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南海鸢乌贼肌原纤维蛋白的热稳定性研究

食品与发酵工业 2015 北大核心 CSCD

摘要:研究了南海鸢乌贼胴体肌肉的基本特性及其蛋白质组成,并重点探索了温度对其肌原纤维蛋白的影响。结果显示:南海鸢乌贼为适合加工的优质水产品,高蛋白,低脂肪,肌原纤维蛋白所占比例达59.63%,气味温和,无怪酸味。在4℃下,肌球蛋白重链(MHC)、副肌球蛋白(PM)、肌动球蛋白(Actin)48 h内无明显变化;25℃下,MHC温浴12 h后开始发生明显的降解,24 h后完全降解;40℃时,降解严重,温浴0.5 h后,MHC就发生明显的降解,1.5 h后基本降解完全,在添加1 mmol EDTA的条件下,降解被显著抑制,放置4 h后,仍能看到非常清晰的MHC条带;50、60℃温度下,降解较为缓慢,温浴3~4 h,仍能看见清晰的MHC蛋白条带,然而,PM、Actin等却快速降解。

关键词: 鸢乌贼 胴体肌肉 肌原纤维蛋白 SDS-PAGE电泳

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微孢子虫感染三疣梭子蟹的肌组织病理及其免疫相关酶活性

海洋渔业 2015 北大核心 CSCD

摘要:利用纯化的三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)"牙膏病"病原微孢子虫对三疣梭子蟹进行人工感染实验,观察感染蟹肌肉组织的临床变化及其超微病理,并测定感染后肌肉和肝胰腺组织酸性磷酸酶(ACP)和超氧化物歧化酶(SOD)不同时间点的活性。结果发现,微孢子虫肌肉注射感染三疣梭子蟹后,蟹的肌纤维透明度随着感染时间的延长逐渐下降并向白浊化转变。超微病理显示,注射感染176 h后,肌细胞内存在大量微孢子虫,感染蟹肌细胞出现核膜肿胀和线粒体双层膜破裂等病变,严重者肌纤维发生断裂、溶解,电镜下可见大量高电子密度的溶解灶。免疫相关酶活分析显示,微孢子虫感染后,三疣梭子蟹肌肉和肝胰腺组织ACP和SOD活性均呈现两个显著上升过程(P<0.05);肝胰腺组织ACP活性始终高于肌肉组织,而两种组织的SOD活性恰好相反;感染蟹肌肉组织内两种酶活性几乎始终大于正常对照组。酶活的变化可能与蟹微孢子虫的肌肉组织亲嗜性及其增殖速度较慢等特点有关。

关键词: 三疣梭子蟹 微孢子虫 感染实验 病理 酶活

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高效液相色谱-串联质谱法同时测定草鱼中6种阳离子染料残留量

分析科学学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:建立了同时测定草鱼中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫、隐色结晶紫、亚甲基蓝和新亚甲基蓝6种阳离子染料残留量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。样品经乙腈和缓冲溶液提取,用二氯甲烷萃取及中性氧化铝固相萃取柱净化。选择反应监测(SRM)正离子模式检测,内标法定量。孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫、隐色结晶紫、新亚甲基蓝和亚甲基蓝的定量限均为0.2μg/kg。添加0.2~10μg/kg水平时加标回收率达到75.0%~98.5%,相对标准偏差为3.2%~9.1%。

关键词: 高效液相色谱-串联质谱 草鱼 阳离子染料

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野生黑斑狗鱼血液学常值的研究

东北农业大学学报 2015 北大核心 CSCD

摘要:对野生黑斑狗鱼血液生理、生化和流变学指标进行比较研究。结果表明,红细胞平均体积、甘油三酯、碱性磷酸酶和阴离子间隙等指标呈显著性差异(P<0.05),血小板分布宽度和尿素氮差异极显著(P<0.01),其余生理生化指标差异均不显著(P>0.05),雌性个体全血粘度值均明显高于雄性个体,且雌雄个体全血粘度均随切变率增加呈典型的对数模式降低,方程分别为Y=-2.711ln(x)+19.966,R2=0.9672;Y=-0.755ln(x)+7.4088,R2=0.9524。这些血液生理学数据表明,未成熟前黑斑狗鱼雌雄个体血液主要指标值已存在差异,雌性个体体内脂肪含量要高于雄性,雄性黑斑狗鱼耐低氧能力要高于雌性个体,所得检测指标除谷丙转氨酶、谷草转氨酶/谷丙转氨酶、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、总胆汁酸、低密度脂蛋白和肌酸激酶个体变异系数较大外,其余血液指标均可作为野生健康黑斑狗鱼基础血液指标参数,为黑斑狗鱼在自然资源监测和人工养殖鱼病防治提供重要理论参考。

