改良Chelex-100法和CTAB法用于转基因抗草甘膦大豆检测效果的比较

王永; 兰青阔; 张莉; 赵新; 朱珠; 《大豆科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：以转基因抗草甘膦大豆为研究材料,分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取基因组DNA,以提取DNA的浓度和纯度,同时以PCR扩增大豆的内源基因(lectin)及外源特异性序列(CaMV35S,nos,Cp4-epsps)的效果对两种方法进行比较和评价。结果表明:虽然改良Chelex-100法DNA提取纯度不高,但是提取效率与常规CTAB法相当,而且改良Chelex-100法能够快速在1 h之内从大豆中提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰。因此,改良Chelex-100法可以替代CTAB法提取DNA用于转基因检测,该方法具有经济、简便、快速的特点。

关键词： Chelex-100法 CTAB法 DNA 转基因检测

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草坪无土栽培基质的研究进展及发展趋势

武良; 边秀举; 徐秋明; 谷佳林; 《中国农学通报 》 2008 北大核心

摘要：该文介绍了国内外草坪无土栽培基质的研究现状;从草坪无土栽培基质的选择原则、基质理化生物学性质及基质研究方法3方面,阐述了我国草坪无土栽培基质的研究情况;并从无土栽培基质的结构、生产工艺、基质栽培中根际营养及管理技术方面阐述了我国草坪无土栽培基质的研究方向及未来发展趋势。

关键词： 草坪 无土栽培 基质

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黄瓜品系WIS2757对黄瓜枯萎病生理小种4和黑星病的抗性遗传与连锁分析

毛爱军; 张峰; 张丽蓉; 王永健; 《中国农业科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：【目的】黄瓜枯萎病和黑星病是危害中国黄瓜生产的两种主要病害,明确黄瓜品系WIS2757对黄瓜枯萎病生理小种4和黑星病的抗性基因遗传与连锁关系,为黄瓜抗病育种提供重要依据。【方法】以抗枯萎病生理小种4和黑星病的黄瓜材料WIS2757和感病材料津研2号为亲本,获得98个F3代株系,分别对双亲、F1和F3代株系进行苗期抗枯萎病和黑星病接种鉴定,并根据鉴定结果对枯萎病与黑星病的抗性遗传及两个抗病基因的连锁关系进行分析。【结果】亲本WIS2757抗枯萎病生理小种4和黑星病,津研2号高感两种病害。F1群体抗两种病害。根据F3株系对两种病害的抗病表现推断F2对应株的抗病基因型并进行卡方测验,结果表明,F2群体对枯萎病和黑星病的抗性分离均符合1﹕2﹕1的理论比例,而两对等位抗病基因的遗传不符合9﹕3﹕3﹕1的理论分离比例。连锁分析表明,黄瓜抗枯萎病生理小种4和黑星病的两对等位基因位于同一连锁群,两者的遗传距离为17.5cM。【结论】WIS2757对枯萎病和黑星病的抗性均由单显性基因控制,将抗枯萎病生理小种4的基因暂定名为Foc-4。Foc-4和抗黑星病基因Ccu间存在遗传连锁关系。

关键词： 黄瓜 枯萎病生理小种4 黑星病 遗传 连锁

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主要瓜类蔬菜霜霉病的发生与防治(二)

李明远; 李兴红; 严红; 张涛涛; 周莹; 《中国蔬菜 》 2008 北大核心

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基于改良SDS法的杏基因组DNA提取

杨丽; 张俊环; 孙浩元; 王玉柱; 《中国农学通报 》 2008 北大核心

摘要：为探讨改良SDS法是否适用于杏基因组DNA提取及提取液适宜浓度,以6个品种杏叶片为试材提取DNA,提取液设0.5%、1%、2%三个浓度梯度。检测结果表明,改良SDS法完全适用于杏叶片基因组DNA的提取,3种浓度的提取液均可得到质量较高的DNA,且0.5%为改良SDS法提取杏叶片基因组DNA的适宜提取液浓度。

关键词： 杏 DNA提取 SDS法

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遗传算法参数分析及其在根系预报中的应用

罗长寿; 周丽英; 《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：遗传算法优化神经网络模型时,参数选取直接关系到模型优化的效率。在给出一种遗传算法的基础上对相关参数进行了研究分析,并将其应用到冬小麦根系分布的预报中。

