猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法的建立

潘群兴; 何孔旺; 段治涛; 黄克和; 《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列设计特异性引物,进行PCR反应,回收PCR产物,将其克隆入pMD18-T载体,再定向克隆到表达载体pET-32a中并转化大肠杆菌Rosetta,进行原核表达。表达产物经His-Bind蛋白纯化试剂盒纯化,平均浓度为1.10 mg/ml。以1.8μg/ml蛋白包被酶标板,建立ELISA检测方法。建立的ELISA方法与北京世纪元亨公司试剂盒比较,两者检测结果符合率达85%以上。用该方法对常州某猪场36份母猪和156份10~160日龄猪群血清样品进行了检测,检测结果显示母猪阳性率为81.4%,仔猪阳性率随着日龄的增加而逐渐降低,之后由于受PCV-2的感染,阳性率逐渐升高。本试验建立的ELISA方法,具有较好的特异性、重复性和敏感性,可用于猪群PCV-2抗体的大规模检测。

关键词： 猪圆环病毒2型 ORF2基因 表达 间接ELISA

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两个红皮小麦品种籽粒颜色的遗传

姚金保; 姚国才; 杨学明; 钱存鸣; 《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：为了解小麦籽粒颜色的遗传特性,配制了2个红皮小麦品种和2个白皮小麦品种正反交,计8个杂交组合,观察了F1、BC11(红皮品种×F1)、BC12(白皮品种×F1)、F2植株上籽粒颜色的分离表现。结果表明:籽粒颜色为细胞核遗传,红皮对白皮呈显性。扬麦158与白皮品种杂交后的F2分离符合15红∶1白,说明扬麦158籽粒颜色受2对显性基因控制;宁麦8号与白皮品种杂交后的F2分离呈3红∶1白分离,说明宁麦8号籽粒颜色受1对显性基因控制。

关键词： 小麦 籽粒颜色 遗传

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核盘菌和灰葡萄孢基因组中的简单重复序列分析

李伟; 陈怀谷; 李伟; 张爱香; 陈丽华; 姜伟丽; 《遗传 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：利用公共的真菌基因组数据库资源,对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)基因组中SSRs的结构类型、分布、丰度及最长序列等进行了系统分析,并与已经研究过的禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)和黑粉菌(Ustilago maydis)等几种植物病原真菌基因组中的SSRs进行了比较。结果表明:核盘菌和灰葡萄孢基因组中的SSRs非常丰富,分别为6539和8627个,并且在结构类型和分布规律上具有一定的相似性;与其他几种病原真菌相比,核盘菌和灰葡萄孢基因组中长重复的四、五、六核苷酸基序更为丰富,从而使得这两种真菌具有更高的变异性。同时,我们发现真菌基因组中SSRs的丰度与基因组的大小及GC含量没有必然的关系。文章对核盘菌和灰葡萄孢基因组中SSRs的丰度、出现频率及最长基序的分析为快速、便捷地设计多态性丰富的SSRs引物提供了有益的信息。

关键词： 核盘菌 灰葡萄孢 简单重复序列 群体遗传学

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种子质量检验技术的现状与展望

戴剑; 陈敏; 张继红; 李华勇; 韦国清; 《种子 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：综述了比较了国内外种子检验工作的发展状况,发芽试验、种子纯度和真实性鉴定及种子健康检验的研究现状,并展望了今后的发展方向。

关键词： 发芽试验 纯度 健康检验

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SYBR Green I实时定量PCR方法检测2型猪圆环病毒

潘群兴; 何孔旺; 黄克和; 《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：利用PCR技术扩增出2型猪圆环病毒(PCV)ORF2保守区基因107 bp片段,并克隆到pMD-19-T载体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行荧光定量PCR,并绘制标准曲线。再以提取的PCV-2、PCV-1、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病毒(PRV)的DNA作为模板,采用同样体系进行实时PCR检测。结果表明:建立的实时定量PCR方法,起始模板浓度与样本阈值循环数(Ct)值之间呈很好的线性关系,标准曲线斜率为-0.32,相关系数r2为0.997,Ct值为11.9~26.9。PCV-2能扩出S型荧光曲线,熔解曲线的峰狭窄单一,而PCV-1、PPV和PRV均不能扩出。对32份健康猪和32份断奶仔猪多系统消耗综合征(PMWS)可疑猪样品定量检测:健康猪阳性率为44%(14/32),病毒载量均小于104拷贝.μL-1;PMWS可疑猪阳性率96.8%(31/32),病毒载量均大于105拷贝.μL-1。实时荧光定量PCR方法可用于2型猪圆环病毒定性及定量的检测。

