科研产出
鳗鲡疱疹病毒对欧洲鳗鲡的致病性
《水产学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了明确鳗鲡疱疹病毒（Anguillid herpesvirus, AngHV）的致病性,本实验采用一株从鳗鲡"脱黏败血综合征"病料中分离的AngHV（NA16108）,研究了其对欧洲鳗鲡幼鳗的致病性。结果显示,注射AngHV的鳗鲡体表出现黏液脱落、鳍条出血、红头等症状;鳃部出现黏液增多、出血,肝脏褪色、肿大,脾脏和肾脏肿大等病变;进一步的组织病理学观察发现,鳗鲡的体表黏液及黏膜上皮细胞脱落,次级鳃瓣增生、呼吸细胞肿胀坏死,脾脏细胞坏死、黑色素细胞聚集,肾小管管壁上皮细胞坏死、管腔变窄等病理症状;这与鳗鲡"脱黏败血综合征"的发病特征一致。致死率分析显示,从第4天开始攻毒组鳗鲡开始出现死亡,第7天和第14天的累计死亡率分别达到26.7%和56.7%;荧光定量PCR检测显示,在攻毒鳗鲡肝脏、脾脏、肾脏、肠道、鳃和皮肤黏液中均可检测到AngHV;另外,用鳗鲡卵巢细胞系（eel ovary cell line, EO）从攻毒鳗鲡主要内脏器官中重新分离出AngHV,表明鳗鲡发生了AngHV的系统侵染。研究表明,AngHV是鳗鲡"脱黏败血综合征"的致病病原,这为深入开展该病的发病机制及防控研究奠定了基础。
关键词： 欧洲鳗鲡 鳗鲡疱疹病毒 致病性 脱黏败血综合征 病原
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新型鹅星状病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】建立一种新型鹅星状病毒（New goose astrovirus,NGAstV）的RT-PCR检测方法。【方法】根据ORF2基因序列,利用Oligo 7软件设计并筛选出特异性扩增引物,通过优化扩增条件,建立检测新型鹅星状病毒的RT-PCR方法,对其进行特异性及敏感性检验,并在临床上进行初步应用。【结果】RT-PCR最佳反应体系为:Premix 10μL,ORF2上下游引物浓度10μmol·L-1各1μL,模板3μL,无菌去离子水补足至20μL。最佳反应程序为:94℃2 min;94℃30 s、55℃15 s、72℃15 s,30个循环;72℃10 min。该方法对新型鹅星状病毒能扩增出特异性片段,对其他鹅常见病原无特异性扩增;检测灵敏度为62 fg·μL-1。对45份临床样品进行检测,结果检测出15份阳性样品,阳性率为33.33%。【结论】建立的新型鹅星状病毒RT-PCR方法特异性强、稳定性好,可作为新型鹅星状病毒快速检测和流行病学调查的实用技术。
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基于响应面法优化探讨枇杷花凝胶软糖的制作工艺
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】利用枇杷花茶特色资源制备一种具有止咳化痰作用的凝胶软糖产品。【方法】通过单因素试验比较枇杷花茶冲泡质量浓度、明胶、柠檬酸、木糖醇添加量对凝胶软糖的模糊感官综合评分和硬度的影响,确定凝胶软糖的评价指标;在单因素试验基础上,设计枇杷花茶冲泡质量浓度、木糖醇、柠檬酸为自变量的3因素3水平的响应面试验,共进行17组处理,从而确定枇杷花凝胶软糖的最优工艺参数。【结果】单因素结果显示:模糊感官综合评分作为评价凝胶软糖的指标较科学,明胶的适宜添加量为12%;响应面试验确定枇杷花凝胶软糖的最优工艺配方为:枇杷花茶冲泡质量浓度17.7 g·L-1、木糖醇13.85%、柠檬酸1.25%,该条件下制备的枇杷花凝胶软糖的模糊感官综合评分为91.23分,与模型理论值接近。【结论】确定枇杷花凝胶软糖的最佳工艺配方（以质量分数计）为枇杷花茶29.85%(冲泡质量浓度17.7 g·L-1)、麦芽糖浆28.4%、木糖醇13.85%、冰糖14.55%,柠檬酸1.25%,明胶12%,分子蒸馏单苷酯0.1%。该研究制作的枇杷花凝胶软糖将为枇杷花新资源食品的深加工利用提供新思路。
