鉴别检测兔出血症病毒1型、2型双抗体夹心ELISA方法的建立及应用

陈兴继; 魏后军; 范志宇; 胡波; 宋艳华; 陈萌萌; 仇汝龙; 葛雷; 王芳; 《江苏农业科学 》 2023 北大核心

摘要：为实现对兔出血症病毒1型（RHDV1）和兔出血症病毒2型（RHDV2）的有效鉴别诊断，从而有效预防和控制兔出血症，将抗RHDV广谱单抗2A11作为捕获抗体包被于ELISA板，以HRP标记的抗RHDV1特异性单抗1D4、抗RHDV2特异性单抗6B3分别作为检测抗体，经条件优化，建立了鉴别检测兔出血症病毒1型、2型的双抗体夹心ELISA方法，并进行敏感性、特异性试验，对送检的60份兔肝脏样品用该双抗体夹心ELISA方法和RT-PCR方法进行检测，比较这2种方法的符合率。结果显示，该双抗体夹心ELISA方法的最佳工作条件为：捕获抗体浓度为4μg/mL,2种HRP标记的检测抗体的浓度均为0.5μg/mL;判定标准为：以检测抗体HRP-1D4检测样品D值＞0.195判为RHDV1阳性，以检测抗体HRP-6B3检测样品D值＞0.166判为RHDV2阳性；通过特异性和敏感性试验发现，该双抗体夹心ELISA方法具有较强特异性和较高敏感性。检测60份送检的兔肝脏样品，发现本方法与RT-PCR方法相比，检测RHDV1阳性样品的符合率为100%（9/9）,RHDV2阳性样品的符合率为82.61%（19/23）,阴性样品的符合率为87.5%（28/32）,总符合率为93.33%（56/60）,且该方法阳性样品检出率高于RT-PCR方法。本研究建立的双抗体夹心ELISA方法可有效地鉴别检测RHDV1和RHDV2这2种不同基因型的病毒，为兔出血症的流行病学研究提供有力的技术支撑。

关键词： 兔出血症病毒 双抗体夹心ELISA 单抗 鉴别检测

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草莓脯恒温与分阶烘干过程中水分迁移特性与品质比较

何茸茸; 牛丽影; 李大婧; 胡丽丽; 王锐; 张钟元; 刘春菊; 肖亚冬; 聂梅梅; 肖丽霞; 《食品工业科技 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为了研究干燥过程对草莓脯水分迁移及品质的影响,对渗透脱水后的草莓脯采用恒温(60℃-12 h,干至6 h翻面)与分阶(65℃-2 h,60℃-2 h,55℃-2 h;翻面;65℃-2 h,60℃-2 h,55℃-2 h)2种方式烘干.采用低场核磁共振技术(Low-field nuclear magnetic reasonance,LF-NMR)研究草莓脯中水分分布和迁移规律,并对 2种干燥方式得到的草莓脯理化(质构、VC、总酚)和感官品质(风味、组织形态、口感、色泽)进行了比较.结果表明:随着干燥时间延长,草莓脯干基含水量逐渐降低,但分阶干燥的速率高于恒温干燥.LF-NMR的T2 反演图谱及峰面积的变化显示渗透脱水后的草莓中自由水为水分主要形态,还有少量结合水和不易流动水,2种干燥方式下草莓脯的T2 值均随干燥时间延长逐渐减小,水分流动性降低,但至干燥结束时,恒温干燥和分阶干燥的总弛豫峰面积分别下降至初始水平的 31.3%和 26.4%,分阶干燥较恒温干燥具有更高的干燥效率.核磁共振成像(magnetic reasonance imaging,MRI)显示在干燥过程中,草莓中水分最初向破损的果蒂端富集并散失,中期则以经果皮失水为主,最后水分主要残留在髓部.从成像结果看,2种干燥方式的主要区别在于恒温干燥的草莓脯在干燥 6 h时存在明显的均湿现象,即水分在果脯内重新均匀分布,而在分阶干燥中未出现此过程.另外,分阶干燥后的草莓脯VC和总酚含量显著高于恒温干燥(P<0.05),为恒温干燥的 1.89倍和 1.14倍,而粘力、硬度、咀嚼性则显著低于恒温干燥(P<0.05);分阶干燥的草莓脯质地、外观、口感以及整体评分均显著高于恒温干燥(P<0.05),为恒温干燥的 31.3%、41.3%、40.2%.总体而言,分阶干燥的干燥效率更高,并且获得的草莓脯品质更优.

