科研产出
5种土壤处理除草剂对半夏田杂草防除效果
《农药 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[目的]草害是制约贵州半夏产业发展的重要因素之一。生产上主要依靠人工除草方式,其除草成本高;化学除草是降低半夏田除草成本的有效措施,但生产上供选择的除草剂品种单一;试验旨在提供更多除草剂品种供半夏田选择应用。[方法]选用5种土壤处理除草剂,按照随机区组设计进行田间药效试验,在半夏播后苗前进行土壤喷雾处理。[结果]50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC 1500 g a.i./hm2处理、68.8%嗪草酮·乙草胺EC1543.5 g a.i./hm2处理对半夏田杂草防除效果最好,药后30、45 d对杂草群体总株防效、总鲜重防效均在92%以上,但50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC易产生药害,不宜使用;其次为960 g/L精异丙甲草胺EC864 g a.i./hm2处理、240 g/L乙氧氟草醚EC 180 g a.i./hm2处理,总株防效、总鲜重防效在69%以上;450 g/L二甲戊灵CS 742.5 g a.i./hm2处理虽药后30 d对杂草群体总防效较好,但45 d防效较差。[结论]除50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC外,其余4种除草剂均可在半夏田应用。但各除草剂对不同杂草种类防效存在一定差异,应根据半夏田杂草发生情况合理选择,科学用药,保障半夏产品质量安全。
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调控牛CEBPA基因表达的miRNA筛选及对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响
《畜牧兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：旨在筛选并验证调控牛增强子结合蛋白A（CCAAT/enhancer binding protein alpha,CEBPA）表达的miRNA及其对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响。本研究综合运用多个在线软件筛选与CEBPA基因具有潜在调控关系的miRNA,运用qRT-PCR技术检测CEBPA基因在关岭牛各类组织中的表达水平;构建CEBPA-3′UTR-WT和CEBPA-3′UTR-MUT双荧光素酶报告载体,通过双荧光素酶报告系统验证候选miRNA与CEBPA基因的结合关系;分离培养关岭牛肌内前体脂肪细胞,利用qRT-PCR、Western blot、油红O染色和CCK-8探究调控CEBPA的miRNA对牛肌内前体脂肪细胞分化与增殖的影响。生物信息学分析发现,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a、bta-miR-181b、bta-miR-181c、bta-miR-181d与CEBPA基因具有潜在结合关系;qRT-PCR结果表明,CEBPA基因在关岭牛内脏组织、肌肉组织、脂肪、下丘脑以及部分生殖器官中均有表达,在2岁牛背最长肌的表达量极显著高于1日龄犊牛（P<0.01）;双荧光素酶报告系统结果表明,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能直接结合牛CEBPA基因3′UTR;细胞试验结果表明,CEBPA基因在牛肌内前体脂肪细胞分化中的表达水平随时间逐渐升高,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a在分化0 d表达水平极显著高于其他时期（P<0.01）,整个分化时期bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a与CEBPA基因表达趋势相反;过表达miR-23a、miR-23b-3p、miR-181a均能极显著降低CEBPA基因mRNA和蛋白表达量（P<0.01）,并降低牛肌内前体脂肪细胞中脂滴含量;bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能阶段性促进细胞增殖。结果表明,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能阶段性的促进牛肌内前体脂肪细胞增殖,并通过直接负调控CEBPA的表达来间接影响该细胞分化。
关键词： CEBPA miRNA 肌内前体脂肪细胞 细胞分化
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鸭源NF-κB1基因荧光定量PCR方法建立及其初步应用
