黑龙江地区鲤春病毒血症病毒的分离与基因型分析

纪锋; 赵景壮; 刘淼; 贺文斌; 尹家胜; 卢彤岩; 任广明; 徐黎明; 《中国水产科学 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：对2015—2016年黑龙江不同地区的40个养殖场送检的鲤(Cyprinus carpio)进行鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)的细胞培养分离、PCR鉴定、病毒滴度测定、病毒表面糖蛋白(glycoprotein,G)氨基酸序列聚类分析及基因分型研究。细胞培养结果显示,来自4个不同养殖场的鲤组织样本能够感染鲤上皮细胞(epithelioma papulosum cyprini,EPC)产生典型细胞病变(cytopathic effect,CPE),收集病毒悬液分别称为Shlj1~Shlj4。PCR鉴定结果表明,该4株病毒均为SVCV。病毒滴度实验测算出SVCV Shlj 1~Shlj 4的滴度分别为10~(6.28)、10~(6.88)、10~(7.57)和106.38 TCID50/mL。Shlj的糖蛋白基因核苷酸序列的聚类分析和遗传进化分析结果显示,Shlj 1~Shlj 4与Gen Bank收录的中国参考株A2、BJ0505-2和美国参考株USA、212364聚为一簇,同源性为98.4%~99.8%;Shlj 1~Shlj 4毒株之间的糖蛋白核苷酸序列相似性在98.6%~99.8%,其中Shlj 3与美国SCVC毒株USA、212364具有最高的核苷酸相似性(99.8%),Shlj 2与英国参考毒株880163具有最低的相似性(88.0%)。糖蛋白氨基酸序列比对结果显示,Shlj4中氨基酸突变最多,与另3个毒株差异较大。基因型分析结果显示,Shlj 1~Shlj 4均为基因Ia型。本研究结果表明,黑龙江地区2015—2016年间的SVCV检出率约为10%,并且来源于不同养殖场的病毒分离株的核酸序列呈现不同程度的差异,该结果进一步证明SVCV毒株在中国不同的鲤养殖环境中正在不断地进化。

关键词： 鲤春病毒血症病毒 糖蛋白 进化分析 基因型

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深水网箱护栏力学性能分析及优化

刘海阳; 王绍敏; 黄小华; 陶启友; 胡昱; 郭根喜; 宋利明; 《农业工程学报 》 2017 EI 北大核心 CSCD

摘要：护栏是深水网箱浮架系统不可或缺的重要构件,对支撑网衣、保持养殖容积、协同网箱浮架抵抗波浪流冲击起到重要作用。该文分别对中国当前应用的圆型深水网箱和六三型深水网箱护栏开展了弹塑性阶段的力学试验和有限元分析。结果表明:1)波流和气流的共同频率达到深水网箱护栏固有频率14.25 Hz时更易产生共振疲劳破坏;2)冲角为0°的集中载荷使护栏变形最大,此时扶手管中心为最易变形区域,立柱下端为最易破坏区域;3)同规格同材料的圆形扶手管抗形变能力显著大于六边形扶手管;4)扶手管的载荷-位移方程服从对数函数分布。护栏结构优化结果显示将管材的圆形截面处理为椭圆,护栏的水平抗弯性能增加6.58%。

关键词： 有限元法 力学性能 高密度聚乙烯 深水网箱 护栏

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草鱼MyoD基因内含子和启动子的克隆与分析

陈静; 樊佳佳; 何吉祥; 黄龙; 宋光同; 吴本丽; 汪翔; 武松; 《基因组学与应用生物学 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：本研究采用PCR和染色体步移法克隆了草鱼Myo D基因311 bp的内含子1、125 bp的内含子2及长1 066 bp的部分上游启动子序列。同源性比对分析表明,草鱼Myo D的内含子1与鲤科鱼类的同源性相对较高(87%~97.1%)。生物信息学方法预测草鱼Myo D的启动子序列中发现含有1个核心启动子序列,存在CREB、SP1、ATF等多种与转录诱导调控有关的转录因子结合位点,未发现Cp G岛。草鱼Myo D基因内含子及启动子克隆与特征分析,将为进一步研究鱼类Myo D基因的表达调控及其功能分析提供参考。

