065)LgRLU+(0.9949±0.0366),相关系数R2=0.9994,线性检测范围为1.0*104~3.0*108 CFU/ml;高通量生长曲线法以生长曲线达到拐点的时间(Ts)为计数依据,Lg C与Ts线性关系的标准曲线为Lg C=-(0.8727±0.0230)Ts+(9.0128±0.1572),相关系数R2=0.9924,线性检测范围为1.0*100~1.0*107 CFU/ml.用3种方法对实际菌液测量并与平板计数法比较表明,ATP生物发光法与高通量生长曲线法有很好的准确性,MTT比色法准确度稍差,而高通量生长曲线法有最宽的线性范围,也最适合高通量测定.
关键词： 活菌计数 MTT比色法 ATP生物发光法 高通量生长曲线法
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基于HPLC-AFS技术研究南极磷虾油对大鼠脏器中砷形态分布的影响
《食品工业科技 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：目的:建立动物组织脏器中砷形态的分析方法,探讨摄食南极磷虾油尤其是砷甜菜碱对大鼠脏器中砷形态分布的影响.方法:雄性Wistar大鼠随机分为大豆油对照组(7 d组、30 d组)、南极磷虾油组(7 d组、30 d组)、添加100 mg/kg砷甜菜碱的南极磷虾油组(7 d组、30 d组),每组5只,灌胃剂量2.625 g油/kg·bw,喂养7 d或30 d后,剥离肝脏、肾脏.采用建立的高效液相色谱-原子荧光光谱法,经Hamilton PRPx-100色谱柱分离,磷酸二氢铵缓冲液洗脱,对脏器中砷甜菜碱(AsB)、二甲基砷酸(DMA)、一甲基砷酸(MMA)、亚砷酸盐(AsⅢ)和砷酸盐(AsⅤ)的含量进行测定.结果:大鼠脏器中五种砷形态的检出限为0.35~0.50μg/L,定量限为1.0~2.0μg/L,加标回收率为80.2%~113.0%,RSD为1.34%~3.97%,方法线性良好,R~2> 0.999.采用该方法测得,大鼠肝脏和肾脏中主要砷形态为AsB和DMA.与对照组相比,大鼠摄食磷虾油和砷甜菜碱磷虾油7或30 d后,脏器中总砷、AsB、AsⅢ、DMA、MMA和AsⅤ含量均无显著性变化.结论:摄食南极磷虾油后,大鼠肝脏和肾脏中不会出现砷蓄积现象.南极磷虾油及其砷甜菜碱不会对大鼠脏器中砷形态含量以及各砷形态之间的转化产生显著影响.本研究可为南极磷虾油食用安全性的科学认识及其应用领域拓展提供理论支撑.
关键词： 南极磷虾油 砷形态 脏器 转化 高效液相色谱-原子荧光光谱联用技术
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大亚湾黑鲷标志放流及回捕率调查
《中国水产科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为评价大亚湾海域黑鲷(Acanthopagrusschlegelii)增殖放流效果,使用塑料椭圆标志牌(plasticovaltags,POTs),开展了黑鲷幼鱼标志保持率与生长实验。结果显示,背鳍鳍棘基部第4～6鳍棘下方5mm左右的背部肌肉为最适标志位置, 90 d后标志保持率为81.76%。