科研产出
三角鲂foxl2基因克隆和时空表达特征及EE2对其表达的影响
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究foxl2基因(forkhead transcription factor gene 2)在三角鲂(Megalobrama terminalis,M.terminalis)性腺发育过程中的功能，该研究克隆了三角鲂foxl2基因的开放阅读框(open reading frame, ORF),分析了其编码蛋白的结构特征，检测了其在胚胎发育不同时期和成体不同组织中的表达情况，并研究了腹腔注射性激素17α-乙炔基雌二醇(17α-ethinylestradiol, EE2)对foxl2表达的影响。结果表明：三角鲂foxl2基因ORF为921 bp,共编码306个氨基酸，具有保守的叉头(forkhead, FH)结构域，与斑马鱼(Danio rerio)FOXL2的同源性较高达到96%。三角鲂FOXL2蛋白与鲤科鱼类亲缘关系较近，而与人类和小鼠相距较远。qRT-PCR结果显示，foxl2 mRNA在三角鲂整个胚胎发育过程中均表达，在受精后24、48、60 h表达量较高(P<0.05);在卵巢中的表达量显著高于精巢和其他组织(P<0.05),在肌肉、皮肤、脾、肾和肠组织中弱表达或不表达，表达具有组织特异性。腹腔注射EE2对三角鲂foxl2 mRNA表达调控结果显示，在脑组织中，雌鱼foxl2 mRNA在注射24 h达到峰值且显著高于对照组和雄鱼(P<0.05);在性腺组织中，foxl2 mRNA在注射24 h后的卵巢和精巢中表达量最高，且在36 h的卵巢中持续高表达(P<0.05),表明EE2能够明显促进三角鲂脑和卵巢foxl2 mRNA的表达。研究表明，foxl2基因在三角鲂性腺中呈性别二态性表达，推测其在卵巢发育和功能维持方面起重要作用，foxl2可能是与性类固醇激素相互作用来调节三角鲂性腺发育和功能维持。该研究可为三角鲂性腺发育及性别调控机制提供基础资料。
关键词： 三角鲂 foxl2 性腺发育 EE2 mRNA表达分析
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发酵饲料替换基础日粮改善蛋鸭生产性能及小肠组织形态
《中南农业科技 》 2024
摘要：试验将288羽140日龄健康绍兴蛋鸭随机分成4组,每组6个重复,每个重复12羽.1组为对照组,饲喂基础日粮,其他3组为发酵饲料替换组,分别以20%、30%、40%发酵饲料替换基础日粮饲喂.试验期为3个月.结果表明,与对照组相比,30%、40%发酵饲料替换组蛋鸭产蛋率、日产蛋重显著提高(P<0.05),料蛋比显著降低(P<0.05);发酵饲料替换基础日粮对蛋鸭采食量、平均蛋重无显著影响.发酵饲料替换基础日粮对蛋鸭十二指肠和回肠的绒毛高度、绒隐比以及空肠绒隐比有提高作用,其中40%发酵饲料替换组十二指肠绒隐比提高了54.17%(P<0.05);发酵饲料替换基础日粮对蛋鸭十二指肠、空肠、回肠隐窝深度及空肠绒毛高度无显著影响.
