大肠杆菌热不稳定肠毒素无毒突变体LTR72基因重组质粒的构建

葛艳; 尤永进; 徐泉兴; 陈波; 饶忠; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：用PCR方法扩增大肠杆菌LT基因 ,将LT基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pET LT进行酶切、核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LT的核苷酸序列与预期一致 ,且阅读框正确。并在影响LT毒性的关键氨基酸位点 ,用PCR方法引入点突变 (丙氨酸→精氨酸 ) ,成功构建了含有LTR72突变体基因的重组质粒pET LTR72。

关键词： 大肠杆菌 热不稳定肠毒素 突变体LTR72

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丹麦猪场母猪生产性能测定

刘东亮; 《上海畜牧兽医通讯 》 2003

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天然物质对切割蔬菜中常见微生物的抑制作用研究

宋义忠; 孔秋莲; 孟宪军; 陈留勇; 贺继东; 章丽丽; 《食品科技 》 2003 北大核心

摘要：研究了正离子水和姜黄、虎杖、艾叶、丁香提取物对切割蔬菜中常见微生物(大肠杆菌、荧光假单胞菌、啤酒酵母)的抑制作用,结果表明:正离子水对大肠杆菌、荧光假单胞菌、啤酒酵母无抑制作用,抑制率均为0;姜黄、虎杖、艾叶、丁香提取物对3种微生物均有一定的抑制作用。适宜温度培养7d后,姜黄、虎杖、艾叶、丁香提取物对大肠杆菌的抑制率从大到小依次为:姜黄(51.7%),艾叶(37.2%),虎杖(36.5%),丁香(30.4%);对荧光假单胞菌的抑制率从大到小依次为:丁香(100%),姜黄(55.8%),艾叶(55.8%),虎杖(46.7%);对啤酒酵母的抑制率从大到小依次为:丁香(100%),姜黄(35.3%),艾叶(35.3%),虎杖(33%)。

关键词： 天然物质 切割蔬菜 微生物 抑制作用

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解决“陈化粮”问题的对策研究

俞菊生; 王勇; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：和国内其它地方一样,上海市也因建立地方粮食储备及粮食收储企业的库存周转等原因产生了“陈化粮”,它给地方财政、银行、粮食企业所造成的压力,急待消除。本研究项目围绕“陈化粮”形成的原因及克服的办法开展调研,主要研究了“陈化粮”的成因、危害、处理难点和对策措施。为领导和粮食流通部门研究解决“陈化粮”问题提供了抉择参考。

关键词： 陈化粮 危害 流通体制 对策措施

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口蹄疫病毒非结构蛋白3B真核表达载体的构建及表达

尤永进; 葛艳; 陈波; 饶忠; 徐泉兴; 朱彩珠; 张强; 卢永干; 《中国预防兽医学报 》 2003 北大核心 CSCD

摘要：设计、合成FMDV非结构蛋白 3B基因的PCR引物 ,并在引物 5’端和 3’端分别加入含BamHI和HindⅢ限制性酶切位点序列。以FMDV基因组RNA为模板 ,利用RT_PCR技术扩增 3B基因 ,得到的基因片段经BamHI/HindⅢ双酶切后与转座载体pFASTBACHTa连接 ,转化宿主菌DH10BAC ,在含庆大霉素、卡那霉素、X_gal、IPTG的LB平板上 37℃培养 2 4h ,提取白色菌落 ,从中提取重组穿梭载体Bacmid 3B ,与脂质体共同转染昆虫细胞sf9,得到重组杆状病毒 ,病毒经传代扩增后感染High 5细胞 ,表达目的蛋白———FMDV非结构蛋白 3B。SDS_PAGE及WesternBlot结果显示 ,本研究成功构建了Bacmid_3B重组表达载体 ,并在昆虫细胞中表达了NSP_3B蛋白 ,该表达产物可与FMDV感染的猪、牛血清产生免疫反应。

关键词： 口蹄疫病毒 非结构蛋白 真核表达载体 克隆 表达

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碳酸氢钾浸种的安全浓度

赵定国; 王耀良; 《上海农业科技 》 2003

摘要：植物种子在发芽前需要吸足水分。在一定浓度范围内,有益物质对种子发芽有促进作用。这个浓度范围可作为安全使用指标,超出安全浓度范围,将影响种子发芽和生长,可作为浸种浓度禁用指标。碳酸氢钾是一种新型的钾源,其浸种安全浓度可作为安全使用的参考指标。本实验的目的是考察碳酸氢钾的浸种安全浓度。1 材料与方法1.1 供试材料 (1)碳酸氢钾(上海虹光化工厂),质量99.5％,K_2O 36.5％。(2)水(上海市农科院自

