科研产出
寡肽转运蛋白lmo2193基因缺失对单增李斯特菌环境适应性的影响
《现代畜牧兽医 》 2020
摘要：研究通过比较三株单增李斯特菌在不同环境下的适应性,探究lmo2193基因对单增李斯特菌环境应激的影响。测定不同温度、EtOH浓度、pH、NaCl浓度条件下的生长趋势,绘制生长曲线。结果显示,缺失株的生长速度明显较野毒株、回补株生长缓慢,缺失株对42℃和4.5%无水乙醇(EtOH)胁迫条件下的耐受性明显低于野毒株、回补株。表明LM90SB2菌株lmo2193基因的缺失会降低其对环境的适应性,为进一步探究寡肽转运蛋白在单增李斯特菌中的作用奠定了基础。
关键词： 单增李斯特菌 lmo2193基因 生化鉴定 环境适应性
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基于密码子优化策略的牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9)的原核表达及纯化
《江苏农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了构建pET30a-bPAG9重组表达载体,并在BL21(DE3)感受态细胞中转染高效表达牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9),通过生物信息学技术对bPAG9基因进行密码子优化,人工合成bPAG9全基因序列,经双酶切法将bPAG9基因插入到表达载体pET30a中。将构建的重组质粒pET30a-bPAG9转染至BL21(DE3)感受态细胞中进行原核表达,经过超声波裂解和亲和层析方法获得重组蛋白bPAG9。用SDS-PAGE和Western Blot方法检测重组蛋白bPAG9的表达效果。结果显示,PCR扩增得到1 128 bp的优化bPAG9基因片段,构建的重组质粒pET30a-bPAG9经双酶切获得约5 244 bp和1 125 bp的2条片段,与预期值相符;对重组载体测序,测序结果与优化后的基因碱基序列完全一致,编码的氨基酸序列未发生突变;SDS-PAGE和Western Blot鉴定结果显示,获得相对分子质量约为4.0×10~4的bPAG9重组蛋白,通过亲和层析纯化后,重组蛋白bPAG9纯度到达90%以上。
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骨桥蛋白（OPN）在绵羊胎盘形成和发育中的作用
《中国草食动物科学 》 2020
摘要：骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)是一种促进子宫与孕体相互识别的主要候选因子,在胚胎着床和胎盘形成发育过程中发挥着重要作用。大量的研究表明,子宫内膜腺上皮分泌OPN经过磷酸化酶修饰后分布到子宫腔,并与子宫腔上皮和滋养外胚层上的整合素受体或CD44受体连接,启动一系列信号通道促进胚胎的粘附着床。胚胎着床后,母胎界面的OPN刺激胎盘血管的生成以及调节母胎之间Ca2+流量等,以促进胎盘形成和发育。近年来,OPN对胎盘发育的作用越来越受到关注。基于此,文章对OPN的结构和功能,及其在促进子宫与孕体相互识别、胚胎着床、胎盘发育和形成中的作用进行了综述,以供同行参考。
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基于表型和SSR标记筛选海岛棉优异种质资源
《棉花学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：【目的】筛选海岛棉某一性状特别突出的优异种质资源,加快其新品种的选育进程。【方法】本研究以178份海岛棉核心种质资源为试验材料,通过调查和测定铃重、单株铃数、衣分、纤维长度、纤维比强度和马克隆值6个性状的表型数据,开展变异度和遗传多样性分析。每个性状表型值按10%最优取样策略,初步筛选海岛棉优异种质资源;同时利用120对simple sequence repeat (SSR)引物对178份海岛棉核心种质进行多态性分析,并开展群体结构分析及基因型聚类分析,依据聚类结果对初选海岛棉优异种质进一步筛选,鉴定出最终的海岛棉优异种质资源。【结果】海岛棉核心种质资源中上述6个性状的变异度和遗传多样性较丰富。120对SSR引物在178份海岛棉种质中共检测出262个等位变异位点,平均值为2.18;多态信息含量(Polymorphism information content, PIC)为0.067 8～0.630 0,平均为0.296 0,属于中度多态。聚类分析将178份海岛棉核心种质划分为2大类群。基于表型值和SSR标记的聚类分析结果,最终筛选出23份单一性状特别突出的海岛棉优异种质资源。【结论】基于表型和SSR标记能较好地分析与评价海岛棉种质资源、发掘海岛棉优异种质资源,为海岛棉遗传育种提供材料基础,同时也为作物优异种质资源的筛选与鉴定提供重要参考和依据。
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flaA基因的缺失对绵羊脑炎单核细胞增生李斯特菌的细胞黏附、侵袭能力及生物被膜形成能力影响的研究
《中国动物传染病学报 》 2020 北大核心
摘要：为了探究flaA基因对单核细胞增生李斯特菌LM90SB_2黏附和侵袭MBMEC、RAW264.7能力、生物被膜(BF)形成能力的影响,本研究分别进行了flaA基因缺失株LM90SB_2-ΔflaA与野毒株LM90SB2对细胞黏附和侵袭试验,定性定量分析了他们生物被膜形成能力以及小鼠不同脏器中载菌量差异。结果显示:LM90SB_2-ΔflaA对MBMEC的黏附菌数较野毒株LM90SB_2低,且两者差异性显著(P<0.05),两者对MBMEC的侵袭数差异性不显著(P>0.05),而LM90SB_2-ΔflaA对RAW264.7的黏附和侵袭数均显著低于野毒株LM90SB_2(P<0.05);LM90SB_2-ΔflaA与LM90SB_2的BF形成规律基本相同,但缺失株形成的BF总量显著低于野毒株的(P<0.05),且与野毒株相比,缺失株的BF结构中核酸与多糖的分布均松散、稀疏、散点状分布。本研究结果表明,flaA基因对LM90SB_2的细胞黏附和侵袭能力均有影响,在其BF形成过程中发挥着重要的作用。