POTs标志黑鲷幼鱼45 d内生长与对照组无显著性差异(P>0.05),而90 d后标志组生长显著缓于对照组(P<0.05)。并于2014—2016年每年1次在大亚湾开展黑鲷幼鱼标志放流试验。采用有奖回收方式进行标志鱼回捕,测量体长、体重,收集回捕日期、回捕地点、回捕方式等信息,整理分析相关数据。3年共放流标志黑鲷幼鱼60115尾,共2758尾回捕标志鱼被定置网、流刺网及垂钓捕获(总回捕率4.59%);大规格放流苗种回捕率高于小规格放流苗种;垂钓回捕鱼数量占总回捕数量的比例为62.08%。通过对反馈信息的分析,认为放流后的标志鱼最初主要沿湾内和湾外两个方向呈近岸辐射状扩散,最远扩散距离约70 km。放流后1～2个月标志黑鲷生长较慢,随后相对加快,放流5～7个月后,黑鲷幼鱼体长、体重分别增长59.51%～127.20%和322.75%～989.83%。结论认为,POT是黑鲷幼鱼体外标志的适宜选择;在研究海域,放流后的标志黑鲷更易于被垂钓方式捕获;丰富的食物和可供躲避敌害的空间是影响其扩散、生长的因素。
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我国与国际食品法典委员会(CAC)关于水产品中食品添加剂使用标准比较分析及对策研究
《中国食品添加剂 》 2019 北大核心
摘要：以我国GB 2760-2014和CODEX STAN 192-1995(2018年修订版)作为标准资料,采用逐级对比方法,分析水产品及其制品的分类、食品添加剂功能分类、种类和数量、使用范围和限量标准的差异.发现我国和CAC在水产品分类上还存有差异,但涵盖基本水产制品种类;我国对水产品中添加剂使用要求较CAC严格,并且我国水产品添加剂限量指标中有95.9%的可比指标值已经达到或超过CAC标准的要求.通过梳理我国现行关于水产品中食品添加剂的使用标准,对比分析我国与CAC国际标准的异同,从促进产业发展、保护消费者安全及有效应对国外技术性贸易措施角度提出对策.
关键词： 国际食品法典委员会(CAC) 水产品 食品添加剂 标准
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用南黄海沉积岩心中氮同位素重建海水 营养盐利用率的历史变化
《海洋学报(中文版) 》 2019 CSCD
摘要：基于2006年黄东海航次获得的表层沉积物和2009年航次南黄海3个柱状沉积物岩心,分析了表层沉积物总氮(TN)、C/N比值和氮稳定同位素比值(δ15 N)的分布特征及南黄海柱状沉积物中这些参数的长期变化规律.结果表明,黄海、东海表层沉积物TN含量、C/N比值和δ15 N的变化范围分别为0.023%~0.33%、1.4~50.3和4.0‰~16.0‰.其中,TN与C/N比值存在较显著的负相关性,而TN与δ15 N以及C/N比值与δ15 N之间无明显的相关性,这反映出黄海和东海陆架边缘海中氮循环的复杂性.对南黄海柱状沉积物的分析结果表明:3个柱状岩心中的TN、C/N比值和δ15 N随年代的波动均呈现一定的周期性变化趋势.3个岩心中TN随年代的变化趋势基本一致,100 a来总体呈波动上升趋势,且3个岩心中C/N比值也呈较为类似的变化趋势.柱状沉积物中δ15 N的平均变化周期约为24 a左右.由此,重建200 a来南黄海海水中营养盐利用率的历史变化,并初步探讨了其对气候变化的响应.