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立鸭NF-κB1（nuclear factor-kappa B, NF-κB）基因的荧光定量PCR检测方法,并以建立的方法检测鸭胚成纤维细胞（duck embryo fibroblasts, DEF）在感染鸭肠炎病毒（DEV）后NF-κB1基因随时间变化转录表达量的变化情况。根据GenBank上NF-κB1基因保守序列设计特异性引物,以鸭胚成纤维细胞mRNA提取样本反转录为cDNA,进行NF-κB1基因克隆质粒构建,以此为模板建立鸭NF-κB1基因荧光定量PCR检测方法并进行特异性、重复性和敏感性试验,并利用建立的方法DEF感染DEV后NF-κB1基因随时间变化的转录变化进行检测。结果显示:建立的鸭NF-κB1基因荧光定量PCR方法标准曲线呈现典型的S型,方程为y=-3.12x+44.086（R2=1）,扩增效率为109.2%;其熔解温度Tm值为（83.5±0）℃,曲线呈特异性单峰,批内变异系数小于0.3%,批间变异系数小于0.2%;检测灵敏度可达到1.79个拷贝。DEF细胞在感染DEV后NF-κB1基因随时间改变转录水平变化无规律,但整体表达水平高于正常细胞,差异显著（P<0.05）,36～84 h NF-κB1基因的转录水平与正常细胞中差异极显著（P<0.01）。本研究成功建立了鸭NF-κB1基因荧光定量PCR检测方法,并对DEF细胞感染DEV后NF-κB1基因的转录水平进行了研究,为后续实验研究提供了技术和数据支撑。
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中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法的建立与应用
《中国兽医科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立中蜂囊状幼虫病毒（CSBV）核酸的特异性检测方法,以CSBV结构蛋白VP3基因为靶基因,根据GenBank中序列合成1对特异性引物,建立了CSBV RT-PCR检测方法。以CSBV克隆质粒作为模板和蜜蜂6种不同病毒,分别进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示:所建立的RT-PCR检测方法能扩增出CSBV特异性片段,且不能扩增出蜜蜂以色列急性麻痹病毒、蜜蜂畸翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、黑蜂王台病毒、蜜蜂克什米尔病毒;CSBV阳性质粒最低检测质量浓度为2.82 fg/m L;对CSBV阳性质粒和双蒸水空白对照组重复检测3次,均能扩增出与预期一致的特异性片段。利用该检测方法对从贵州省不同养蜂场采集的100份中华蜜蜂样本进行检测,71份样本为阳性,通过序列比对分析,同源性高达99.16%,进一步证实为CSBV。结果表明,所建立的CSBV检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,具有良好的实用性。
关键词： 中蜂囊状幼虫病毒 RT-PCR VP3基因 中华蜜蜂
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红曲米酒糟对山羊生长性能与脂质代谢的影响
《动物营养学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究红曲米酒糟对山羊生长性能及脂质代谢的影响,并以此确定山羊饲粮中红曲米酒糟的适宜添加水平。选取28只体况良好、体重一致的贵州白山羊,按照随机区组设计将其分为4组,每组7个重复,每个重复1只羊。对照组饲喂不含红曲米酒糟的基础饲粮,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别饲喂含10%、20%和30%红曲米酒糟的试验饲粮。试验持续38 d,包括预试期10 d,正试期28 d。结果显示:各组山羊的干物质采食量（DMI）、末重（FW）、平均净增重（ANG）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）差异均不显著（P>0.05）,但从数值上看,以试验Ⅰ组的生长性能最佳。试验Ⅲ组血浆甘油三酯（TG）含量显著高于对照组（P <0.05）;试验Ⅱ组与试验Ⅲ组血浆总胆固醇（TC）含量显著高于对照组（P<0.05）;血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量各组间差异不显著（P>0.05）。综上可知,在本试验条件下,饲粮中添加一定量（10%～30%）的红曲米酒糟对山羊的生长性能没有负面影响,并能有效改善脂质代谢状况,综合来看,以红曲米酒糟添加量为10%时饲喂效果最佳。
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藜麦种质资源的遗传多样性分析
《种子 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：了解藜麦种质资源的遗传多样性,为藜麦在贵州有效推广、种植、应用,并通过杂交手段创建藜麦新种质。试验以国内外收集到的96份藜麦种质作为试验群体,种植于大田,采用CTAB法提取96份材料的基因组DNA,再利用筛选出的18对多态性SSR标记对藜麦基因组相应的位点进行扩增,扩增产物用PAGE检测。结果表明,18对多态性的SSR引物,共检测出192个等位基因条带,每一对多态性SSR引物的等位基因数为3～21个,平均等位基因数为10.7个。96份藜麦材料遗传相似系数范围为0.599～0.980,平均值为0.789 5。UPGMA聚类分析显示,在距离为0.752处可将96份藜麦材料分为五类。本研究中藜麦种质农艺性状方面存在着丰富的变异类型,选用的藜麦SSR标记在供试材料中具有较好的多态性,通过聚类分析可将材料按选系类型、来源地区、农艺性状等划分为不同的类群或亚类群。
