绿盲蝽AlEcR-A的单克隆抗体制备及在外源20E诱导下的应答

谭永安; 肖留斌; 郝德君; 赵静; 孙洋; 柏立新; 《中国农业科学 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：【目的】获得绿盲蝽(Apolygus lucorum)蜕皮激素受体(A1EcR-A)原核表达的重组蛋白,制备单克隆抗体,分析绿盲蝽AlEcR-A在外源蜕皮激素(20E)诱导下mRNA及蛋白表达量的变化趋势,为进一步研究EcR的功能奠定前期基础,同时也为构建20E信号传导的网络图谱提供理论依据。【方法】在前期获得绿盲蝽AlEcR-A的基础上,将含有其基因的T载体经NdeⅠ和XbaⅠ双酶切,构建AlEcR-A原核表达载体(pCzn1-AlEcR-A),将该表达载体经IPTG诱导表达和蛋白Ni-IDA亲和纯化,以获得AlEcR-A基因功能区的纯化蛋白。进一步用其进行免疫反应,取小鼠的脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合,采用间接ELISA及Western blot筛选验证是否为目的抗体,通过抗体纯化,Western blot检测该抗体能否特异性结合AlEcR-A重组蛋白及绿盲蝽总蛋白,从而制备得到AlEcR-A蛋白单克隆抗体。最后利用RT-PCR及Western blot方法,进行20E微注射绿盲蝽2龄若虫,分析8 d内AlEcR-A的mRNA及蛋白含量的变化,明晰20E诱导下AlEcR-A的应答反应。【结果】经NdeⅠ和XbaⅠ双酶切后原核表达载体pCzn1-AlEcR-A在大肠杆菌Arctic express中能高效表达一个约为55 kD的蛋白,且该重组蛋白经IPTG诱导后主要以包涵体的形式存在;经Ni-IDA亲和层析后,pCzn1-AlEcR-A重组蛋白的包涵体纯度仅在55 kD附近有一条明显的特异性条带,说明靶蛋白已得到纯化。进一步通过小鼠免疫、细胞融合及腹水制备,获得了1株能稳定分泌抗AlEcR-A蛋白单克隆抗体的细胞株,命名为8H7;Western blot分析表明,该细胞株不仅能与绿盲蝽总蛋白结合,还可特异性与AlEcR-A重组蛋白反应,且条带大小一致,说明制备的AlEcR-A单克隆抗体准确、有效;RT-PCR及Western blot结果表明,与注射蒸馏水相比,20E微注射处理后的绿盲蝽AlEcR-A mRNA表达量及蛋白表达量均显著升高,且随着处理时间的延长,其增值幅度也逐渐增高。【结论】获得了一株高特异性的能稳定分泌AlEcR-A单克隆抗体的细胞株,20E有诱导AlEcR-A mRNA及蛋白表达的作用。

关键词： 绿盲蝽 蜕皮激素受体 20-羟基蜕皮酮 单克隆抗体 表达量

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播期对内蒙古西部荒漠区棉花产量、品质及养分吸收利用的影响

张国伟; 张祥; 陈德华; 周治国; 《应用生态学报 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：于2014—2015年在内蒙古自治区阿拉善盟阿拉善左旗内蒙古棉花综合实验站设置大田试验,以‘中棉所50’为材料,采用"一膜三管六行"机采棉配套栽培技术种植,研究播期(4月20日、4月30日和5月10日)对棉花产量、品质及养分吸收的影响.结果表明:随着播期推迟,棉花生育时期推迟,生育期缩短,铃期日均温降低,收获密度增加;播期显著影响棉株干物质累积、养分吸收与分配,以及产量和品质形成,4月30日播种条件下,棉株干物质和养分在经济器官中的分配比例、养分总积累量及养分的皮棉生产效率较高,籽棉和皮棉产量最高,达6505.9和2660.9 kg·hm~(-2),且纤维品质较优;4月20日播期下,收获密度、生物量和养分累积量最低,虽然生物量和养分经济系数最高,但最终籽棉和皮棉产量仍较4月30日播期降低10.9%~14.0%和11.1%~14.2%;5月10日播期,虽然可以避开种子萌发期低温冷害,但棉铃发育期日均温偏低,尽管生物量和养分累积量最高,但是生物量和养分经济系数、养分的皮棉生产效率最低,最终籽棉和皮棉产量较4月30日播期降低32.5%~34.7%和35.9%~36.2%,且纤维品质最差.综合分析,4月30日左右为内蒙古西部荒漠旱区棉花种植的最佳播期.