关键词： 干燥过程 草莓脯 低场核磁共振 水分迁移 品质比较

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贝莱斯芽胞杆菌YL2021高产嗜铁素的摇瓶发酵工艺优化

沈佳慧; 乔俊卿; 左杨; 刘永锋; 刘邮洲; 《中国生物防治学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis YL2021是一株对多种植物病原菌具有良好防治效果的生防菌,其基因组中含有完整的儿茶酚型嗜铁素合成基因簇,在缺铁条件下能产生具有抑菌作用的嗜铁素.为了提高贝莱斯芽胞杆菌YL2021嗜铁素的产量,采用摇瓶培养发酵,通过Plackett-Burman(PB)试验、中心组合试验(central composite design,CCD)和响应曲面法(response surface methodology,RSM)分析,优化菌株YL2021 高产嗜铁素的发酵培养基成分和培养条件.结果表明,菌株YL2021 高产嗜铁素的最优培养基配方:葡萄糖 19.43 g/L、NH4Cl 1.93 g/L、KH2PO4 9.02 g/L、谷氨酸钠 6.00 g/L、MgSO4 1.75 g/L和CaCl2 0.08 g/L;最优培养条件为:温度 30℃、初始pH值 7.0、接种量 5%、培养时间 36.5 h、转速 200 r/min和装液量 75 mL(250 mL三角瓶中).菌株YL2021在优化条件下嗜铁素产量达到 734.86 μmol/L,较优化前提高了 10.34倍,优化效果明显.本文结果表明,已成功建立了适用于 YL2021 高产嗜铁素的摇瓶发酵体系,为嗜铁素的生防应用提供理论基础和技术支撑.

关键词： 贝莱斯芽胞杆菌 嗜铁素 发酵优化 抑菌作用

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不同连作年限栝楼根际土壤微生物群落多样性分析

徐筋燕; 何晓兰; 邵明灿; 万云龙; 刁亚梅; 杨中海; 郭书巧; 《江苏农业学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为明确连作对栝楼根际土壤微生物群落的影响和栝楼连作障碍产生的原因,以连作2年和连作4年的栝楼根际土壤为研究对象,进行土壤理化性质测定以及土壤细菌16S和真菌ITS高通量测序.土壤理化性质测定结果表明,与连作2年的栝楼根际土壤样本相比,连作4年的栝楼根际土壤样本中有机碳含量下降;与对照土壤样本和连作2年的栝楼根际土壤样本相比,连作4年的栝楼根际土壤样本阳离子交换量(CEC)下降,说明土壤保肥能力已下降.细菌群落α多样性分析结果显示,栝楼连作对细菌群落的影响相对较小.细菌群落结构分析结果表明,与对照土壤样本相比,栝楼连作根际土壤中一些具有重要功能的细菌门相对丰度下降.与对照土壤样本相比,连作2年和连作4年的栝楼根际土壤样本中真菌群落群落结构和组成发生明显变化,一些有害真菌属如Stagonosporopsis、Rhizoctonia和Colletotrichum的相对丰度大幅增加.典型相关分析结果表明,硝态氮含量、全磷含量和速效磷含量是栝楼根际土壤微生物群落多样性的主要影响因素;pH值、阳离子交换量是CK土壤微生物群落多样性的主要影响因素.