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基于介电特性的异位发酵床垫料含水率的检测与建模
《福建农林大学学报(自然科学版) 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了探究异位发酵床垫料的介电特性,实现垫料含水率的快速检测,本研究以异位发酵床垫料原料（稻谷壳和锯末）为研究对象,利用平行板电容器研究了频率（0.1～100.0 kHz）、温度（25～65℃）、含水率（32.16%～68.61%）和体积密度(101.958 6～459.394 1 kg·m-3)对垫料的相对介电常数ε′r和介质损耗因数ε″r的影响;在所选频率下,建立了预测含水率的数学模型,并对模型进行了验证.结果表明,在0.1～100.0 kHz频段内,温度的升高、含水率和体积密度的增大都会使垫料的ε′r和ε″r呈现递增的趋势,频率的增大会使二者呈现递减的趋势.在所选频率下建立的模型的决定系数皆大于0.98,最大值为0.999 0.含水率的预测值与实测值之间的决定系数为0.993 2,二者之间的绝对误差在±2.33%内,说明基于垫料介电特性预测含水率的方法是可行的.
关键词： 异位发酵床 垫料 含水率 介电特性 温度 体积密度
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湖滨带芦苇恢复过程中沉积物氮赋存形态及含量变化:以巢湖为例
《湖泊科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：水生植被对于维持水生态系统结构和功能稳定性具有举足轻重的作用,而重建水生植物被认为是污染湖泊生态修复的重要手段.氮素是水生态系统重要的限制性元素之一,根着挺水植物生长发育无疑将深刻地影响着沉积物氮的迁移转化过程,但水生植物不同生长阶段对沉积物氮的需求和植物代谢强度均不同,目前对挺水植物完整生长过程中沉积物氮组分及含量变化认识仍十分不足.本研究通过为期120d的沉积物柱芯培养和水槽模拟试验,探究巢湖芦苇恢复完整生长过程中沉积物总氮（TN）、无机氮（TIN）与可转化态氮（TF-N）的变化及其关键调控因子.结果表明,芦苇完整生长过程将持续激发沉积物氮活性,沉积物TIN与TF-N含量逐渐增加,而沉积物TN和非可转化态氮（NTF-N）含量显著降低.模拟试验期间,指数型增长的芦苇生物量提高了沉积物铵态氮（NH4+-N）和硝态氮（NO3--N）含量,但亚硝态氮（NO2--N）含量却逐渐降低;与第0天相比,第120天沉积物离子交换态氮（IEF-N）、碳酸盐结合态氮（CF-N）、铁锰氧化态氮（IMOF-N）和有机态及硫化物结合态氮（OSF-N）含量分别增加了 1.10、3.40、3.60和1.40倍,这主要受芦苇吸收利用、根系代谢强化根际沉积物氧化还原电势和改变pH微环境共同驱动.在第120天,沉积物NH4+-N和NO3--N含量急剧升高,分别是第90天的9.43和2.22倍,表明芦苇衰亡凋落过程将向沉积物释放大量的TIN,故需要综合采取湖泊物理—生态工程手段来有效管控芦苇枯落物,从而提升水生植被修复效果并构建长效稳态机制.
