科研产出
农杆菌介导转化大丽轮枝茵的体系优化
《棉花学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了揭示大丽轮枝菌的遗传变异和致病机理,以含潮霉素为抗性筛选标记、绿色荧光蛋白GFP为报告基因载体,优化了农杆菌介导转化大丽轮枝菌的遗传转化体系,获得了大丽轮枝菌菌株V991和BP2含绿色荧光蛋白GFP的转化子,转化率达到100*10-6~550*10-6.优化的转化条件为:农杆菌以IM液体培养基调节浓度至OD600=0.2并预培养4h,然后与等体积的浓度为106个·mL-1的大丽轮枝菌孢子混匀,每皿取200 μL混合液涂于固体IM共培养基的纤维素膜上,25℃共培养60h,转移至固体PDA培养基上以头孢噻肟钠500mg· LZ+潮霉素B 50 mg·L-1进行筛选.研究发现农杆菌LBA4404和AGL-1比农杆菌SK1044和EHA105更适用于大丽轮枝菌转化.对转化子观察和鉴定发现:从表型上,70.8%转化子保持野生型形态,29.2%转化子发生了形态变化;从致病力上,81%转化子的致病力相对于野生型没有发生显著变化,19%转化子的致病力或增强或减弱.
关键词： 农杆菌 大丽轮枝菌 潮霉素 GFP 遗传转化 遗传稳定性 表型变异
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淮安地区主栽小麦品种指纹图谱的构建及遗传多样性分析
《浙江农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：利用分布在小麦42条染色体上的86对SSR引物,对24份淮安地区主栽小麦品种(系)基因组DNA进行PCR扩增,结果发现,86对SSR引物中有26对引物在24份材料之间具有稳定的多态性。利用这26对SSR引物所检测出的124个等位基因对24份淮安地区小麦主栽品种(系)进行遗传相似性分析,并在26对引物中选择其中6对多态性好、扩增带型清晰的SSR引物构建24份小麦品种(系)的指纹图谱。6对SSR引物构建的指纹图谱可以将24份小麦品种(系)逐一区分开来。24份小麦品种(系)间遗传相似系数的变异范围为0.54～0.92。采用非加权类平均法进行聚类分析,在相似系数0.64处,可将24份小麦品种(系)分为4大类群,在一定程度上反映了品种之间的亲缘关系。
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盐分胁迫对大麦幼苗生理指标的影响
《浙江农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：文章对盐胁迫下大麦幼苗生理指标进行了分析研究。结果表明,随NaCl浓度的升高,大麦茎叶中可溶性糖、脯氨酸含量增高,K+/Na+降低;大麦茎叶中脯氨酸含量随NaCl浓度升高呈倍数升高,在0.6%NaCl胁迫下,‘CM72’脯氨酸含量最高达1.526μmol.g-1。在同一NaCl浓度下,不同大麦品种间可溶性糖、脯氨酸含量及K+/Na+差异明显,‘CM72’渗透物质合成能力最强,耐盐性较好,‘泰兴9425’和‘苏啤3号’次之。
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28%丙环·咪鲜胺水乳剂的高效液相色谱分析
《江苏农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以甲醇-乙腈-水(体积比30∶30∶40)为流动相,使用Hypersil ODS不锈钢柱,在225 nm条件下使用紫外检测器,对28%丙环.咪鲜胺水乳剂进行高效液相色谱分离和测定,外标法定量。该测定方法下各有效成分回收率分别为:丙环唑99.06%～100.84%,咪鲜胺99.83%～100.04%;标准偏差:丙环唑为0.025 9,咪鲜胺为0.095 0;变异系数:丙环唑为0.315%,咪鲜胺为0.465%;线性相关系数:丙环唑为0.999 99(同分异构体1)或0.999 80(同分异构体2),咪鲜胺为0.999 72。该方法快速、准确、可靠。
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源库调节对Bt棉棉铃外源杀虫蛋白表达量影响的研究
《棉花学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以转Bt基因抗虫棉不同大小棉铃品种泗抗1号、泗抗3号和科棉6号为材料,2005-2006年于扬州大学实验农场进行源库调节对棉铃Bt杀虫蛋白表达量影响的试验。研究结果表明:整株去除一半叶片,则体积膨大期棉铃体积、铃重和子指变小,且体积和铃重以大铃品种科棉3号受影响大,花后28 d体积和铃重分别下降15.4%和20.5%,子指以小铃品种泗抗1号受影响大,花后28 d下降了20.6%;与体积、铃重结果相反,铃壳和棉子中Bt蛋白含量增加,花后21 d则分别增加了23.5%～32.3%和3.3%～18.8%。整株均匀去除一半蕾,则棉铃体积、铃重和子指变大,其中仍以大铃品种受影响大,花后28 d分别增加了25.8%,10.4%和12.7%;而铃壳和棉子中Bt蛋白含量下降,仍以大铃品种下降幅度大,花后21 d分别下降了40.6%和33.7%。相关分析表明,源库调节下铃体积、铃重都与铃壳和棉子中Bt蛋白含量呈显著负相关,子指与棉子中Bt蛋白也表现同样效应。因此,在育种和栽培时需协调好棉铃发育和Bt表达的关系。
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