科研产出
一个水稻卷叶基因rl_(t)的精细定位
《中国水稻科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：叶片适度卷曲是水稻理想株型塑造的重要组成部分。卷叶基因rl(t)在杂合状态下可使叶片适度卷曲,增加水稻产量,具有较高的育种利用价值。以卷叶珍汕97B[携带rl(t)基因]与平展叶品种奇妙香(轮回亲本)杂交并回交的BC5F3和BC5F4为定位群体,在前人关于rl(t)的定位区间内设计了15对多态性分子标记,将rl(t)精细定位于第2染色体上分子标记P95053和P113.6之间的11kb范围内,遗传间距约0.04cM。区间内只包含1个释义基因,预测编码GL2类同源异型结构域,属于同源异型盒家族中的HD-GL2类(也称为HD-ZIPⅣ)转录因子。卷叶基因rl(t)的精细定位为克隆目标基因和研究其调控机理奠定了基础。
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水稻骨干亲本BG90-2在扬稻系列培育中的作用及对白叶枯病抗性
《中国水稻科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：总结了水稻骨干亲本BG90-2在培育扬稻系列品种中的作用,并用来自菲律宾和中国的18个白叶枯病菌菌株对BG90-2和扬稻系列品种以及用扬稻6号为恢复系育成的部分杂交籼稻组合进行白叶枯病人工接种。结果表明,BG90-2在扬稻系列品种育成过程中起到关键性作用;骨干亲本BG90-2对白叶枯病的抗性在扬稻系列常规品种和用扬稻6号作为恢复系所配制的杂交籼稻组合中都获得传承;同时筛选出强致病性菌株JSA06-8、JSA06-39、JSA06-41和YNA37-8等。
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一个水稻损伤诱导型叶色突变体的发现及其特性研究
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：在育种田间,从迟熟中粳稻品种"淮稻7号"中发现一个天然叶色突变体,该突变体的表型存在绿-白-绿的叶色变化。通过对该突变体的形态观察,以及不同播期、不同移栽期突变体叶色转变特性的研究,发现其叶色转变只在移栽等因素引起的机械损伤信号胁迫下产生,且突变体的叶色表型变化在水稻的整个生育期都可发生。该突变体的叶色表型、叶色转变特性以及诱发突变的机制均未见报道,确认是一种全新的水稻叶色突变体,即损伤诱导型叶色突变体(Injury-induced leaf-color-mutant,iil)。
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恢复系R6547系谱的籼粳分化与杂种优势关系的分析
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：利用程氏指数(Cheng’s index,CHI)法、SSR(simple sequence repeats)分子标记法分析杂交稻丰优香占的恢复系R6547系谱材料的籼粳分化。结果表明:亲本的程氏指数变化范围为6~18,偏粳系数(partial japonica coefficient,PJC)为0.13~0.67,2种方法对亲本的籼粳分类结果并不完全一致。相关分析表明,CHI、PJC与亲本及杂种F1的每穗总粒数、实粒数、产量呈正相关,说明亲本粳稻成分的适度增加是实现杂种F1高产的重要因素。在染色体片段水平上,染色体4、9上的粳稻成分有利于产量优势的形成,同一产量构成因素受多条染色体的粳稻遗传因子影响,同一染色体上的粳稻遗传因子作用于多个产量构成因素。因此,R6547中籼、粳遗传因子比例协调以及物理位置的合理分布是实现杂种优势的关键。
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水稻多酚氧化酶基因功能标记的开发与应用
《中国水稻科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：水稻酚反应是水稻分类的重要依据。控制水稻酚反应的多酚氧化酶基因(PPO)已经克隆,根据其等位基因的DNA序列差异设计了InDel功能标记FMppo-18和FMppo-29。利用这两个标记对45份材料进行了标记基因型分析和酚反应鉴定。结果发现3份普通野生稻为非缺失带型;8份籼稻材料中6份为非缺失带型,而Dular为缺失29 bp带型,龙晴为缺失18bp带型,表明Dular和龙晴分别携带29 bp和18 bp缺失的PPO等位基因;11份粳稻材料中9份携带18 bp缺失的PPO等位基因,2份携带29 bp缺失的PPO等位基因。对23份杂草稻鉴定的结果表明,7份早年发现的杂草稻,即3份江苏省连云港穞稻和4份安徽省怀远、来安、全椒、肥东的塘稻为非缺失带型;而16份近年来发现的杂草稻中14份不缺失,2份表现为18 bp缺失的PPO等位基因,与江苏省大面积推广的栽培粳稻品种携带相同的PPO基因。酚反应结果表明带29 bp或18bp缺失的PPO等位基因的材料酚反应呈阴性,而不缺失的材料酚反应呈阳性。标记基因型与酚反应表现型完全对应。表明这两个功能标记可用于水稻种质资源鉴定、进化研究以及多酚氧化酶基因的分子标记辅助选择育种。
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棉花P-type ATPases基因的克隆及表达分析