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淡剑夜蛾的生物学特性及防治研究

钱振官; 沈国辉; 夏雄勤; 罗勤辉; 杨烈; 袁永达; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：淡剑夜蛾[Sidemia depravata(Butler)]在上海地区年发生4-5代,世代重叠,以老熟幼虫和蛹在土中越冬;整个世代历期(第3代)33.3d(卵3.5d,幼虫18.9d,蛹5.7d,成虫5.2d);3龄前幼虫食量小,4龄后食量大增,特别是6龄期食量占总食量的91.3％。每年7、8、9三个月为幼虫危害高峰期,以高羊茅草坪受害最重。田间防治试验表明,10％除尽(Chlorfenapyr)SC、24％米满(Tebufenozide)SC、40％毒丝本(Chlorpyrifos)EC、5％卡死克(Flufenoxuron)EC和5％抑太保(Chlorfluazuron)EC1000-1500倍均有良好的防治效果。

关键词： 淡剑夜蛾 生物学特性 防治

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西瓜体细胞无性系变异初探

马国斌; 王鸣; 郑学勤; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：对西瓜体细胞无性系变异进行了初步研究,结果表明:西瓜未成熟子叶和幼苗子叶的再生植株中存在明显的变异,其中以四倍体变异最为普遍,再生植株叶片气孔大小和保卫细胞内叶绿体数目可以作为从再生植株中早期鉴别四倍体植株的可靠指标。此外再生植株中还出现无权、浅裂刻叶和板叶变异类型,且有嵌合变异现象。RAPD分析结果表明,西瓜再生植株的基因组DNA在供试的部分引物上表现出DNA多态性。

关键词： 西瓜 体细胞无性系变异

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信号转导抑制剂对囊素刺激杂交瘤细胞抗体分泌及其mRNA表达的影响

缪德年; 苏小运; 姚惠娟; 樊生超; 陈溥言; 《南京农业大学学报 》 2003 北大核心 CSCD

摘要：以杂交瘤细胞为模型 ,在培养液中加入不同的信号转导抑制剂和囊素 ,用间接ELISA法测定抗体分泌水平 ,用定量RT PCR法检测抗体mRNA的表达水平。结果表明 ,加入Gα 蛋白选择性抑制剂NF 0 2 3、蛋白激酶C抑制剂GF10 92 0 3X、磷脂酰肌醇 3激酶抑制剂heparin、Ca2 + /calmodulin依赖蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN 6 2、磷脂酶C抑制剂U 7312 2和蛋白激酶G抑制剂后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响明显 (P <0 0 1)。而加入蛋白激酶A抑制剂 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、酪氨酸蛋白激酶抑制剂 genistein和丝裂原活化的蛋白激酶抑制剂PD 980 5 9后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响不明显 (P >0 0 5 ) ,这 3种抑制剂对杂交瘤细胞抗体分泌速度的抑制率分别为 74 5 5 % ,91 13%和80 6 9%。加入 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、genistein和PD 980 5 9后 ,囊素处理组与对照组γ1mRNA的表达水平差异不显著 (P >0 0 5 ) ,说明这 3种抑制剂阻断了囊素刺激的杂交瘤细胞抗体mRNA的表达。以上结果表明 ,蛋白激酶A、酪氨酸蛋白激酶和丝裂原活化的蛋白激酶参与了囊素在杂交瘤细胞中的信号转导。

关键词： 杂交瘤细胞 信号转导抑制剂 囊素

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大麦幼穗和油菜花蕾提取液对大麦花药培养反应的影响

孙月芳; 陆瑞菊; 王亦菲; 周润梅; 黄剑华; 《麦类作物学报 》 2003 CSCD

摘要：以4个大麦品系为供试材料,比较了诱导培养基中添加不同发育时期和不同添加量的大麦幼穗提取液以及添加油菜花蕾提取液对大麦花药培养反应的影响,摸索促进诱导分化率提高的最佳方案。结果表明,诱导培养基中添加大麦幼穗提取液对花药反应率及绿苗分化率有明显的促进效果,单核期大麦幼穗提取液的效果优于二核期幼穗提取液的效果;添加油菜花蕾提取液对花培反应的影响优于单核期大麦幼穗提取液的影响。供试材料"SD"在添加单核期幼穗提取液的诱导培养基上的花药反应率和绿苗分化率分别是对照的1.6和1.7倍;材料"93T"的花药反应率和绿苗分化率分别是对照的1.7和3.0倍;诱导培养基中添加60g/L的油菜花蕾提取液的促进作用又优于添加60g/L的大麦幼穗提取液。

关键词： 大麦 花药培养 幼穗 油菜花蕾 提取液 花药反应率 绿苗分化率

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