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生物质炭添加量对贵州尖椒生长及土壤肥力与酶活性的影响
《西南农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探明贵州尖椒专用炭基肥中生物质炭的最适添加量,为辣椒施肥时添加适宜用量生物质炭提供科学依据。【方法】生物质炭设4个不同添加量处理,T1∶10%生物质炭（添加量250 kg/hm2）、T2∶20%生物质炭（添加量500 kg/hm2）、T3∶30%生物质炭（添加量750 kg/hm2）和T4∶40%生物质炭（添加量1000 kg/hm2）,采用田间小区试验方法,研究生物质炭不同添加量对贵州尖椒生长及土壤肥力与酶活性的影响。【结果】尖椒产量,T2最高,为14 887.88 kg/hm2,较T1提高44.69%;尖椒生长性状,株高T2最高,为116.67 cm,茎粗和分支数T3最粗/多,分别为14.55 mm和22.17个,各处理间差异均不显著;尖椒品质,硝酸盐和还原糖含量T2最高,分别为76.90和29.62 mg/kg,氨基酸含量T1最高,为5.99 mg/kg,Vc含量T3最高,为98.42 mg/100g;土壤肥力,不同处理p H为4.76～4.89,依次为T1> T2> T3> T4,有机质为33.5～41.4 g/kg,依次为T4> T3> T2> T1,碱解氮为314.76～358.21 mg/kg,依次为T2> T1> T4> T3,有效磷为25.50～34.94 mg/kg,依次为T3> T4> T2> T1,速效钾为152.00～192.00mg/kg,依次为T2> T4> T3> T1;土壤酶活性,不同处理磷酸酶为0.15～0.21 mg/g,依次为T3> T4> T2> T1,过氧化氢酶为0.06～1.12 m L/（20 min·g）,依次为T3> T2> T1> T4,脲酶为0.12～0.16 mg/g,依次为T3> T2> T4> T1,蔗糖酶为0.08～0.54 mg/g,依次为T2> T4> T3> T1;土壤肥力与其酶活性的相关性,磷酸酶与pH和碱解氮呈极显著负相关,与有效磷呈极显著正相关,蔗糖酶与速效钾呈极显正相关。【结论】20%生物质炭（添加量500 kg/hm2）和30%生物质炭（添加量750 kg/hm2）可促进尖椒生长发育,提高土壤肥力和酶活性,是生物质炭添加量的最佳比例,综合考虑,以20%生物质炭（添加量500 kg/hm2）更为适宜。
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灰色关联分析和聚类分析在玉米品种综合评判中的应用
《种子 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：西南地区玉米杂交种多,适宜机械粒收的高产品种较少,为筛选出综合性较优的宜机收玉米品种,采用灰色关联分析和聚类分析对45个不同玉米品种（系）进行综合性评判。结果表明,株高、穗位高、生育期等指标与参考数列最优性状值关联度最大,关系最紧密;灰色关联分析和聚类分析表明,华兴单88、渝单8075和先玉1171品种（系）评判为综合性较优宜机收品种。通过相关性分析,生育期与籽粒含水率、破碎率、株高和穗位高呈显著正相关,破碎率与籽粒含水率呈显著正相关,产量损失率与穗位高呈显著正相关,杂质率与空杆率和产量损失率呈正相关,出籽率与空杆率呈显著的负相关。
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黑喉石斛叶绿体基因组特征及比较分析
《热带作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本研究结合Illumina高通量测序和Nanopore测序技术,对黑喉石斛（Dendrobiumochreatum）的叶绿体基因组（cpDNA）进行测序,组装得到其cpDNA全长序列并绘制结构图谱。黑喉石斛cpDNA全长154 935 bp,注释共得到125个基因,其中有unigenes 103种,包含73种蛋白编码基因,26种tRNA基因和4种rRNA基因。特征分析结果表明:黑喉石斛cpDNA中共存在58个SSR（simplesequencerepeat）位点,大部分为单核苷酸重复和二核苷酸重复类型,碱基组成以A/T碱基类型为主;其偏好的密码子共32个,其中有30个以A/U碱基结尾。以黑喉石斛与其他13种石斛的cpDNA构建系统发育进化树,结果显示,鼓槌石斛（D. chrysotoxum）和梳唇石斛（D. strongylanthum）与黑喉石斛具有较近的亲缘关系,IR/SC边界分析结果也映证了此结论。以黑喉石斛为参照,与3种近缘石斛的cpDNA进行全序列长对比,结果显示,4种石斛的序列变异主要发生在单拷贝区,基因间隔区的变异明显高于基因编码区。
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