关键词: 黑斑狗鱼 血液 生理指标 生化指标

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团头鲂g型溶菌酶基因全长cDNA的克隆与表达分析

南方水产科学 2015 北大核心 CSCD

摘要:为了解g型溶菌酶基因序列特征及其在团头鲂(Megahbrama amblycephala)氨氮胁迫过程中的作用,应用末端快速扩增(rapid amplication of c DNA ends,RACE)技术克隆了团头鲂的g型溶菌酶基因c DNA序列,得到全长719 bp的c DNA序列,包括71 bp的5'末端非翻译区(untranslated regions,UTR)、90 bp的3'UTR和558 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF);氨基酸相似度比对显示,不同鱼类g型溶菌酶的氨基酸序列之间具有较高的保守性,系统进化树分析表明,该基因与草鱼(Ctenopharyngodon idella)g型溶菌酶亲缘关系较近。荧光定量PCR结果显示g型溶菌酶基因在团头鲂各组织中均有表达,肠道中表达量最高,同时在胁迫和恢复过程中该基因在肝和脑中的表达规律相似,均在胁迫时表达量上调,恢复后表达量相对下降,而g型溶菌酶在鳃中的表达有所不同,可推测g型溶菌酶基因参与了氨氮应激分子过程。

关键词: 团头鲂 溶菌酶 基因克隆 氨氮胁迫 组织表达

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2012年6月份桑沟湾褐潮期间浮游植物和浮游纤毛虫群落结构特征

海洋科学 2015 北大核心 CSCD

摘要:报道了2012年6月份桑沟湾藻华期间的浮游植物和纤毛虫群落结构,并对环境因子进行了初步分析。研究发现,藻华原因种为一种直径为2μm左右的小球型藻类,细胞形态和粒径均与近年来在中国秦皇岛近岸海域频繁引发水华的超微型浮游植物相似。藻华发生期间,调查区海水中藻华原因物种细胞丰度高达109个/L,高于2011年同期调查区该物种藻华期间的细胞丰度(108个/L)。除藻华原因种外,其他浮游植物共鉴定38种,隶属3门23属,以硅藻和甲藻为主,优势种为:具槽帕拉藻(Paralia sulcata)、裸甲藻(Gymnodinium sp.)、圆筛藻(Coscinodiscus sp.)、长菱形藻(Nitzschia longissima)和太平洋海链藻(Thalassiosira pacifica)等。纤毛虫共鉴定3属5种,以砂壳纤毛虫为主,优势种为百乐拟铃虫(Tintinnopsis beroidea)。细胞丰度分布方面,藻华原因种从湾内向湾外逐渐降低;硅藻细胞丰度在位于湾口处的6号站位最高,并向湾内和湾外递减;甲藻和纤毛虫细胞丰度均从湾内向湾外降低,这分别由优势种裸甲藻和百乐拟铃虫的分布决定。分析发现,调查区藻华原因物种细胞丰度与海水温度和层化系数呈良好的正相关性,与盐度呈负相关性;与裸甲藻和百乐拟铃虫细胞丰度呈良好的正相关性,这两种异养微型浮游生物对藻华原因种的摄食能力值得探索。与历史资料的对比发现,调查区藻华期间浮游植物群落多样性下降,群落稳定性降低。

关键词: 褐潮 浮游植物 纤毛虫 群落结构 夏季 桑沟湾

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10种麻痹性贝类毒素的固相萃取及液相色谱-串联质谱测定法

海洋渔业 2015 北大核心 CSCD

摘要:建立了10种麻痹性贝类毒素(PSP)的高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品用0.5%甲酸溶液加热提取,提取液经乙酸乙酯、三氯甲烷和HLB固相萃取柱净化,乙腈去蛋白后,在正离子模式下以电喷雾串联质谱仪进行测定,TSK改性凝胶柱为色谱分离柱,5 mmol·L-1甲酸铵(含0.5%甲酸)-乙腈(含0.5%甲酸)为流动相,采用基质匹配的标准曲线进行定量,并以虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)为测试对象,对方法的有效性进行了评价。评价结果为:在50~600μg·kg-1添加水平下,10种麻痹性贝类毒素平均回收率为72.3%~91.1%(批内),相对标准偏差为3.9%~9.5%(批内)。STX、dc STX和neo STX定量限(S/N>10)为100μg·kg-1,GTX1~GTX5、dc GTX2和dc GTX3定量限为50.0μg·kg-1。结果表明,该方法快速、准确,适合于贝类产品中麻痹性贝类毒素的测定。