关键词： 草鱼 MyoD基因 内含子 启动子 生物信息学

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达氏鳇、施氏鲟及其杂交子代胚胎发育期的抗氧化酶活性

张颖; 徐伟; 孙大江; 王斌; 许式见; 张镜群; 胡朝; 《水产学杂志 》 2017

摘要：利用形态学和生物化学的方法测定达氏鳇Huso dauricus、施氏鲟Acipenser schrenckii及其正反杂交子代的受精率、孵化率、出苗率与胚胎发育期间超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活性,分析胚胎发育与抗氧化酶含量的关系。结果表明,达氏鳇与施氏鲟为杂交亲和,可获得正常发育的正反交后代,不影响受精率、孵化率及出苗率。不同胚胎发育期鲟的4种主导抗氧化酶类型及变化规律各不相同。在特定发育时期,达氏鳇(♀)与施氏鲟(♂)正交子代(大杂交鲟)的CAT等抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量均接近或高于两亲本中较高的一方;而达氏鳇(♂)与施氏鲟(♀)反交子代(小杂交鲟)介于两亲本之间,特别是SOD、还原型谷胱甘肽(GSH)活性和MDA含量显著低于其父母本。施氏鲟胚胎心脏搏动期SOD的活性最高,达氏鳇胚胎在卵黄栓期SOD的活性最高,而杂交子代的SOD活性均在囊胚期达最大值。综上所述,4种鲟胚胎发育时期内源性抗氧化酶活性的表达差异在一定程度上可解释物种间表型性状的差异。

关键词： 施氏鲟 达氏鳇 杂交子代 胚胎发育 抗氧化酶

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工会经费审计的思辨与改进研究

赵竹明; 于津; 《中国乡镇企业会计 》 2017

摘要：随着市场经济的快速发展,各级工会组织迅速壮大,工会经费收支规模以及工会管理的资产总量持续增长,使得进一步规范工会经费审计的必要性逐步凸显。本文详细分析了国家审计与内部审计的特点,对比指出了工会经费审计自身的特殊性,并针对当前工会经费审计中存在的问题提出了加强工会经费审计的改进建议。

关键词： 工会经费审计 国家审计 内部审计 审查监督

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溴氰菊酯在团头鲂体内的富集消除规律研究

徐春娟; 刘永涛; 艾晓辉; 杨秋红; 宋雅琪; 胥宁; 《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：【目的】对溴氰菊酯(DM)在团头鲂体内的富集及消除规律进行研究,为水环境中污染物残留及水产品的质量安全问题研究提供理论依据。【方法】在(18±0.5)℃水温下,以团头鲂为研究对象,经5μg/L DM药浴后,利用气相色谱法分析不同时间DM在血浆、肝脏、肌肉、皮肤、鳃、胆组织中的药物残留,采用3p97药代动力学软件对DM在血浆中的血药浓度时间数据进行拟合,构建DM在各组织中的消除曲线方程。【结果】DM在血浆中的峰值浓度(Cmax)为75.96μg/L,达峰时间(Tmax)为7.05h,药-时曲线下面积AUC为1 524.69(μg·h)/L,吸收半衰期(T1/2(ka))为3.66h,消除半衰期(T1/2(ke))为6.73h;DM在团头鲂各组织中富集的浓度从高到低依次为鳃>血浆>肝脏>皮肤>肌肉>胆;肝脏、肌肉、皮肤、鳃及胆组织对DM的消除半衰期(T1/2)分别为13.75,12.55,12.55,5.35和3.28d。团头鲂血浆、肝脏及鳃组织中的DM含量于药浴12h后明显降低,各组织中的DM含量84h后均降至(14.37±11.65)μg/kg以下,低于我国规定的DM在鱼肌肉中的最高残留限量(30μg/kg);但低含量DM在团头鲂体内维持时间较长,768h(32d)时在皮肤、肝脏、鳃及肌肉组织中仍有残留。【结论】DM在团头鲂体内吸收分布迅速,在鳃、血浆和肝脏组织中富集浓度较高,其消除时间也较长,药浴后768h(32d)在大部分组织中仍能检出。