关键词： 播期 棉花 内蒙古西部荒漠区 产量 品质 养分吸收利用

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植保素及其在增强作物抗性中的作用

陈东菊; 安敏敏; 李丽兰; 方继朝; 刘永锋; 罗玉明; 杨立明; 《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：植物自身产生的次生代谢产物可以有效地抵制生物与非生物逆境胁迫,这类物质主要有植保素、木质素、胼胝质等。其中,植保素具有侵染可诱导性和体外抗菌活性。研究植保素的抗病机制对于提高作物的抗病性及开发环保型生物源农药有重要的作用,本综述将主要介绍植保素的种类、应用、合成及其增强作物抗病性机理。

关键词： 植保素 抗性 次生代谢产物 作物

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不同条件育秧提高水稻秧苗抗逆性的研究

于建光; 吴一凡; 贺笑; 顾克军; 汪吉东; 张永春; 常志州; 《土壤 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：稻麦轮作系统中,麦秸还田腐解产生的有毒有害物质可对下茬水稻幼苗产生不利影响,有效减缓或避免其负面影响对于水稻生产尤为重要,而筛选能够提高水稻秧苗抗性的育秧技术不失为重要途径。通过采用5种不同育秧条件对水稻秧苗进行抗性锻炼,以期提高水稻秧苗对麦秸还田条件的抗逆性和适应性,并在移栽后采取相同的栽培措施(氮素和水肥管理)对其进行评估。试验结果表明,干旱及低营养条件下育秧均降低了水稻株高、生物量以及叶绿素含量,且增加了水稻植株丙二醛含量和脯氨酸含量,使水稻的生长发育受到抑制;而施用秸秆、浇施秸秆腐解液以及酚酸混合液进行育秧的处理均增加了水稻株高、地上部鲜重、叶绿素含量、总根长、根表面积、根体积、根尖数、根分枝数和平均根直径,且均降低了水稻植株丙二醛含量和脯氨酸含量,提高了水稻秧苗对麦秸腐解产生负面影响的抗逆性和适应性。通过在水稻育秧期添加适量麦秸、麦秸腐解液或酚酸混合液均可有效提高水稻秧苗对麦秸还田条件的适应性。

关键词： 水稻 育秧 抗逆性

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禾谷丝核菌基因组SSR标记的开发及评价

李伟; 张兴; 孙海燕; 邓渊钰; 张爱香; 马东方; 陈怀谷; 《植物病理学报 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：群体遗传学研究对于了解病原菌的流行、变异及进化规律具有重要意义。但是到目前为止,对小麦纹枯病菌禾谷丝核菌群体遗传结构的了解并不深入,缺乏有效的SSR标记是主要原因。本研究根据禾谷丝核菌全基因组序列进行了微卫星位点搜索并设计SSR引物,通过电泳筛选和测序验证,最终筛选出12个多态性较好且稳定可靠的SSR标记。利用这些标记对收集自我国安徽、江苏、河南三省的23个禾谷丝核菌菌株进行了多态性分析,结果发现禾谷丝核菌基因组中长片段微卫星位点较少。12对引物扩增出的等位基因数平均为6.1个,期望杂合度平均为0.651,观测杂合度平均为0.508,表明这些标记具有较高的多态性,能够满足禾谷丝核菌群体遗传学研究需要。本研究为进一步进行禾谷丝核菌的多样性、群体遗传结构分析及进化学研究提供了有效工具。

关键词： 小麦纹枯病 禾谷丝核菌 群体遗传学 微卫星

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羊肉屠宰加工场主要污染菌的分布及其对熟制羊肉的致腐能力

王筱梦; 孙芝兰; 诸永志; 卞欢; 吴海虹; 刘芳; 江芸; 王道营; 徐为民; 《食品科学 》 2017 EI 北大核心 CSCD

摘要：对江苏省苏州市具有代表性的某羊屠宰场的屠宰环境及熟制品加工车间进行微生物检测,重点对熟制品加工过程进行检测,包括煮制车间的接触面、各加工车间的空气以及清洗前后的生肉与煮制后的熟肉,以确定熟制品加工过程中污染菌群的分布。结果表明,熟制品加工过程中各加工车间空气细菌数均低于10 CFU/皿,表明空气质量合格。而煮制车间的接触面污染较严重致使交叉污染造成熟制羊肉的菌落总数达到3.23(lg(CFU/cm~2))。结合形态观察和16S rDNA菌种鉴定,所污染的菌主要为芽孢杆菌、腐生葡萄球菌、变形杆菌、金黄杆菌和微杆菌等。随后选取3个污染菌芽孢杆菌(Bacillus sp.M1、Bacillus sp.M9)和腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus M7),通过对熟制羊肉的感官评分、pH值、菌落总数、挥发性盐基氮值和腐败代谢产物产量因子的测定评定它们对熟制羊肉的致腐能力。结果显示,Bacillus sp.M1的致腐能力最强且明显高于S.saprophyticus M7和Bacillus sp.M9,为有效预防和控制熟制羊肉的微生物污染提供依据。