关键词: 麻痹性贝类毒素 液相色谱-串联质谱 贝类 检测 虾夷扇贝 菲律宾蛤仔 太平洋牡蛎

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南极磷虾商业化开发的战略性思考

极地研究 2015 北大核心 CSCD

摘要:南极磷虾的区域特色、资源保有量优势和广泛的应用价值,使它成为重要的战略资源。南极磷虾商业化开发战略是海洋战略的重要组成部分,其资源特色为战略制定与实施提供了支撑,符合战略性新兴产业发展要求。基于中国海洋开发的战略环境,结合南极磷虾资源特色,评估其战略能力,确立发展目标为形成并完善南极磷虾资源开发的产业体系,确立发展战略重点为跟踪南极磷虾资源养护管理措施变化和开发利用政策、中国南极磷虾产业发展模式及风险评估、中国发展南极磷虾产业关键技术突破与产业化机制、中国发展南极磷虾产业的政策措施与保障机制研究。

关键词: 南极磷虾 商业化开发 战略资源 战略能力 南极磷虾产业

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黄颡鱼生长抑素基因的克隆及表达谱分析

西北农林科技大学学报(自然科学版) 2015 北大核心 CSCD

摘要:【目的】克隆黄颡鱼生长抑素(Somatostatin,SS)基因cDNA全长序列,分析其在黄颡鱼胚胎发育、胚后发育阶段及成鱼各个组织中的表达规律。【方法】以黄颡鱼脑组织为材料,根据瓦氏黄颡鱼和斑点叉尾鮰SS基因保守区设计1对引物用于扩增SS基因中间保守区序列,再根据中间保守区序列设计2对引物,分别用于扩增5′端和3′端序列,将扩增得到的中间保守区序列、5′端和3′端序列拼接后得到黄颡鱼SS基因的cDNA全长序列,并对其进行生物信息学分析。用NCBI的Protein Blast对黄颡鱼与其他物种SS基因编码的氨基酸序列同源性进行比较,并构建系统发育树。用实时荧光定量RT-PCR检测SS基因在胚胎发育时期和胚后发育阶段(1~20d)的表达特征。采用半定量RT-PCR检测SS基因在黄颡鱼脑、心脏、肌肉、胃、肝脏、肾脏、鳃、脾脏、性腺等组织中的表达特征。【结果】黄颡鱼SS基因cDNA全长694bp,其中5′端非翻译区139bp,3′端非翻译区211bp,开放阅读框为345bp,编码114个氨基酸。黄颡鱼与瓦氏黄颡鱼SS基因编码氨基酸同源性最高,为98%。系统发育树结果显示,黄颡鱼与同属于鲇形目的瓦氏黄颡鱼和斑点叉尾鮰聚为一支。SS基因在黄颡鱼受精卵时期就有表达,并持续至胚胎孵化出膜,且在心跳期和出膜期的表达量显著高于受精卵时期(P<0.05);在出膜后的1~20d,SS基因在黄颡鱼中稳定表达;在成鱼的各个组织中,SS基因只在脑组织中特异性表达。【结论】初步探明了SS基因在黄颡鱼胚胎发育、胚后发育阶段及成鱼各组织中的表达规律,推测其可能在黄颡鱼胚胎发育中发挥着重要的生理功能。

关键词: 黄颡鱼 生长抑素 基因克隆 表达特征

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酵母水解物对大菱鲆幼鱼非特异性免疫及抗应激能力的影响

饲料工业 2015 北大核心

摘要:试验旨在研究酵母水解物对大菱鲆幼鱼非特异性免疫、肝脏抗氧化功能及抗应激能力的影响。以鱼粉、豆粕、玉米蛋白粉、谷朊粉和酵母粉为复合蛋白源,分别制作含酵母水解物0(YH-0)、1%(YH-1)、2%(YH-2)和3%(YH-3)的等氮、等能的4种人工饲料,在室内流水养殖系统中进行为期8周的养殖试验。结果显示,试验组大菱鲆幼鱼血清溶菌酶(LZM),肝脏酸性磷酸酶(ACP)、一氧化氮合酶(NOS)及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于对照组(P<0.05);碱性磷酸酶(AKP)YH-2组活性及YH-3组活性显著高于对照组及YH-1组(P<0.05);YH-1组的总抗氧化能力(T-AOC)显著高于YH-0组(P<0.05);YH-1、YH-2组肝脏丙二醛(MDA)含量低于对照组,且过氧化物酶(POD)活性高于对照组(P>0.05);各试验组大菱鲆幼鱼的耐低盐时间显著高于对照组(P<0.05)。综合分析表明,酵母水解物可提高大菱鲆幼鱼机体免疫能力、肝脏抗氧化性能和抗应激能力,且在本试验条件下,以添加2%的酵母水解物的效果最佳。

关键词: 酵母水解物 大菱鲆 非特异性免疫 抗氧化能力 抗应激

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