虹鳟fabp10基因真核表达载体构建、生物信息学及组织表达分析

任广明; 林玉杰; 徐黎明; 赵景壮; 邵轶智; 卢彤岩; 《水产学杂志 》 2023 北大核心

摘要：为探究虹鳟（Oncorhynchus mykiss）脂肪酸结合蛋白10（fatty acid binding protein 10,fabp10）基因序列信息及其所编码蛋白的结构和功能等，本试验根据Gen Bank数据库公布的河鳟（Salmo trutta）fabp10基因的CDS序列信息设计引物，通过RT-PCR获得fabp10基因片段，将目的片段与p MD-18-T载体连接转化DH5α感受态细胞，构建p MD-18-T-fabp10克隆载体，双酶切回收基因片段，构建pc DNA3.1-fabp10真核表达载体，分析fabp10基因在虹鳟不同组织中的表达，经双酶切、测序鉴定构建成功。将表达载体转染至EPC细胞，分别于24h、36 h、48 h后收集细胞进行荧光定量PCR检测。结果显示：虹鳟fabp10基因CDS区与Gen Bank数据库中Salmo trutta fabp10基因CDS区同源性高达100%。生物信息学分析发现，fabp10基因编码区全长378 bp，编码126个氨基酸。Fabp10蛋白主要分布在细胞质中，存在23个潜在磷酸化位点。转染pc DNA3.1-fabp10可显著提高EPC细胞中fabp10 m RNA的表达（P＜0.05）。RT-q PCR结果显示：fabp10基因在肝脏中表达丰度最高，随之为肾脏、肌肉、肠、脾脏、心脏，在脑中表达量最低。本试验成功扩增出fabp10基因CDS区并构建了真核表达载体，成功预测分析了其结构和功能，为研究虹鳟机体脂质代谢过程提供了基础。

关键词： 虹鳟 fabp10 真核表达载体 脂质代谢

 全文链接 请求原文

中华鲟精巢细胞系的建立和鉴定

叶欢; 王艺舟; 杜浩; 岳华梅; 阮瑞; 罗江; 李创举; 《水生生物学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为了开展中华鲟（Acipenser sinensis）种质资源保存及其精原干细胞体外培养的研究,采用蛋白酶消化法,对中华鲟精巢组织细胞进行原代培养,建立了中华鲟精巢细胞系（Acipenser sinensis testicular cell line, AST）,经352d传代培养,已稳定传至80代。中华鲟精巢细胞系形态主要呈类纤维状,培养基为DMEM,培养温度为25℃,最适血清浓度为15%。正常传代的AST细胞冻存、复苏后,经台盼蓝染色,约（81.36±1.13）%的细胞具有活性,复苏后细胞仍生长旺盛。染色体核型分析结果显示,第30代中华鲟精巢细胞系染色体数目分布在142—310,众数为264。通过RT-PCR检测发现,在P0和P1细胞中, Sertoli细胞特异表达基因（amh和gsdf）、Leydig细胞特异表达基因（cyp17a1）和生殖细胞特异表达基因（dazl、dnd和vasa）都有表达,且表达量与精巢中的相似;在P15、P30和P60细胞中,只有amh和vasa基因有微弱的表达,说明细胞系传代到了后期,只含有极少量的Sertoli细胞和生殖细胞。通过脂质体转染法将pEGFP-N3质粒转入AST细胞中,可表达增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein, EGFP）。AST细胞系的建立为中华鲟种质资源的保存、精原干细胞的体外增殖与分化、基因功能等研究提供了重要的实验材料。

关键词： 精巢 AST细胞系 传代培养 核型分析 基因表达特征 中华鲟

 全文链接 请求原文

北方地区拟穴青蟹池塘生态养殖技术

张传涛; 黄经献; 张世奎; 孙祥山; 曹金凤; 宁晨洁; 《科学养鱼 》 2023 北大核心

摘要：拟穴青蟹简称青蟹，是我国重要的海水养殖蟹类之一，具有较高的经济价值。青蟹具有味道鲜美、耐干露、易运输等特点，深受广大消费者喜爱。目前，青蟹养殖主要集中在我国南方地区，北方地区养殖较少。在北方地区，青蟹池塘养殖存在适宜生长时间较短和养殖模式单一的问题，阻碍了青蟹养殖健康发展。针对这两个方面问题，2020-2021年，中国水产科学研究院下营增殖试验站海水蟹类规模化繁育技术创新团队开展了“北方地区拟穴青蟹池塘生态养殖技术研究”，旨在探索一种适合北方地区的青蟹池塘生态养殖模式。