关键词： 溴氰菊酯 团头鲂 富集 消除

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斑点叉尾鮰病原中温和气单胞菌的分离鉴定及药敏特性分析

杨移斌; 胥宁; 董靖; 杨秋红; 刘永涛; 艾晓辉; 《中国渔业质量与标准 》 2017

摘要：对患出血病斑点叉尾鮰进行病原分离、鉴定及药敏实验,以期为斑点叉尾鮰出血病的防控提供参考。从患病斑点叉尾鮰血水、腹水及重要组织器官中分离纯化病原菌,并进行分离株理化特性测定、gyrB序列分析及回归感染实验,并通过K-B法进行分离菌株药物敏感性分析。结果显示,回归感染实验鱼出现与自然发病类似症状,并经细菌再分离获得相同分离株,表明分离株是引发本次斑点叉尾鮰疾病的病原菌。分离株理化特性与温和气单胞菌基本一致,gyrB基因序列分析分离株与温和气单胞菌同源性达100%,故分离株鉴定为温和气单胞菌。分离株对多西环素及头孢噻肟高度敏感,对氟苯尼考、阿奇霉素及左氧氟沙星中度敏感。分离菌株是斑点叉尾鮰病原菌,紧急时可选用多西环素等药物进行防控。

关键词： 斑点叉尾鮰 温和气单胞菌 分离鉴定 药敏特性 回归感染实验

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秦皇岛近海增殖放流区牙鲆(Paralichthys olivaceus)回捕群体的遗传多样性分析

司飞; 孙朝徽; 于姗姗; 赵雅贤; 宋立民; 王树亮; 王青林; 姜秀凤; 王玉芬; 于清海; 《渔业科学进展 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：本研究利用12对微卫星标记对秦皇岛近海增殖放流区内的牙鲆(Paralichthys olivaceus)回捕群体的遗传多样性进行分析,并与放流用牙鲆亲本群体和放流前群体的遗传多样性进行对比。结果显示,在3个群体中,等位基因数(N_a)为11.917–22.167个,平均观测杂合度(H_o)为0.800–0.836,平均期望杂合度(H_e)为0.814–0.845,平均多态信息含量(PIC)为0.775–0.818。其中,回捕群体的平均N_a最多,为22.167,放流前群体的平均N_a最少,为11.917。平均H_o最大的是回捕群体(0.836),最小的是放流前群体(0.800)。平均H_e最大的是亲本群体(0.845),最小的是放流前群体(0.814)。在36个群体–位点组合中,有23个群体–位点组合显著偏离哈迪-温伯格平衡状态(P<0.05)。3个群体的基因分化系数G_(st)值为0.005–0.043,遗传分化均为较弱。研究表明,3个群体均保持较高的遗传多样性,放流人工培育苗种对回捕群体的遗传多样性和遗传结构未产生明显的影响。

关键词： 牙鲆 回捕群体 增殖放流 遗传多样性

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寒冷地区各类型池塘设施防冻胀技术初探

聂懿; 杨怀宁; 《中国水产 》 2017

摘要：在寒冷地区,季节性冻土面积大约513.7万km~2,占国土面积的53.5%,分布比较广泛;这些地区的养殖池塘,常常遭受到不同程度的冻胀破坏,不仅严重影响了池塘设施的正常运行和防渗效果,也增加了池塘设施的管理难度与维修费用。因此,作者给大家讲述几种池塘防冻胀技术,供大家参考。

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水产品中药物残留检测能力验证现状与展望

刘欢; 李晋成; 田娟娟; 马兵; 李强; 吴立冬; 《中国渔业质量与标准 》 2017

摘要：水产品中药物残留检测能力验证活动,对提升各质检机构检验人员的检测水平及实验室的质量管理水平,促进检测体系健康发展起到了积极的推动作用。文章从能力验证考核项目、运用的考核技术、结果评价方法以及参加实验室的积极性等角度对2004—2016年期间农业部组织开展的水产品药物残留检测能力验证活动进行全面梳理,发现目前工作中仍存在组织和实施规范性不够、考核项目有局限、结果无法共享与互认、部分实验室对能力验证结果缺乏正确认识等问题,并有针对性地提出相关对策建议。

关键词： 水产品 药物残留 检测 能力验证

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