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黄连素对海水病原菌的杀灭效果及药效稳定性
《水产科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为探讨黄连素对主要海水养殖病原菌的抑菌作用,采用二倍稀释法测定黄连素对迟缓爱德华氏菌、哈维氏弧菌等10种病原菌的最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度,并以美人鱼发光杆菌美人鱼亚种为指示菌,研究黄连素在不同温度、存储条件和金属离子影响下的药效稳定性。试验结果显示,黄连素对10种海水养殖病原菌均具有较好的抑菌及杀菌作用,最小抑菌质量浓度为64～256mg/L,最小杀菌质量浓度为256～1024mg/L。其中,黄连素对大菱鲆弧菌和溶藻弧菌抑菌作用最明显,最小抑菌质量浓度为64mg/L;对鳗弧菌、大菱鲆弧菌、迟缓爱德华氏菌、溶藻弧菌、鲨鱼弧菌和轮虫弧菌杀菌作用最强,最小杀菌质量浓度为256mg/L。质量浓度为512mg/L的黄连素溶液分别在20、40、60、80、100、121℃处理下作用30min,对美人鱼发光杆菌美人鱼亚种的杀菌率均超过99%,将20、60、100℃处理的黄连素溶液于室温下避光存储35d,对指示菌的杀菌率依然大于99%,显示其良好的药物稳定性。金属离子的影响试验也证实,水环境中的Na+、Mg~(2+)、Ca~(2+)、K~+等离子对黄连素的杀菌效果无显著影响。因此,黄连素适宜作为防治水产动物细菌性疾病的临床药物。
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虹鳟伪雄鱼与正常二倍体群体血清类固醇激素含量的季节变化
《水产学杂志 》 2019 北大核心
摘要：用17ɑ-甲睾酮混合饲料投喂诱导2批虹鳟Oncorhynchus mykiss伪雄鱼(三、四龄,平均体质量分别为2 200 g和3 056 g),以正常二倍体群体为对照(三、四龄平均体质量2 510 g和3 600 g),采用组织学和放射性免疫(RIA)方法,每2个月采血一次研究伪雄鱼和正常二倍体血清中性类固醇激素雌二醇(E2)和睾酮(T)的周年变化。结果表明,正常虹鳟和伪雄鱼精巢的组织细胞结构没有明显差异,伪雄鱼性腺组织形态与卵巢相似。3龄和4龄伪雄鱼血清中E2含量均在12月达到峰值,而3龄鱼的T浓度在12月达到峰值,4龄则在翌年2月达到峰值;3龄雌鱼血清中E2含量在10月达到峰值,4龄则在8月达到峰值,而T浓度均在12月达到峰值,进入繁殖期后E2含量开始下降;3龄和4龄正常雄鱼血清T浓度均在12月达最大值,E2在10月达峰值。结果表明,测定血清性类固醇激素浓度可用于准确判断鱼类的生殖状态,为正确利用虹鳟伪雄鱼提供参考。
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魁蚶(Scapharca broughtonii)血红蛋白Ⅰ基因克隆及表达特征
《渔业科学进展 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：魁蚶(Scapharca broughtonii)的血淋巴中因含有血红蛋白而不同于其他多数双壳贝类。为明确魁蚶血红蛋白基因的结构特征、组织发生分布、免疫活性等特点,本研究以魁蚶转录组数据库中的部分序列为基础,通过cDNA末端快速扩增(Rapid amplication of cDNA ends, RACE)技术,克隆获得了一种魁蚶血红蛋白基因cDNA全长序列(命名为SbHbⅠ),并研究了不同条件下的m RNA表达。序列和结构分析显示,SbHbⅠ基因cDNA全长为867 bp,其中包括长度为483 bp的开放阅读框(Open reading frame, ORF),编码160个氨基酸,预测蛋白分子量为17.5 kDa,理论等电点为9.68;氨基酸序列具有多个血红素结合位点,序列与所选其他物种的相似度范围为57%～93%,与蚶科相似度较高。实时荧光定量PCR (qRT-PCR)结果显示,在魁蚶成体的斧足、鳃、外套膜、闭壳肌、血淋巴、肝胰腺及受精卵至发育23 d的幼虫体内,均能检测到SbHbⅠ基因;该基因在成体魁蚶血淋巴中表达量最高,与其他5个组织中的表达量差异显著(P<0.05);受精卵至23 d幼虫期的表达,基本呈现为先下降后上升的趋势,且在12d时急剧上升(P<0.05);在鳗弧菌(Vibrioanguillarum)刺激和低氧胁迫后,血淋巴中SbHbⅠ基因的表达均呈先上升后下降的趋势,表达量最高值均出现在16 h。本研究丰富了贝类血红蛋白相关研究资料。