 全文链接 请求原文

梭鲈ghrh基因序列特征及其在大小个体间差异表达分析

周佳; 孙志鹏; 吉宇丹; 吕伟华; 曹顶臣; 鲁翠云; 刘天奇; 郑先虎; 《淡水渔业 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为了探究生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,ghrh)基因对梭鲈(Sander lucioperca)生长调控的作用,本研究利用RACE技术克隆获得了ghrh cDNA基因全长序列,并利用实时荧光定量PCR技术对其组织表达模式和大小个体间表达模式进行了分析.结果显示:ghrh基因cDNA全长为1100 bp,包含494 bp的5'非编码区、180 bp的3'非编码区和编码141 个氨基酸的开放阅读框.氨基酸多重比对发现,梭鲈ghrh与河鲈(Per-ca fluviatilis)、黄金鲈(P.flavescens)的ghrh氨基酸序列相似性分别为 95.04%和 94.33%,ghrh基因在鱼类和哺乳动物中都存在一个GLUCA保守结构域(65~91 aa).ghrh基因在梭鲈各组织均有表达,脑组织中相对表达量最高,垂体次之,与其他组织相比差异显著.ghrh基因表达量与梭鲈体质量呈正相关,脑、肝和肌肉组织中gh-rh基因表达量均为体质量极大组高于极小组,其中,脑组织中差异显著.因此,ghrh基因可以作为梭鲈生长候选基因用于分子选择育种.

关键词： 梭鲈(Sander lucioperca) ghrh 序列特征 生长 表达差异

 全文链接 请求原文

养殖水环境及水产品中典型全氟和多氟烷基物质(PFAS)赋存特征及其毒性作用机理研究进展

王纯; 李冠怡; 孙迎雪; 袁子茜; 李睿瑄; 王梦妍; 程波; 《大连海洋大学学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：水产品是全球最为活跃的贸易产品之一，水产品的质量对经济发展至关重要。研究表明，膳食中鱼类的摄入是PFAS（per-and polyfluoroalkyl substances）经由水产品对人类的主要暴露途径。养殖水环境及水产品中的PFAS对水产品质量及人类健康构成不可忽视的直接威胁。本文综述了典型PFAS在养殖水体及水产养殖生物中的赋存状态、生物富集效应及生理毒性特征，探讨了其对养殖生物所产生的可能性作用机理，基于健康养殖与绿色安全水产品供应需求，梳理了功能性益生菌缓解PFAS对养殖鱼类的毒性效应及其内在作用机理，并针对目前研究中存在的问题，提出未来重点研究方向，包括水产养殖过程中PFAS污染物产生风险的客观评价、功能性菌株缓解PFAS污染物对养殖生物的毒性机理的研究及水产养殖过程绿色有效的PFAS污染物防控技术的研发等，以期为水产养殖过程中PFAS污染物的科学防控提供有益参考。

关键词： 水产养殖 全氟和多氟烷基物质（PFAS） 益生菌

 全文链接 请求原文

日本蓝鳍金枪鱼养殖业发展战略分析及对我国的启示

张溢卓; 杨子江; 于书洲; 《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：[目的]借鉴日本蓝鳍金枪鱼养殖业发展经验,为推动我国金枪鱼养殖业发展,探索强化我国高经济价值水产品供给能力及相关鼓励政策制定提供参考.[方法]梳理国际蓝鳍金枪鱼供需情况,分析日本主导蓝鳍金枪鱼市场的内因和具体路径,运用战略研究方法厘清日本科技助力产业发展的系列举措.[结果]日本是世界主要金枪鱼养殖基地之一,也是最早开发蓝鳍金枪鱼养殖技术的国家,截至2022年日本有88个经营主体、187个养殖场和1379个养殖网箱,年产量达21460 t.日本通过产出制度、科技创新、种业提升和出口中国等战略,主导蓝鳍金枪鱼养殖产业全球供需对接,提高了日本蓝鳍金枪鱼国际话语权,推进了沿岸渔村振兴."十四五"时期,我国将发展蓝鳍金枪鱼产业定位为战略性新兴产业,系统打造金枪鱼全产业链新业态.中国水产科学研究院积极拓展深远海养殖空间,在黄鳍金枪鱼养殖方面积累了一定经验,正在全力推进蓝鳍金枪鱼养殖业发展,近几年南海金枪鱼养殖技术取得突破进展.[建议]我国应在海南、广东和浙江等现有国家级海洋牧场示范区利用现有科技和蓝鳍金枪鱼生息水域等优势;应进一步加大国际科技创新合作与交流,推动中日共同开发蓝鳍金枪鱼消费市场.建立健全与国际渔业管理规则相适应的管理制度,完善蓝鳍金枪鱼管理法规和政策措施,出台系列配套政策保驾护航.

关键词： 蓝鳍金枪鱼 养殖业 战略分析 启示 日本

 全文链接 请求原文

池塘循环水养殖对混养草鱼食用品质的影响

温利; 李温蓉; 陶玲; 安玥琦; 刘茹; 李谷; 熊善柏; 《水生生物学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探究养殖模式对草鱼（Ctenopharyngodon idellus）鱼肉品质的影响,实验对两种养殖模式下（传统池塘养殖和池塘循环水养殖）草鱼的食用品质进行了差异比较。结果表明,循环水养殖草鱼肌肉白度和弹性高于传统池塘养殖的草鱼,且其不饱和脂肪酸和必需氨基酸含量均显著高于传统池塘养殖;其中, n-3和n-6系列不饱和脂肪酸含量显著高于传统池塘养殖草鱼,是其1.2倍,使得草鱼的肌肉品质和营养品质更佳。此外,循环水养殖可降低草鱼中带有土腥味和青草味的己醛、庚醛和1-辛烯-3-醇等物质的含量,且鲜味核苷酸（IMP）含量高于传统池塘养殖草鱼,使得草鱼的风味更鲜美、浓厚。研究表明,循环水养殖草鱼的肌肉品质和营养特性均优于传统池塘养殖。