关键词： 2型猪圆环病毒 实时荧光定量PCR 标准曲线

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油菜雌性不育突变体FS-M_1花器官形态及其受精能力

陈新军; 戚存扣; 张洁夫; 浦惠明; 高建芹; 傅寿仲; 《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)雌性不育突变体FS-M1及其野生型宁油10号的花器官形态和柱头受精能力进行了观察比较研究,结果表明FS-M1雌蕊明显短于雄蕊,6个雄蕊几乎等长,无密腺,但在雄蕊基部有两个月牙形状物;子房扁平,明显短于野生型,且柱头顶端呈叉型;柱头乳突细胞较大但数量较少,粘附花粉能力弱,在开花2~3 d后逐渐干瘪。授粉后,在FS-M1柱头表面观察到萌发的花粉粒,但未观察到花粉粒芽管刺破乳突细胞,形成"膨突"现象,花柱中没有观察到花粉管。切除柱头及部分花柱后再授粉,在FS-M1花柱中观察到伸长的花粉管,授精结角也接近正常。FS-M1雌性不育现象可能与柱头乳突细胞发育畸变和功能缺失有关。

关键词： 甘蓝型油菜 突变体 花器官 雌性不育

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梨中吡虫啉的高效液相色谱分析

刁传芸; 孙立荣; 常有宏; 刘贤进; 《江苏农业学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：为探索一种适用于梨样品中吡虫啉低残留快速检测的方法,对高效液相色谱法的色谱条件进行了优化。当采用ODS C18色谱柱,以乙腈∶水=40∶60(体积比)为流动相,检测波长为268 nm,梨中吡虫啉回收率为83.3%~116.6%,相对标准偏差小于5.06%。该方法吡虫啉回收率高且相对偏差小,适合于对梨中吡虫啉残留进行快速、准确的分析。

关键词： 高效液相色谱 梨 吡虫啉

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拮抗菌株C8-8控病促生作用机制初探

刘邮洲; 陈志谊; 刘永峰; 罗楚平; 《中国生物防治 》 2007 北大核心 CSCD

关键词： 拮抗菌株C8-8 抗病性 促生

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陆地棉超矮杆突变性状质量遗传规律分析

陈旭升; 狄佳春; 许乃银; 肖松华; 刘剑光; 《遗传 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：分析了陆地棉超矮突变体的质量遗传规律,结果显示,该性状是受一对完全隐性基因控制的质量性状;在国内外未见陆地棉中同类突变的报道,暂将它的基因符号定为du。该突变体在自然条件下生长,最终株高仅10.5cm,不能正常开花、结铃和吐絮;但通过外源激素处理,最终株高可以达57.8cm,并能正常结铃吐絮。

关键词： 陆地棉 超矮杆突变 质量遗传

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陆地棉花粉粒萌发和花粉管生长特性

于艳杰; 吴李君; 吴跃进; 王庆亚; 倪万潮; 唐灿明; 《自然科学进展 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：以陆地棉为材料,用苯胺蓝染色法对花粉管进行染色,观察棉花花粉粒在柱头上的萌发和花柱中花粉管的生长状况.授粉后,统计花柱中花粉管的数量,将花粉活力与花粉管数量直接联系起来,为棉花花粉活力测定和生殖过程的基本规律研究提供了新的方法.活体和雌蕊离体培养两种条件下,花粉原位萌发结果基本一致.活体原位萌发在授粉1h后.个别花粉开始萌发,4h后柱头上的花粉全部萌发,12h后大量的花粉管伸长到花柱基部.统计花柱中花粉管数量的准确时间应在授粉后4—12h.离体原位萌发各式各阶段均较活体原位萌发慢1h.可用离体原位萌发法代替活体原位萌发法测定花粉活力,活体和离体原位萌发两种情况下,花粉管的平均生长速度分别为0.03和0.29cm/h.花粉萌发及花粉管在花柱中生长的最适温度为30℃.花粉管在花柱中呈曲线方式生长.

关键词： 陆地棉 原位萌发 花粉 花粉管 苯胺蓝染色法

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