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四种正交子一代奥尼罗非鱼耐链球菌病能力差异研究
《农业生物技术学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：链球菌病是我国罗非鱼(Oreochromis spp.)产业的重大病害,迄今为止尚无有效防治办法,提高鱼体内在抗病力,进行品种改良是解决该病害的重要途径。本研究以尼罗罗非鱼(O. niloticus)埃及品系(Egypt strain, NE)♀、尼罗罗非鱼湘湖品系(Xianghu strain, NX)♀、奥利亚罗非鱼(O. aureus)"夏奥1号"(Xia'ao strain, AX)♂和奥利亚罗非鱼埃及品系(Egypt strain, AE)♂为亲本进行正交配组,获得NE♀×AX♂(EX)、NX♀×AX♂(XX)、NX♀×AE♂(XE)和NE♀×AE♂(EE)4种杂交组合。4种杂交子一代奥尼罗非鱼加强培育100 d后,进行无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)人工感染实验,通过感染后的相对存活率和血液生化指标变化的比较来评价其耐链球菌病能力。结果显示:感染后7 d的相对存活率EX奥尼罗非鱼(50%)>EE奥尼罗非鱼(37.5%)>XE奥尼罗非鱼(33.3%)>XX奥尼罗非鱼(20.8%);4种奥尼鱼中只有EX奥尼罗非鱼的丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)感染前后没有显著性变化(P>0.05);4种奥尼罗非鱼K+、Na+、C1-和Ca2+等电解质离子的含量感染后都发生显著性变化(P<0.05),但EX奥尼罗非鱼的Na+含量、Ca2+含量和Cl-含量在感染后3 d恢复到感染前水平;4种奥尼罗非鱼的球蛋白(globulin,GLO)在感染后3 d显著上升(P<0.05),并在感染后7 d达到峰值,此时ALB/GLO都显著降低(P<0.05);4种奥尼罗非鱼的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)在感染后显著增高(P<0.05),感染后的峰值分别为感染前的1.81倍、6.1倍、2.42倍和3.77倍;感染前EE奥尼罗非鱼的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)显著低于其余3种奥尼罗非鱼的SOD,而感染后1 d和7 d EX奥尼罗非鱼的SOD最低;4种奥尼罗非鱼的甘油三酯(triglyceride, TG)都在感染后3 d显著下降(P<0.05),EX、XX和XE奥尼罗非鱼的总胆固醇(total cholesterol, TC)在感染后3 d显著降低(P<0.05)。血液生化指标表明感染无乳链球菌会引起4种奥尼罗非鱼的肝、肾损伤,肌肉受损和脂代谢障碍,但EX奥尼罗非鱼的肝和肌肉受损最小,EX和EE奥尼罗非鱼代谢活动影响较小。上述结果表明,4种奥尼鱼中EX奥尼罗非鱼的耐链球菌病能力最强。本研究从耐链球菌病能力角度评价了4种不同罗非鱼正交组合间的合配效果和育种潜力,预期结果为培育罗非鱼抗链球菌病新品种提供理论依据和育种材料。
关键词： 奥尼罗非鱼 杂交育种 无乳链球菌 血清生化指标 耐链球菌病
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长江口水生动物食物网营养结构及其变化
《水生生物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为研究长江口水生动物食物网营养结构及其变化,运用胃含物分析法研究了2016—2017年长江口及其邻近水域捕获的43种水生动物的食性类型与营养结构,并与20世纪90年代和2006年文献数据进行了比较,结果表明,长江口及其邻近水域捕获的水生动物分为4种食性类型:浮游生物食性、底栖生物食性、游泳生物食性、混合食性,其中浮游生物食性消费者占绝对优势,为39.53%;游泳生物食性消费者所占比例最少,为11.63%。所分析样品的营养级可分为3级,其中植食性消费者占优势,为76.75%;中级肉食性消费者所占比例最少,为4.65%;与20世纪90年代相比, 12种常见鱼类的平均营养级由3.80下降到2.87。长江口水生动物食物网结构较为复杂,生产者类型包括底栖藻类、浮游植物、有机碎屑3种,主要由牧食食物链和碎屑食物链构成复杂的食物网。
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