关键词： 栝楼 连作 根际土壤 微生物群落 土壤理化性质 高通量测序

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高功率脉冲微波协同花色苷对大豆分离蛋白理化特性的影响及其在蛋糕中的应用

吴寒; 刘浩男; 邸清茹; 夏依旦·买买提; 刘小莉; 周剑忠; 《食品科学 》 2023 EI 北大核心 CSCD

摘要：本实验利用高功率脉冲微波(high power pulse microwave,HPPM)处理蓝莓花色苷(blackberry anthocyanins,BANs)-大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)复合物,得到iHPPM-SPI-BANs复合物,通过分析该复合物的理化特性等,研究HPPM处理对SPI功能特性及生物活性的影响.此外,将HPPM-SPI-BANs应用于蛋糕制作,替代部分蛋清蛋白,进一步研究HPPM-SPI-BANs对蛋糕烘焙品质和贮藏特性的影响.结果表明,在HPPM协同作用下,HPPM-SPI-BANs的溶解性显著增加了1.11倍,起泡和乳化特性也得到显著提高(P<0.05),抗氧化能力相比SPI和未经HPPM处理的SPI-BANs复合物也均有显著提升;HPPM-SPI-BANs的添加能有效抑制蛋糕焙烤过程中水分散失,改善蛋糕的硬度与咀嚼性,使其DPPH自由基清除能力和铁离子还原能力分别提高3.56倍和2.79倍,将蛋糕老化速率常数k降低至0.12,对提升戚风蛋糕的货架期品质具有重要作用.

关键词： 大豆分离蛋白 高功率脉冲微波 花色苷 功能特性 抗氧化能力 蛋糕品质

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水稻稀穗突变体lax3的遗传分析及基因定位

许有嫔; 吉冰璇; 王林叶; 张启军; 《江苏农业科学 》 2023 北大核心

摘要：穗粒数是构成作物产量的三大要素之一，与作物产量具有显著的正相关关系，定位、克隆与穗粒数有关的新基因为解析作物产量构成具有十分重要的意义。利用穗颈注射法将高粱基因组DNA导入水稻品种9311中，在后代筛选到1个稀穗突变体，暂定名为lax3。研究了该突变体的主要农艺性状和稀穗的遗传方式，并对该稀穗突变基因进行了精细定位。研究结果表明，该稀穗突变体lax3在株高、分蘖、枝梗和穗粒数上与受体9311相比存在显著的差异。遗传分析表明该突变体的稀穗性状受1对隐性核基因控制，用lax3/02428 F₂群体将该基因初步定位在水稻第4染色体上，位于SSR标记RM16335和RM16424之间，交换单株分别为5株和3株。通过扩大遗传群体和进一步开发标记，最后将该基因定位在RM16349和Indel标记In4-8之间，两者之间的物理距离约为96.9 kb。本研究结果为进一步克隆该基因、解析水稻穗粒结构调控机制和分子辅助选育奠定一定的基础。