关键词： 循环水养殖 肌肉品质 营养品质 食用品质 风味 混养草鱼

 全文链接 请求原文

基于CFD的不同通风结构下渔船机舱通风系统性能分析

黄温赟; 于得水; 黄文超; 朱陈程; 赵新颖; 《渔业现代化 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：由于一些渔船机舱高度受限，通风管路中不可避免有结构加强筋，加强筋型式、高度，通风栅的数量、位置等均会对风管内流场产生影响，从而影响通风效果的好坏。针对某型远洋渔船机舱通风系统，基于计算流体力学（CFD）数值方法对机舱左右舷风管进行模拟仿真，研究了气流场与加强筋和通风栅的相互关系，考虑了气流在障碍或发散流动中的运动特性。结果显示：普通加强筋、增设导流板隔开加强筋及增设隔板隔开加强筋3种不同型式对风管流场影响各不相同，内表面平滑的风管流态最流畅；风管入口和风管端口处的通风栅会较大程度上降低其他通风栅的风速；风管内结构高度的增加会引起流态的紊乱、降低风速、加大各通风栅风速的不均衡。研究结果可为渔船机舱通风系统设计优化提供参考。

关键词： 机舱通风 加强筋 计算流体力学 速度分布 流态 渔船

 全文链接 请求原文

沱江中游鱼类资源现状及多样性

邹远超; 唐成; 谢伟; 严杰; 李荣云; 叶志祥; 吴金明; 黄先全; 段辛斌; 危起伟; 《水产学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探究“十年禁渔”前沱江中游江段鱼类资源和物种多样性，于2017—2020年对该江段鱼类资源进行了8次调查，并对鱼类种类组成、生态类型、群落相似度、种群优势度、生物多样性以及群落结构稳定性等特征进行分析。结果显示，本次调查共采集鱼类87种，隶属于5目14科52属。其中，长江上游特有鱼类18种，外来物种6种，分别占总种类数的20.69%和6.90%。鱼类群落以底层、缓流型、产沉性卵、杂食性鱼类为主。相对重要性指数（IRI）显示，蛇、鲤等中小型鱼类为优势种。Shannon-Wiener指数、Simpson指数、Margalef指数、Pielou指数变化范围分别为2.700～3.742、0.873～0.968、5.374～11.323、0.737～0.887，表明沱江中游鱼类群落分布均匀。等级聚类分析（Cluster）和非度量多维尺度分析（NMDS）显示，在一定的相似性水平上，沱江中游江段鱼类的群落类型基本可分为3组，莲花山、麻柳坝工业园与铁路沟可以聚为一组，万古庙、五里店水电站、资州大桥、银山镇、二水厂与西林渡口聚为一组，沱桥独立成组。数量/生物量比较曲线分析结果显示，西林渡口和沱桥江段鱼类群落结构稳定性相对较高，其余江段鱼类群落结构均受到中度干扰。研究表明，与历史资料相比，沱江中游鱼类群落发生了显著变化，经济鱼类占比减少，鱼类个体呈现小型化和低龄化。本研究补充了沱江中游鱼类资源现状的基础数据，以期为该江段鱼类资源管理与“十年禁渔”生态评估提供科学依据。

关键词： 鱼类群落结构 多样性 生态类型 沱江中游

 全文链接 请求原文

乌龟选育世代遗传多样性及遗传结构的微卫星分析

徐昊旸; 杨雪莹; 倪未; 刘芳; 陈海港; 朱新平; 刘晓莉; 《大连海洋大学学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为研究乌龟（Mauremys reevesii）优良品种的选育效果，利用多态性微卫星（simplesequence repeat, SSR）标记分析了乌龟5个选育世代（基础群体F0代、F1～F4代）的遗传多样性和遗传结构。结果表明：在筛选的12个微卫星位点中，共检测到等位基因数为103个，平均等位基因数（N_a）为8.58,期望杂合度（H_e）为0.173～0.919,平均值为0.581,观测杂合度（H_o）为0.054～0.862,平均值为0.479,多态信息含量（PIC）为0.165～0.914,平均值为0.541;12个微卫星位点中，有11个位点属于中度或高度多态位点，表明所选择的微卫星位点可作为乌龟选育世代遗传多样性及遗传结构分析的良好评价工具；乌龟5个选育世代的观测杂合度（H_o）分别为0.491、0.494、0.497、0.458和0.453;遗传分化系数F_st及AMOVA分析显示，乌龟5个选育世代群体之间的F_st值为0.004～0.012,小于0.05。研究表明，乌龟选育世代的遗传多样性有所下降，遗传分化程度较小，乌龟选育群体还有进一步选育的潜力。

关键词： 乌龟 微卫星 遗传多样性 选育

 全文链接 请求原文