关键词： 水生植物 沉积物 氮 富营养化湖泊 生态修复 巢湖
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酿酒酵母高密度增殖酒糟多肽糖蜜培养基优化
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】研发适用于酿酒酵母菌剂生产的高密度低成本培养基。【方法】以酿酒酵母JH301为对象菌,以糖蜜为基础培养基,采用单因素试验筛选适宜的碳源、氮源、无机盐和天然产物增殖因子,通过U16（88）均匀试验优化培养基成分。【结果】研究筛选出适宜的碳源为棉籽糖、葡萄糖和海藻糖,氮源为胰蛋白胨,无机盐为磷酸二氢钾,天然产物增殖因子为酒糟多肽、大米糖化液和大豆多糖。获得优化培养基配方为:在可溶性固形物含量为10%的糖蜜中添加酒糟多肽23.72 g·L-1、大米糖化液44.15 g·L-1、大豆多糖31.88 g·L-1、棉籽糖22.45 g·L-1、葡萄糖13.97 g·L-1、海藻糖15.00 g·L-1、胰蛋白胨27.25 g·L-1、磷酸二氢钾3.00 g·L-1,调节pH至4.5±0.2。酵母细胞增殖培养生物量可达1.48×108 cfu·mL-1,比基础糖蜜培养基提高了1个数量级。【结论】酒糟多肽中富含多种对酿酒酵母细胞增殖起促进作用的小分子多肽成分,作为天然产物添加到糖蜜培养基中可显著提高酵母产量,是一种来源丰富、低成本的优良复合营养源,相关研究内容可为高活力酵母菌剂制备提供思路和参考依据。
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土荆芥精油对小菜蛾幼虫表皮的渗透促进作用
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】了解土荆芥精油对杀虫剂的渗透促进作用,明确土荆芥精油对小菜蛾幼虫透皮吸收的效果。【方法】采用扫描电镜观察施用土荆芥精油后小菜蛾表皮超微结构的变化,并利用气质联用仪测定和分析土荆芥精油对杀虫剂透皮吸收量的影响。【结果】与蒸馏水对照和丙酮处理相比,土荆芥精油或氮酮处理后,小菜蛾表皮蜡质层结构出现明显的结构性损伤,刺状突起排列变得较为松散,刺状突起变得平滑,刺状突下部变得褶皱或开裂。随着时间的延续,土荆芥精油对3种杀虫剂的透皮吸收量和渗透率均大幅增加;处理24 h后,土荆芥精油处理的氟虫腈渗透率达99.34%,显著高于氟虫腈单剂（55.12%）。【结论】土荆芥精油与氮酮处理对小菜蛾幼虫表皮的影响相似,土荆芥精油对敌百虫、氟虫腈、毒死蜱都具有很好的渗透促进作用。本研究结果可为利用土荆芥精油促进有机磷、苯基吡唑类和硫代磷酸酯类杀虫剂的透皮作用提供理论依据。
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兔源强毒力金黄色葡萄球菌环介导等温扩增快速检测方法的建立
《中国预防兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立检测兔源强毒力金黄色葡萄球菌的快速检测方法,本实验根据GenBank中登录的金黄色葡萄球菌pvl基因保守序列设计了2对引物,经反应条件优化,建立了检测兔源强毒力金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增（LAMP）快速检测方法。结果显示,该LAMP快速检测方法最优反应条件为:外引物和内引物的浓度比为1.7,反应温度为65℃,反应时间为60 min。利用细菌基因组DNA提取试剂盒提取兔源强毒力金黄色葡萄球菌、低毒力金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠杆菌DNA,利用该方法检测,结果显示仅兔源强毒力金黄色葡萄球菌检测为阳性结果,其他均为阴性,无交叉反应,该方法特异性较强;将兔源强毒力金黄色葡萄球菌基因组DNA的浓度设置为1×108拷贝/μL～1×100拷贝/μL,利用本研究建立的方法检测,结果显示对兔源强毒力金黄色葡萄球菌基因组DNA的最低检出限为1×102拷贝/μL,其敏感性为双重PCR方法的100倍,敏感性高;利用该方法进行批内和批间重复性试验,结果均一致,重复性较好。利用该方法检测88份临床样品,结果显示与已报道的双重PCR方法检测结果的符合率为100%。本研究在国内首次建立了兔源强毒力金黄色葡萄球菌LAMP方法,为该病原的快速检测提供了有效的技术手段。