关键词： 单核细胞增生李斯特菌 flaA基因 细胞黏附 细胞侵袭 生物被膜
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基于高光谱数据的滴灌甜菜叶片全氮含量估算
《作物学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：本文旨在明确甜菜叶片全氮含量与高光谱地面植被遥感的定量关系,建立干旱区甜菜叶片全氮含量精确估测模型,及时监测甜菜生长状况。本研究选取新疆滴灌甜菜(Beta356)为材料,利用ASD野外高光谱仪在甜菜叶丛快速生长期、块根膨大期与糖分积累期采集各处理反射光谱,并同时测定全氮含量,分析原始光谱反射率及一阶微分光谱反射率与全氮含量的相关性,并进一步建立光谱特征参数与敏感波段植被指数全氮含量估算模型。结果表明,光谱特征参数Dr762幂函数下估算模型具有较好估算甜菜叶片全氮含量的能力,其决定系数R2=0.747,验证相对误差RE(%)为21.635,验证均方根误差RMSE为4.914;通过植被指数与叶片全氮含量建立多种函数估测模型,其中差值植被指数Dr762–Dr496下一元线性函数具有较好估算甜菜叶片全氮含量的能力,其决定系数R2=0.794,验证相对误差RE(%)为23.008,验证均方根误差为5.372。
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塔额垦区放牧饲养夏洛莱牛肉质营养成分分析
《草食家畜 》 2020
摘要：试验旨在分析塔额垦区放牧饲养夏洛莱牛肉氨基酸组成含量及营养成分,为夏洛莱牛肉品质分析及改良当地土牛提供科学依据。试验选取体重500±45 kg的夏洛莱肉牛(公母各半),采集里脊、眼肌、肩肉、上脑、胸肉5个部位,分别测定其营养物质及氨基酸组成含量,并参照FAO/WHO模式进行氨基酸评分。结果显示,样品中水分含量公牛和母牛分别为73.10%和64.14%,符合国家标准,粗脂肪含量公牛最低为0.14%。检测出17种氨基酸,非必须氨基酸中天冬氨酸含量最高,公牛和母牛分别为30.74%和29.02%,其次为谷氨酸,分别为11.38%和10.73%,提示夏洛莱牛肉鲜味有降低的趋势。必须氨基酸中赖氨酸含量最高,公牛和母牛分别为9.23%和8.71%。母牛里脊中总氨基酸含量最低(P<0.05),为89.10%。氨基酸评分显示公牛EAA/TAA及EAA/NEAA分别为33.32%和50.00%,母牛EAA/TAA及EAA/NEAA分别为33.60%和50.62%,与FAO/WHO模式推荐量(EAA/TAA 40%,EAA/NEAA 60%)有一定差距,但可满足成人每日氨基酸需求量(EAA/TAA 27.3%,EAA/NEAA 37.5%)。综上,夏洛莱牛肉营养较好,品质中上,考虑其出肉量多的特点可以针对性的育肥或杂交改良。
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食源性单核细胞增生李斯特菌lmoF2365＿0037基因克隆及序列分析
《现代畜牧兽医 》 2020
摘要：为了对食源性单核细胞增生李斯特菌LM5567的lmoF2365_0037基因进行克隆和序列分析。试验利用PCR方法对lmoF2365_0037基因进行扩增,连接pMD19-T载体进行克隆,筛选阳性菌株进行测序比对分析。结果显示:扩增获得的lmoF2365_0037基因序列长为548 bp,克隆得到lmoF2365_0037基因的阳性转化子;生物信息学分析表明:lmoF2365_0037蛋白属于跨膜蛋白,无信号肽序列;二级结构中无规则卷曲和延伸链比例较大,分别是46.31%和32.89%;序列比对结果表明,LM5567株lmoF2365_0037基因核苷酸序列与02-6680株(4b,奶酪,加拿大)、10-0811株(1/2b,螃蟹,加拿大)、10-0809株(4b,粪便,加拿大)、81-0558株(4b,脑脊髓液、加拿大)、02-1103株、02-1792(4b,奶酪,加拿大)、81-0861株(4b,卷心菜,加拿大)相似性均为100%;LM5567 lmoF2365_0037基因编码的氨基酸序列与上述菌株相似性均为93.3%。本试验成功克隆了lmoF2365_0037基因,为进一步探究lmoF2365_0037基因的功能奠定了基础。
关键词： 食源性单核细胞增生李斯特菌 lmoF2365_0037基因 PCR 生物信息学分析
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利用无人机可见光遥感影像提取棉花苗情信息
《农业工程学报 》 2020 EI 北大核心 CSCD
摘要：为提高棉花苗情信息获取的时效性和精确性,该文提出了基于可见光遥感影像的棉花苗情提取方法。首先,利用自主搭建的低空无人机平台获取棉花3～4叶期高分辨率遥感影像,结合颜色特征分析和Otsu自适应阈值法实现棉花目标的识别和分割。同时,采用网格法去除杂草干扰后,提取棉花的形态特征构建基于SVM的棉株计数模型。最后,基于该模型提取棉花出苗率、冠层覆盖度及棉花长势均匀性信息,并绘制棉花出苗率、冠层覆盖度的空间分布图。结果显示,模型的测试准确率为97.17%。将模型应用于整幅影像,计算的棉花出苗率为64.89%,与真实值误差仅为0.89%。同时基于冠层覆盖度、变异系数分析了棉花长势均匀情况。该文提出的方法实现了大面积棉田苗情的快速监测,研究成果可为因苗管理的精细农业提供技术支持。
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