关键词： 遗传算法 神经网络 参数 根系

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拟南芥保卫细胞微管骨架的重排参与NO诱导的气孔关闭

张永梅; 吴忠义; 王学臣; 于荣; 《科学通报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：以GFP:α-tubulin-6转基因拟南芥为材料,利用药理学实验及激光扫描共聚焦显微技术研究了微管骨架在NO诱导气孔关闭过程中的动态变化及其可能的调控机制.结果表明:(ⅰ)微管特异性抑制剂长春花碱和NO供体SNP均能诱导气孔关闭,并且长春花碱能加强SNP对气孔开度的抑制作用,而微管稳定剂紫杉醇则部分抑制了NO对气孔关闭的诱导作用;(ⅱ)开放气孔保卫细胞中,大量周质微管从保卫细胞的背壁向腹壁呈辐射状整齐规则地排布,并且几乎所有微管纤维都与保卫细胞腹壁成90°垂直;(ⅲ)同一条件下保卫细胞经外源NO供体SNP光下处理30min,保卫细胞内整齐的辐射状微管逐步散乱,微管部分解聚,纤维数量减少,部分交错扭曲,排布方式也由与腹壁垂直转变为倾斜,说明微管骨架可能参与了NO诱导的气孔关闭;(ⅳ)进一步研究发现,胞内Ca2+螯合剂BAPTA-AM可以大幅度削弱由NO诱导的气孔关闭作用,而对长春花碱诱导的气孔关闭无明显影响;开放气孔的保卫细胞经SNP处理后,再施加BAPTA-AM,散乱的微管骨架排布随处理时间延长逐步趋于正常,到30min时基本恢复成辐射状,与对照相比无明显区别,表明在NO对微管排布的调节机制中有Ca2+参与.综合以上结果推测,在NO调控的气孔运动中,NO可能是通过调节胞内Ca2+来促进微管骨架系统的重排,进而影响气孔的开关运动.

关键词： NO 微管骨架 气孔运动 Ca~(2+)

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植物内源乙烯组织定位测定方法研究

凌喆; 郑淑芳; 吴萍; 李武; 《河南农业科学 》 2008 北大核心

摘要：高氯酸和氯化汞混合液(简称反应液)对乙烯具有极强的吸收能力,遇盐酸后释放出乙烯。利用这一原理确立了一种植物内源乙烯组织定位测定方法,即将1 g白菜样品浸入反应液中20 h后,研磨,离心,取上清液1 mL于Waters液谱样品瓶中,加2 mol/L盐酸1 mL后密封,30℃保温5 h,取气样1 mL测定乙烯,通过乙烯释放量确定组织中内源乙烯含量。同时还对该方法的一些影响因素进行了研究。

关键词： 内源乙烯 定位测定 高氯酸

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马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVY~N)外壳蛋白基因的克隆、表达及其间接ELISA方法的建立

高方方; 吴忠义; 黄丛林; 孙惠生; 曾申明; 《中国农学通报 》 2008 北大核心

摘要：【目的】制备马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)多克隆抗体,建立间接ELISA法用于检测PVYN病毒。【方法】依据PVYN的CP基因序列设计引物,利用RT-PCR方法获得CP基因并连接构建到原核表达载体,进行原核表达,以纯化的重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得PVYN的抗血清并纯化。【结果】测序结果与其他已知序列比较,PVYNCP基因的核苷酸同源性95%,推断氨基酸的同源性达98%。以纯化蛋白为抗原进行免疫,成功获得了PVYN外壳蛋白抗血清,纯化后的IgG采用间接ELISA法检测抗原,抗体效价达1:500,使用该抗体稀释度检测感染植株,结果呈阳性。【研究结论】通过分子生物学途径获得了PVYN的多克隆抗体,建立的间接ELISA方法可以用于PVYN的病毒检测。

关键词： 马铃薯Y病毒脉坏死株系 原核表达 多克隆抗体 ELISA

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植物乳杆菌微胶囊化的研究

吕利军; 季海峰; 张董燕; 《中国畜牧兽医 》 2008 北大核心

摘要：为了保证足够的乳酸菌在动物肠道中发挥益生作用,试验以海藻酸钠、脱脂奶粉、乳糖为壁材,采用挤压包埋和冷冻干燥结合的方法对植物乳杆菌进行微胶囊化研究。通过正交试验找到最佳的微胶囊化条件及载体的添加量。结果表明,海藻酸钠浓度为3%,脱脂奶粉浓度为4%,乳糖浓度为6%,CaCl2浓度为2%时,制备的微胶囊中活菌数最高,达到7.67×1010CFU/g,且产品具有耐酸性。

关键词： 植物乳杆菌 微胶囊 挤压法 冷冻干燥

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