科研产出
猪输血传播病毒2型ORF1基因的原核表达及条件优化
《华北农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了克隆猪输血传播病毒2型(TTV2)ORF1基因,构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达猪TTV2 ORF1蛋白,并对其表达条件进行优化。利用普通PCR从猪TTV2阳性样本中扩增出TTV2 ORF1基因,利用分子克隆的方法将猪TTV2 ORF1基因克隆到原核表达载体pcoldI上,构建表达载体pcold-ORF1,在大肠杆菌中诱导表达带有6个组氨酸标签的ORF1融合蛋白。并对影响重组蛋白表达的3个因素,即诱导时间、诱导温度和IPTG浓度进行优化,确定了pcold-ORF1重组蛋白表达的最佳表达条件。SDS-PAGE分析结果表明,重组蛋白在BL21中高效表达,以包涵体形式表达为主,分子质量约为39 kDa。蛋白表达量随诱导时间增加而有所增加,在15℃时表达量最高,而IPTG浓度对蛋白的表达量没有显著影响。Western Blotting结果表明,重组蛋白与猪TTV2阳性血清特异性反应,具有很好的免疫原性。成功获得TTV2-ORF1基因,构建了原核表达载体并获得高效表达,为TTV的ELISA检测方法的建立提供抗原。且重组蛋白在15℃条件下,加入0.2 mmol/L浓度的IPTG,诱导24 h,表达条件最佳。
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草木灰育苗基质对水稻秧苗素质的调控效应
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要：采用分级淋洗过滤从草木灰中提取钾盐的方法,可高效快速地将草木灰中可溶盐洗滤出来,对草木灰基质酸碱度进行调节。在草木灰基质配方中,将多效唑与保持剂结合使用,可大幅提高控制效应和时效,秧苗株高显著降低,叶龄增大,株型紧凑、茎杆粗壮、秧苗素质增强。草木灰水稻育苗基质原料来源丰富,有孔隙度大、持水性好、营养元素丰富、无菌无毒等优良的特性。试验结果:采用草木灰基质进行水稻机插秧育苗,虽然秧苗偏高且偏弱,但仍符合水稻机插秧的要求,出苗数、成苗率、产量没有受到影响,但可减轻劳动强度、节省生产成本。
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饲喂CYP6CM1和Coe1 RNAi双价转基因烟草对Q型烟粉虱抗药性的影响
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：细胞色素P450酶系和羧酸酯酶在昆虫代谢抗药性中起重要作用,通过RNAi沉默昆虫这两种酶的基因,研究其对Q型烟粉虱抗药性的影响。根据Q型烟粉虱的一个P450基因(CYP6CM1)和一个羧酸酯酶基因(Coe1)的特异区域构建双价RNAi载体,农杆菌介导转化烟草,PCR检测获得5个单独的T0代转基因株系。饲喂烟粉虱T1代转基因烟草,荧光定量PCR检测发现取食转基因烟草的烟粉虱体内CYP6CM1基因和Coe1基因表达量仅为取食非转基因烟草烟粉虱的18%~24%和17%~33%;通过琼脂保湿浸叶法和单株活体法研究取食T1代转基因烟草的烟粉虱对杀虫剂的效应,结果发现在接触1 g/L阿维·吡虫啉72 h后,2种方法中取食转基因烟草的烟粉虱死亡率分别比取食非转基因烟草的烟粉虱死亡率升高14.77%~16.46%和16.01%~18.51%;同样,接触稀释1 000倍的40%辛硫磷(体积比)72 h后,2种方法中烟粉虱死亡率升高22.94%~23.58%和17.4%~18.76%。以上结果表明,转CYP6CM1-Coe1 RNAi基因烟草可以显著降低烟粉虱CYP6CM1基因和Coe1基因的表达,降低烟粉虱对烟碱类杀虫剂阿维·吡虫啉和有机磷类杀虫剂辛硫磷的抗药性,显著提高杀虫剂的防治效果。
关键词： 烟粉虱 烟草 CYP6CM1 Coe1 RNAi 抗药性
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鼠曲草总黄酮改善糖尿病小鼠的抗氧化功能
《食品科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：目的:研究鼠曲草总黄酮对糖尿病小鼠抗氧化系统的调节作用。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素法构建小鼠糖尿病模型,观察连续3周灌胃不同剂量鼠曲草总黄酮对糖尿病小鼠血清和肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)和脂肪酸过氧化物的降解产物丙二醛(MDA)的影响。结果:与正常对照组相比,糖尿病模型组小鼠的抗氧化能力显著降低,MDA含量显著升高;与糖尿病模型组相比,鼠曲草总黄酮可有效增强糖尿病小鼠抗氧化酶的活力,同时降低MDA的含量。结论:鼠曲草总黄酮具有提高糖尿病小鼠抗氧化能力的作用。
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高效液相色谱-串联质谱法测定青菜中雌酮、雌二醇和雌三醇残留