关键词： 发酵饲料 替换基础日粮 蛋鸭 生产性能 小肠组织形态
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HSD17B12对兔卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响
《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本实验旨在研究羟基类固醇17-β脱氢酶12（17β Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 12,HSD17B12）对兔卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。首先克隆了兔HSD17B12基因，进行生物信息学分析；分离原代兔颗粒细胞（Granulosa Cells,GCs），并利用FSHR免疫荧光法进行鉴定；构建HSD17B12基因过表达质粒及干扰RNA，转染GCs，利用qRT-PCR检测HSD17B12对增殖、凋亡相关基因的调控作用，并利用流式细胞、CCK8等方法检测HSD17B12对GCs增殖、凋亡的影响。结果显示：（1）利用FSHR免疫荧光染色，鉴定分离原代细胞是GCs,FSHR表达呈阳性。（2）克隆HSD17B12基因，发现其cDNA全长为938 bp，编码312个氨基酸。进化树显示兔与黑猩猩（Pan Troglodytes）、猕猴（Macaca Mulatta）等聚在一起，鸡（Gallus Gallus）为外支。（3）过表达HSD17B12可以提高增殖相关基因AKT1-1的表达（P＜0.01），降低凋亡相关基因Bad、Fas、FasL、P53（P＜0.01）以及Bcl-2（P＜0.05）的表达；干扰后，对基因的调控作用相反。（4） HSD17B12可促进GCs增殖，抑制GCs凋亡（P＜0.01）。因此，HSD17B12可能通过调控AKT1、Bad、Fas、FasL、P53等基因的表达，显著促进兔GCs增殖，抑制其凋亡，为其在母兔卵巢发育中的作用机制研究提供理论依据。
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瓜类作物CRISPR/Cas9基因编辑技术应用研究进展
《园艺学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：主要概述了CRISPR/Cas9基因编辑技术的来源、分类以及作用机制，总结归纳了CRISPR/Cas9技术在瓜类作物基因功能鉴定和性状改良上的研究进展，讨论了在瓜类作物中基因编辑技术应用的难点和解决方法，以期为基因编辑技术在瓜类作物中广泛应用提供参考。
关键词： 葫芦科 基因编辑 CRISPR/Cas9 性状改良 研究进展
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基于改进Faster-RCNN网络的无人机遥感影像桃树检测
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：研究桃树精准检测定位方法可为桃园精准化管理提供支撑，该研究利用无人机遥感结合深度学习算法对无叶期桃树进行检测，并对萌芽期桃树和花期桃树进行区分。在Faster-RCNN原始网络的基础上提出了3种改进：替换主干网络为融合卷积注意力模块(convolutional block attention module, CBAM)后的ResNeXt-50、感兴趣区域特征提取方法使用ROI Align代替ROI Pooling、引入不平衡交叉熵损失函数Focal Loss,并采用消融试验对这些改进方法的效果进行分析。实验表明，与未改进的Faster-RCNN相比，改进后的模型mAP(mean average precision)提升了8.95百分点，达到了86.46%,能够较好地区分花期桃树与萌芽期桃树。对模型提升贡献最大的改进是ResNeXt-50-CBAM主干网络替换，mAP提升5.98百分点；ROI Align的使用减少了特征量化过程中的误差，mAP提升2.33百分点。与其他主流检测模型YOLOv3、 YOLOv5x和SSD相比，该研究提出的模型检测效果更优。该研究提出的无人机遥感结合改进Faster-RCNN算法能够较好地对桃树进行检测，可以满足桃园精准化管理需求。
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草鱼肠道微生物谱及其发育性变化
