科研产出
内生解淀粉芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bglS)的克隆与表达及酶学特性分析
《农业生物技术学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要:β-1,3-1,4-内切葡聚糖酶普遍存在于植物内生芽胞杆菌中,为了探讨其功能,以内生解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)TB2菌株基因组为模板,克隆了β-1,3-1,4-内切葡聚糖酶基因(bglS)。测序结果表明,该基因的ORF全长732bp,编码一条243个氨基酸的蛋白,理论分子量约为27.33kD,等电点约为6.89,其ORF序列已登录GenBank(Accession No.EU368224)。Blast同源性分析结果表明,该基因的ORF序列与植物互作生防解淀粉芽胞杆菌(B.amyloliquefaciens FZB42,GenBank Accession No.CP000560)的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因核苷酸序列的一致性达97.3%,氨基酸序列的一致性达97.1%。将β-1,3-1,4-内切葡聚糖酶基因全长克隆至pUC18载体上,利用基因自身的启动子构建重组表达载体pUC-bglS,并导入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中表达。SDS-PAGE分析表明,BL21::pUC-bglS菌株表达了27kD左右的蛋白;该酶的最适反应温度为55℃,在50℃以下保温60min后残余80%以上酶活;最适反应pH为6.2,在pH4.4~6.84℃保温30min残余85%以上的酶活;Ca2+和Fe2+可提高β-1,3-1,4-葡聚糖酶的活性,而Cu2+、Zn2+、Mg2+和Mn2+对其活性具有显著的抑制作用。实验结果为进一步研究植物内生解淀粉芽胞杆菌TB2β-1,3-1,4-葡聚糖酶的功能和应用打下了基础。
关键词: 内生解淀粉芽胞杆菌 β-1 3-1 4-内切葡聚糖酶基因(bglS) 克隆 表达
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转基因植物选择标记基因删除技术
《分子植物育种 》 2010 CSCD
摘要:本文系统地介绍了4种转基因植物选择标记基因删除技术——(共转化法(co-transformation)、转座子法(transposable element)、位点特异性重组法(site-specific recombination)、染色体内同源重组法(intrachromosomal recombination)的基本原理和操作过程,并分析了各自的特点和实际应用情况,比较了它们的优缺点,展望了删除技术的前景。删除技术的发展,无论是对于转基因作物的安全性和商业化,还是转基因技术的发展和完善都有积极的作用。
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优质早熟红柿品种“早红”的选育
《中国南方果树 》 2010 北大核心
摘要:"早红"系从永定红柿芽变后代中选育出来的早熟涩柿新品种。果实扁圆或扁方形,早花果果顶隆凸,迟花果果顶略凹,平均单果重157g。后熟果实果肉橙红色,无褐斑,肉质黏稠,柔软致密,有弹性,粗纤维少,风味甜。果皮橙黄色,光滑,无网状花纹,外被果粉。早花果部分果实有少量种子,中晚花果无种子。柿蒂留花托较大、四瓣形,萼片三角形、大都斜伸、基部连合。在福建永定,2月中旬萌芽,4月上旬始花,果实成熟期在8月下旬至9月中旬。适应性强,较耐粗放管理,福建省柿产区均能种植。
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基本苗数对机插双晚杂交稻产量的影响
《湖南农业科学 》 2010 CSCD
摘要:以全优527为材料,测定6种不同种植基本苗数的产量和主要产量性状,研究机插双晚杂交稻的最适插植基本苗数。结果表明,当基本苗数在83.25万株/hm2以下时,产量随基本苗的增加而显著增加,超过此值,产量增加不明显。双晚机插杂交稻的种植基本苗数以83.25万株/hm2为宜。
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CSFV,SIV,PCV2,PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及初步应用
《中国农学通报 》 2010 北大核心
摘要:参照GenBank中的猪瘟病毒(CSFV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合病毒(PRRSV)基因序列,设计了5对引物分别用于扩增CSFVE2、SIV、PCV2ORF2、PRVgB、PRRSVN基因的目的片段。通过对反应条件进行优化,建立了检测CSFV、SIV、PCV2、PRV和PRRSV的多重PCR(mPCR)诊断方法。敏感性和特异性结果显示,该mPCR对5种病毒的最低核酸检测量为10pg。而对大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、猪细小病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒、猪传染性胃肠炎病毒的多重PCR的扩增结果均为阴性。临床样品的多重PCR检测结果表明,建立的多重PCR方法能够对SIV、CSFV、PCV2、PRV、PRRSV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。
关键词: 猪流感病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪伪狂犬病毒 猪生殖与呼吸综合征病毒 多重PCR
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七彩山鸡大肠杆菌病病原分离与鉴定
《福建畜牧兽医 》 2010
摘要:鸡大肠杆菌病最早于瑞典报道,先后在法国、匈牙利、美国、加拿大等养禽业发达国家均有发生。随着我国养鸡业的迅速发展,鸡大肠杆菌病不断在我国各地蔓延和扩散,各个省市都有该病发生的报道,而且发病率和死亡率大大增加,给养禽业造成严重的经济损失[1-2]。鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌的某些
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