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了监测蔬菜被粪源类固醇激素污染状况,本试验建立同时测定青菜中雌三醇、17β-雌二醇、17α-雌二醇和雌酮残留量的高效液相色谱-串联质谱方法。青菜经乙腈超声提取,C18固相萃取柱去除杂质,氮吹浓缩处理后,用梯度洗脱上机检测。结果显示:青菜中雌三醇、17β-雌二醇、17α-雌二醇和雌酮得到很好的分离,标准曲线在10ng/ml至1 000 ng/ml浓度范围内呈线性关系,相关系数≥0.999,各自的保留时间分别为2.6 min、8.2 min、8.9 min和9.9min;当添加浓度为50μg/kg、100μg/kg和500μg/kg时,雌三醇、17β-雌二醇、17α-雌二醇和雌酮在青菜中的平均回收率分别为75.15%~86.32%、73.82%~83.21%、72.01%~81.33%和81.08%~90.35%,相对标准偏差为1.03%~6.19%,该方法17β-雌二醇和17α-雌二醇的定量限均为10μg/kg,雌三醇的定量限为5μg/kg,雌酮的定量限为1μg/kg。表明该方法适用于蔬菜中雌三醇、17β-雌二醇、17α-雌二醇和雌酮残留的同步快速检测。
关键词： 雌三醇 17β-雌二醇 17α-雌二醇 雌酮 蔬菜
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公益性农业科学研究院(所)科研绩效评价的指标体系
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为满足公益性农业科学院(所)发展的创新性需要,基于科研绩效评价体系的设计原则与内涵诠释,利用层次分析法,构建了科研绩效评价三级指标体系。该评价体系兼顾了指标间定性与定量、过程与结果、静态与动态的关系,能够灵活反映各科研院(所)以绝对数量为特征的科技创新能力、科研保障水平、成果产出绩效、人才队伍建设以及成果转化成效。将该开放型指标体系与多种评价方法相结合,通过综合评价与分类排序能够突出评价对象之间的可比性,为决策部门提供可靠的数据支持与技术手段,进而提升科研管理的效率和质量。
关键词： 农业科学研究院(所) 科研绩效评估 层次分析法 指标体系
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优质高产小麦新品种一连麦6号
《麦类作物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：连麦6号是连云港市农业科学院以郑9023为母本、济南17为父本进行有性杂交,再以F1为母本、烟农19号为父本,进行有性杂交,后代选择采取系谱法选育而成的优质、丰产、稳产、广适小麦新品种.该品种于2012年11月30日经江苏省农作物品种审定委员会第五十二次会议审定通过,江苏省农业委员会2012年第18号公告公布,审定编号为苏审麦201208,审定名为连麦6号.
关键词： 小麦新品种 优质高产 农作物品种审定委员会 有性杂交 农业科学院 烟农19号 系谱法选育 农业委员会
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鸡IGFBP-3基因遗传多态性及其对京海黄鸡体重和产蛋量的遗传效应
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用PCR-RFLP技术和DNA测序技术对京海黄鸡、AA鸡、尤溪麻鸡、如皋草鸡4个鸡品种进行多态性检测,并将发现的SNP与京海黄鸡部分经济性状进行关联分析,研究4个鸡品种IGFBP-3基因第2外显子多态性及其对京海黄鸡生长和产蛋量的影响。结果表明:4个鸡品种中MspⅠ酶切位点基因型分布趋势一致,AA鸡多态信息含量最低(0.27)。χ2适合性检验表明,除京海黄鸡外其余3个鸡品种MspⅠ酶切位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。关联分析结果表明,京海黄鸡CT和TT基因型个体的300日龄体重显著大于CC基因型(P<0.05)。京海黄鸡TT基因型个体的300日龄和66周龄产蛋量分别为111.94和186.80个,显著高于CC基因型个体。由此初步推断MspⅠ位点对京海黄鸡生长和繁殖性能有一定的影响,TT型为增加产蛋量的优势基因型,生产上可作为种鸡选育的候选分子标记进行选种。
关键词： 鸡 胰岛素样生长因子结合蛋白-3 MspⅠ位点 多态性
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药隔期低温胁迫对小麦生理及产量的影响
《麦类作物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为揭示小麦春季耐寒性的生理生化机制,以不同春季耐寒性的8个小麦品种为材料,采用田间盆栽和药隔期低温胁迫的方法,探讨了药隔期低温胁迫后小麦的生理及产量变化。结果表明,药隔期低温胁迫后,小麦单株产量明显下降,平均降幅为68.4%,其中淮麦20、皖麦38、西农979和矮丰3号表现出较好的春季耐寒性,单株产量降幅均小于65%,而陕麦139、郑366、小偃22和郑麦9023单株产量降幅较大(>70%),耐寒性相对较差;小麦叶片丙二醛含量、SOD活性、POD活性、脯氨酸含量和可溶性蛋白含量均不同程度升高,其中淮麦20、皖麦38、西农979和矮丰3号丙二醛含量的增幅明显小于平均增幅,SOD活性、POD活性、脯氨酸含量和可溶性蛋白含量的增幅显著大于平均增幅,表现出较低的细胞膜受损程度和较强的耐寒性。在生理指标中,SOD活性、POD活性、脯氨酸含量和可溶性蛋白含量与产量的关联度高,因此可作为春季低温下小麦耐寒性鉴定的重要指标。
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