关键词： 兔 强毒力金黄色葡萄球菌 pvl基因 LAMP检测方法
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福建地区葡萄自然发酵过程中酵母菌的组成及差异分析
《南方农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对福建地区葡萄自然发酵酵母菌组成的差异进行分析,明确福建主要酵母菌种类,为酿制具有南方地域特色的葡萄酒提供优良菌株。【方法】采集夏黑、刺葡萄和玫瑰香葡萄自然发酵不同阶段[发酵前期（7 d）、中期（15 d）和后期（25 d）]的发酵液进行酵母菌分离,采用WL培养基进行酵母菌表型性状鉴别,挑取代表性菌株进行DNA提取及26S rDNA D1/D2鉴定,分析不同发酵阶段酵母菌的组成差异。通过测定相同发酵条件下的酒精度、总糖、还原糖和总酸含量,对酿酒酵母的酿酒性能进行初步分析。【结果】不同品种葡萄自然发酵的发酵液中共分离获得114株菌株,根据其表型鉴定为18个不同的表型类群。进一步通过酵母菌的26S r DNA D1/D2区序列测序,可将114株酵母菌菌株划分为18种,包括拜耳接合酵母（Zygosaccharomyces bailii）、双孢接合酵母（Zygosaccharomyces bisporus）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）等。不同品种葡萄发酵过程中酵母菌种类和组成具有一定的差异,其中刺葡萄A有10种、刺葡萄B有11种、夏黑A和玫瑰香均为7种、夏黑B有8种。陆生伊萨酵母（Issatchenkia terricola）出现在刺葡萄A、玫瑰香和夏黑B发酵前期,且所占比例最高,分别达100.00%、50.00%和40.00%;盔形毕赤酵母（Pichia galeiformis）是夏黑A和刺葡萄B发酵前期的优势菌;在不同品种葡萄自然发酵中期均含有泽普林假丝酵母（Candida zemplinina）和盔形毕赤酵母;刺葡萄A、刺葡萄B和夏黑B发酵后期的优势菌为盔形毕赤酵母,所占比例分别为40.00%、55.56%和71.43%;酿酒酵母在夏黑A、玫瑰香和夏黑B发酵中期开始出现,直到发酵后期,均占有较大比例,分别为66.67%、42.86%和14.29%。初步葡萄酿酒发酵表明,酿酒酵母VMH-M042的酿酒性能（酒精度12.5%、总糖含量76.0 g/L、还原糖含量40.5 g/L、总酸含量5.6%）优良。【结论】福建地区不同品种葡萄分离得到的酵母菌资源丰富,区域性差异明显,特异性资源较多,其中酿酒酵母VMH-M042在葡萄酒发酵中表现出较优良的酿酒性能,可为南方葡萄酒酿制提供丰富的菌种资源和理论依据。
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粳稻云引稻瘟病抗性近等基因系与免疫应答相关的LRR-RLKs差异基因分析
《科学通报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：在广谱抗稻瘟病品种云引与普感稻瘟病品种丽江新团黑谷（Lijiangxintuanheigu, LTH）构建的近等基因系抗、感病子代基因组重测序的差异基因中,从与免疫应答（immune response）相关的分类单元里得到8个基因序列有差异的基因.它们都为编码富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶基因,并聚集于11号染色体的邻近位置,且与已知的白叶枯病抗性基因Xa21具有一定同源性.为进一步探究这些类受体蛋白激酶类基因在稻瘟病抗性中可能发挥的功能,我们分析了这些基因的结构、进化及抗感子代间的序列差异类型,同时还分别采用离体和喷雾接菌的方式对云引和LTH进行稻瘟病接种并取样.通过实时荧光定量PCR（quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR）发现,部分基因能受到稻瘟病菌的诱导,推测它们可能在水稻对抗稻瘟病病菌中发挥一定作用,为进一步挖掘稻瘟病相关抗性基因奠定基础.
关键词： 近等基因系 免疫应答 富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶 稻瘟病
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