关键词： 羊肉屠宰场 腐败菌 芽孢杆菌 腐生葡萄球菌 致腐能力

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稻秸还田与播种方式影响小麦出苗及产量的大田试验研究（英文）

张斯梅; 顾克军; 樊平声; 许博; 张传辉; 顾东祥; 张恒敢; 于建光; 杨四军; 《Agricultural Science & Technology 》 2017

摘要：为了研究水稻秸秆还田与播种方式对小麦田间出苗及产量的影响,通过田间大区试验,分析了稻秸机械全量还田与不同播种方式对小麦出苗率、出苗均匀性及产量性状的影响。结果显示,稻秸不还田条件下,机械条播的出苗率显著低于机械匀播和人工撒播,机械条播、机械匀播和人工撒播的出苗率分别为51.84%、90.89%和88.87%;人工撒播的出苗均匀性差于机械条播和机械匀播,3种播种方式的出苗变异系数分别为0.49、0.26和0.23。稻秸机械全量还田条件下,不同播种方式处理的出苗率和出苗均匀性都有所降低,其中机械条播的下降幅度较大,出苗率降低了36.54%。小麦出苗率和出苗均匀性通过影响小麦穗数、穗粒数、千粒重而影响籽粒产量,无论稻秸是否还田,机械匀播的产量均高于其余两种播种方式,稻秸不还田和全量还田条件下的产量分别为6 091.34 kg/hm~2和6 476.20 kg/hm~2。因此,在稻茬小麦生产中,推荐采用机械匀播的播种方式,不仅能提高稻秸还田下小麦的田间出苗率,而且能保持较好的出苗均匀性,有利于获得较高的籽粒产量。

关键词： 秸秆还田 播种方式 稻茬小麦 出苗 产量

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氮肥运筹对甘薯干物质累积及氮素吸收的影响

董月; 王会方; 汪吉东; 宁运旺; 张永春; 《江苏师范大学学报(自然科学版) 》 2017

摘要：为探明不同生育期施用氮肥对甘薯干物质累积及氮素吸收的影响,使用限根栽培的方法研究了7个氮肥运筹处理下,甘薯干物质累积量及根、茎柄和叶片的氮素累积量特征.结果表明:氮肥一次性基施不利于甘薯氮素累积,并且向地下部转移比例少,为10.9%;在甘薯的分枝结薯期(移栽后30d)和膨大期(60d)追施氮肥有利于甘薯氮素累积,并且向地下部转移比例较高,其中0-5-5处理氮素向地下部转移达到19.9%;氮素后移促进了甘薯地下部产量的形成,后移处理比一次性基施处理单株产量平均提高2.78%~21.3%.氮肥全部基施不利于甘薯前期干物质向地下部转移,影响最终产量.本研究中,甘薯基施和30d或60d追施氮肥各半(处理5-5-0和5-0-5)均能获得较高产量,可以作为长江中下游薯区氮肥运筹推荐.

关键词： 甘薯 控根器 氮素运筹 氮素吸收 干物质累积

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芋头食味品质评价方法的建立与应用

殷剑美; 张培通; 王立; 韩晓勇; 郭文琦; 李春宏; 《长江蔬菜 》 2017

摘要：芋头食味品质是评定芋头品种好坏的一个重要指标。根据优质芋头口感要求,参照稻米、玉米食味品质感官评价方法,建立了一套适合于江苏省优质芋头食味评价体系。该评价方法包括芋头硬度、糯性、沙性、黏液量、口感和香味6类指标。利用该方法对江苏省2014年和2015年芋头新品种鉴定试验参试品种进行了食味品质评价,测定结果与品质口感特点一致性高,为新品种的合理应用提供依据。

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梨早期落叶抗性的评价研究

李晓刚; 杨青松; 王中华; 蔺经; 盛宝龙; 李慧; 王宏; 常有宏; 《上海农业科技 》 2017

摘要：为研究不同品系梨早期落叶的抗性,对4个栽培梨系统98个品种(系)和4个杂交组合392个单株早期落叶情况进行了评价。结果表明,供试的西洋梨、白梨、砂梨及种间杂交种病情指数分别为54.63、37.59、30.91、52.07,不同栽培梨系统及其品种间对早期落叶抗性存在差异。杂交亲本抗性水平对后代抗性表现产生一定影响,双亲之一抗性弱,其杂种后代抗性就偏弱;双亲抗性强,更易获得综合抗性强的后代。

关键词： 梨 落叶病 抗性 种质资源

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