关键词： 水稻 稀穗 lax3（t）基因 精细定位

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蟹池直放抱卵青虾养殖技术

杨智景; 顾明; 顾海龙; 冯亚明; 《科学养鱼 》 2023 北大核心

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江苏如东草甸土水稻穗肥减氮运筹技术研究

石吕; 石晓旭; 李赢; 薛亚光; 魏亚凤; 韩笑; 杨美英; 刘建; 《核农学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探明江苏如东草甸土水稻穗肥减氮运筹效应,以当地农户传统施肥模式(A)为对照,在穗肥减氮10%的情况下,设置B(2∶1)、C(1.5∶1.5)、D(2.5∶0.5)、E(3∶0)、F(0∶3)5个不同的促花肥和保花肥比例水平,开展田间试验,研究产量效益、群体质量和稻米品质变化情况.结果表明,与对照相比,穗肥减氮10%后,不同施肥比例茎叶干物质转运量、转运率和贡献率总体呈降低趋势,产量与之相反(除F减产6.67%),其中C增幅最大(2.47%),主要表现为结实率与千粒重的提高,其产值、纯收入和产/投比增幅分别为2.48%、17.31%和3.38%.成熟期和花后干物质积累量均与产量呈极显著正相关关系(P<0.01),相关系数分别为0.979和0.965.抽穗期上3叶(总叶)叶面积指数、叶面积衰减率均与成熟期叶面积指数变化呈相反趋势(除F处理),其中C成熟期叶面积指数最高,叶面积衰减率最低.适当提高保花肥比例有助于上3叶净光合速率的提高,且处理C、F始终保持较高水平,倒2、3叶增加趋势比倒1叶明显.穗肥减氮10%后,稻米加工品质和外观品质有改善趋势,直链淀粉含量和胶稠度有所提高,蛋白质含量亦呈增加趋势,其中C加工品质和外观品质相对较好,直链淀粉含量最低,胶稠度较长,蛋白质含量适中.与对照相比,C氨基酸总量增幅最大(8.05%),主要提高了蛋氨酸、缬氨酸2种必需氨基酸含量(增幅>5%)和谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、组氨酸5种非必需氨基酸含量(增幅>10%).综合考虑,草甸土水稻高产优质高效栽培适宜的氮素穗肥运筹方式为纯氮99 kg·hm-2情况下分促花肥(倒4叶期)和保花肥(倒2叶期)两次等量施用,切忌在倒2叶期保花肥作穗肥一次施用.本研究结果可为如东草甸土水稻绿色高质高效生产技术的规范提供基础数据和理论支撑.

关键词： 草甸土 水稻 穗肥减氮运筹 群体质量 稻米品质

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基于氧化还原法水稻秸秆基抑菌薄片的制备及表征

赵晨鹏; 余德倩; 范肖东; 翟胜丞; 孙恩慧; 潘明珠; 《化工新型材料 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为充分利用当地农业废弃物水稻秸秆，以南粳46水稻秸秆为原料，用氧化还原的处理方法，通过光学表征、红外光谱、微观形貌及元素分析来研究不同浓度硝酸银溶液对纳米银颗粒生成的影响，用热重分析法和抑菌环法测试了薄片的主要性能，探索氧化还原法制备纳米银颗粒在水稻秸秆纤维上的应用。结果表明：氧化还原法在水稻秸秆纤维上较好地负载上纳米银颗粒，具备一定的抑菌效果，不同浓度的硝酸银溶液对纳米银颗粒的粒径和分布影响明显，硝酸银浓度为40mmol/L时纳米银颗粒负载和抑菌效果最佳。

关键词： 水稻秸秆 纳米银 氧化还原 抑菌

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降解嘌呤核苷乳酸菌的筛选及益生特性探索

任宇杰; 单成俊; 王英; 张会; 刘浩男; 刘小莉; 周剑忠; 《微生物学通报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：【背景】高尿酸血症是人体内嘌呤代谢紊乱导致的一种慢性代谢疾病，利用乳酸菌降解嘌呤类物质是辅助治疗高尿酸血症的新方法。【目的】筛选高效降解嘌呤核苷的乳酸菌并对其益生特性进行研究。【方法】利用HPLC法评价乳酸菌对肌苷、鸟苷的降解效果。通过药敏性试验、体外耐受性试验及细胞黏附试验研究目标菌株的益生特性。【结果】筛选出一株发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum） SR2-6，对肌苷和鸟苷的降解率分别为99.26%和98.85%。该菌株对青霉素、氯霉素等5种常见抗生素不具备耐药性，在pH 2.0环境下处理4 h后菌株的存活率为76.51%，在饱腹状态下的人工肠液模拟消化4 h后活菌数仍能达到6.85 lg（CFU/mL），对Caco-2细胞的黏附数为（52.29±15.14） CFU/cell。【结论】发酵乳杆菌SR2-6能够高效降解肌苷和鸟苷且具有优良的益生特性，是预防和治疗高尿酸血症的潜在优势菌株，可作为优势菌种资源应用于相关功能产品的开发。

关键词： 乳酸菌 肌苷 鸟苷 益生特性

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