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了探明棉花P-type ATPases基因在植物不同组织和多种逆境条件下的表达情况,利用棉花黄萎病菌的P-type ATPases蛋白序列,在GenBank中搜索棉花EST序列,得到2个同源的棉花EST片段,结合RACE和Genome walking获得了这个基因的完整读码框序列,其开放阅读框长度为3 570 bp,编码1 190个氨基酸,与毛果杨、蓖麻的同源性达86%左右,将其命名为Gbpatp。洋葱表皮亚细胞定位观察结果显示,Gbpatp编码的蛋白分布在细胞膜上。RT-PCR技术检测组织表达特异性分析表明,P-type ATPases在茎和棉絮中的表达量较高,在种子中低水平表达,在叶片和花蕾中表达量极低,说明Gbpatp可能与棉花较成熟的器官茎、棉絮和种子的生长发育密切相关。在逆境胁迫中发现,干旱处理后Gbpatp的表达强烈,并且随处理时间延长表达量逐渐增加;重金属Cu2+处理24 h后Gbpatp表达量升高,但48 h急剧下降;Gbpatp在低温处理下也有轻微表达。激素诱导后发现,Gbpatp对赤霉素和脱落酸均有响应,随胁迫时间延长其表达量仍能维持在一定水平。
关键词： 棉花 P-type ATPases基因 基因表达 克隆
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肠出血性大肠杆菌0157:H7AhlyAstxAtoxB基因缺失株的构建
《华北农学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：肠出血性大肠杆菌(EnterohemorrhagicEscherichiacoli)0157:H7是食源感染的人兽共患病原菌.志贺毒素(Shigatoxin,Stx)、溶血素(haemolysin,Hly)和ToxB是0157:H7重要的毒力因子.选用自杀性质粒pMEG375,体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,借助于sml0宿主菌获得0157:H7杂交菌株,通过同源重组,依次获得0157:H7(△hlyAstx△toxB)基因缺失株,△htyastx△toxB接种HEp-2细胞和感染链霉素处理的Balb/c小鼠,明确缺失株粘附定植的能力.经PCR鉴定,hly、stx和toxB基因分别被壮观霉素(Spc+)、庆大霉素(Gm+)和卡那霉素(Kan+)基因表达盒所代替,Westernblot鉴定结果显示,0157:H7(△hty△stx△toxB)检测不到相应的Stx、Hly和ToxB蛋白.0157:H7(△hlyastx△toxB)生长特性与亲本株无明显差异.对于HEp-2细胞的粘附能力明显降低.Balb/c小鼠排菌时间和排菌量明显减少和降低.本研究成功获得0157:H7(△hly△stxatoxB),并且明确Stx、Hly和ToxB的缺失导致了0157:H7对HEp-2细胞和Balb/c小鼠的粘附和定植能力降低.本研究旨在为研制EHEC0157:H7基因缺失疫苗奠定物质基础.
关键词： 肠出血性大肠杆菌0157：H7 hly stx toxB 缺失株 小鼠 粘附 Enterohemorrhagic Escherichia coli 0157 ： H7 hly, stx, toxB gene Knockout strain Mouse Adherence
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鸡痘弱毒疫苗株在鹌鹑体内的分布规律及毒性研究
《江苏农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以鸡痘弱毒疫苗株对鹌鹑进行刺种接种,运用PCR方法对免疫鹌鹑的心、肝、脾、肺、肾、脑和肌肉等组织进行病毒DNA检测,旨在动态研究鸡痘疫苗在鹌鹑体内的分布规律,据此对鸡痘弱毒疫苗株应用于鹌鹑的免疫效果及生物安全性进行初步评价。在试验期间,鹌鹑精神状态良好,采食、饮水正常,未观察到病理变化;接种后12 h鹌鹑脾检测到病毒DNA;接种后1 d脾、肺可检测到病毒DNA;接种3 d和7 d在所有监测组织内均可检测到病毒DNA;接种后10 d所有内脏器官中均未检测到病毒DNA;对照组未检测到病毒DNA。试验结果表明,鸡痘病毒在鹌鹑体内存留时间短,无毒性,生物安全性好。
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肠出血性大肠杆菌O157:H7Intimin和Tir-Tccp蛋白质对小鼠的免疫保护性
《江苏农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了研究不同浓度的肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 Intimin和Tir-Tccp蛋白质对接受1010 CFUEHEC O157:H7小鼠的免疫保护作用,将Intimin和Tir-Tccp蛋白质和佐剂充分乳化后,通过皮下多点注射免疫小鼠,对照组注射等量的磷酸盐缓冲液.共免疫2次,间隔14d,末次免疫后14d攻毒1只小鼠EHEC O157:H7 1010CFU.每次免疫后的14 d通过断尾采血,用间接ELISA法检测血清抗体.攻毒后,观察小鼠精神状态,记录死亡数并检测排菌量.ELISA检测结果表明,Tir-Tccp蛋白质诱导小鼠产生IgG抗体水平明显升高,而Intimin诱导产生的IgG抗体升高不明显.攻毒后,各免疫组小鼠均死亡1只,存活14只,存活率为93.3%;对照组小鼠死亡4只,存活6只,存活率为60.0%.免疫组在攻毒后6d,粪便中检测不到EHEC O157:H7,对照组在攻毒后13d仍有较高的排菌量.表明Intimin和Tir-Tccp蛋白质对小鼠起到了有效的免疫保护作用,能够减少EHEC O157:H7在小鼠体内的定殖.
关键词： 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 Intimin蛋白质 Tir-Tccp蛋白质 免疫原性 小鼠
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