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了研究草鱼不同肠段微生物结构以及草鱼不同发育阶段肠道菌群的分布和变化。试验分2个部分进行，第一部分：试验选取24月龄生理状况良好的草鱼8尾，用MS-222对其深度麻醉，收集草鱼前肠、中肠、后肠段内容物进行DNA提取和16S rRNA基因测序；第二部分：从浙江省衢州市开化县一典型的开化清水鱼养殖基地购买不同月龄（1、7、15、24月龄）的健康草鱼各25尾，为了保证足够的样本量和最大限度降低个体差异，每5尾鱼的后肠段内容物混合为一个样本。用16S rRNA基因高通量测序方法，分析不同月龄草鱼肠道菌群的分布和变化。结果显示：1)Alpha多样性表明，草鱼的后肠段微生物群落多样性和丰富度显著高于前肠和中肠段（P＜0.05）;Beta多样性表明，后肠段的微生物群落与前肠段和中肠段存在显著差异（P＜0.05）。2)热图（Heatmap）显示，罗斯氏菌属（Ralstonia）是前肠段的主要优势菌属；砷氧化菌（Aliihoeflea）是中肠段的主要优势菌属；纤发鞘丝蓝细菌属（Leptolyngbya）和鲸杆菌属（Cetobacterium）是后肠段的主要优势菌属。3)从1到24月龄，草鱼后肠段微生物群落多样性和丰富度显著降低（P＜0.05）;Beta多样性表明，不同月龄的草鱼后肠段微生物结构存在显著差异（P＜0.05）。4)热图（Heatmap）显示，Rubellimicrobium和Synechococcus是1月龄后肠段的主要优势菌属；Aestuariimicrobium和Streptomyces是7月龄后肠段的主要优势菌属；Kineosporia和Prevotella是15月龄后肠段的主要优势菌属；Mesonia是24月龄后肠段的主要优势菌属。这表明不同肠段的草鱼微生物组成和结构存在差异，以及草鱼肠道微生物结构在生长的不同阶段呈发育性变化。
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浙江省9个晚粳稻代表品种的农艺性状分析
《浙江农业科学 》 2024
摘要：分析浙江省历年审定的9个晚粳稻代表性品种的农艺性状及农艺性状和产量之间的关系，可以了解各农艺性状对产量的影响，以及探索浙江省晚粳稻品种审定的规律。研究选取9个历年审定晚粳稻品种中表现较好，具有代表性的品种，采用催芽后撒播移栽到大田的方式，测量株高、茎粗、分蘖、剑叶长、剑叶宽、叶绿素含量等农艺性状。剑叶宽和茎粗是各农艺性状中对产量影响最大的2个因素，2010—2019年的3个品种茎粗和剑叶宽为3个时间段中最大的，由此可以看出，茎粗和剑叶宽是农艺性状中对晚粳稻品种产量影响最大的，且浙江省育种研究者也一直在提升晚粳稻的茎粗和剑叶宽。
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抗TYLCV口感型番茄新品种浙味2号的选育
《中国蔬菜 》 2024 北大核心
摘要：浙味2号是以自交系T18-238AA为母本，以T20-055A为父本，结合分子标记辅助筛选技术，利用常规杂交育种方法育成的中果型口感番茄一代杂种。早熟，无限生长类型，果实圆形，成熟果粉红色，光泽度好，耐裂，商品性优良，口感丰富，风味浓郁，单果质量120 g左右；高抗番茄黄化曲叶病毒病（TYLCV），抗番茄花叶病毒病（To MV）、枯萎病、灰叶斑病、根结线虫，可溶性固形物含量8.5%，番茄红素含量68.29 mg·kg-1,VC含量197 mg·kg-1，可溶性总糖含量58 g·kg-1，可滴定酸含量3.84 g·kg-1，糖酸比15.10，每667 m2产量4 000 kg左右，适宜浙江省及周边区域早春、秋延后保护地栽培。
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不同因素对咸鸭蛋"黑黄"产生的影响
《食品科学 》 2024 EI 北大核心 CSCD
摘要：为分析影响盐腌鸭蛋中“黑黄”产生的因素，本实验通过色度值和金属离子含量测定以及蛋白质组学分析，对比“黑黄”咸蛋和正常咸蛋不同部位的差异，初步确定与“黑黄”形成有关的因素，再通过单因素试验进一步研究这些因素对黑黄形成程度和速率的影响。结果表明，Fe、Cu含量越高，蛋黄色度值越小，“黑黄”越黑，推测卵黄高磷蛋白中Fe2+与S2-结合形成的硫化物是使蛋黄变黑的原因，半胱氨酸的降解脱硫是蛋黄产硫的主要原因。微生物浓度、温度、p H值是影响黑黄产生的主要因素，鸭蛋载菌量和腌制温度越高，黑黄率越高；p H 7.0～8.0范围内均可产生H2S，其中p H 7.5时产气速率最快。综上，可以推测“黑黄”是由蛋黄内硫元素与铁元素之间的变色反应造成，腌制过程中的温度、p H值以及鸭蛋本身的载菌量对“黑黄”现象均有较大影响。
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