科研产出
戊糖片球菌对Caco-2细胞的黏附及黏附素的鉴定
《江苏农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为了研究戊糖片球菌SR2-6对Caco-2细胞的黏附作用,采用不同的化学试剂和酶处理SR2-6,测定其表面成分黏附性质变化,并提取戊糖片球菌表面的细胞黏附素,进行成分和结构分析。同时测量了Caco-2细胞MUC3基因表达量的变化。结果显示,戊糖片球菌SR2-6能明显上调Caco-2细胞MUC3基因表达;戊糖片球菌SR2-6的肽聚糖参与了Caco-2细胞黏附的主要过程,该肽聚糖为α型肽聚糖,提取物主要由谷氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、赖氨酸组成,总糖含量为(9.42±1.55)%,蛋白质含量为(4.61±1.88)%。戊糖片球菌SR2-6肽聚糖是一种抑制性黏附素,浓度越高,对SR2-6黏附Caco-2细胞的抑制越强,同时上调MUC3基因表达的作用也越强。
关键词： 戊糖片球菌 黏附 Caco-2细胞 MUC3基因 肽聚糖
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稻曲病菌T-DNA插入突变菌株B1241侧翼基因克隆
《中国农业科学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)致病力减弱的T-DNA插入突变菌株B1241的生物学性状和致病力,并结合分子生物学手段研究其T-DNA插入位点的侧翼基因,以解析突变基因在稻曲病菌生长和致病过程中的作用,从而为阐明稻曲病菌致病机制提供理论基础。【方法】以野生菌株P1作为对照,观察并检测突变菌株B1241的菌落形态、生长速率、孢子形态、产孢量等生物学性状;采用注射接种的方法将菌丝和孢子的混合液接种于水稻穗苞中,统计每穗发病的病粒数,分析B1241的致病性变化;突变菌株B1241在不含有潮霉素的PSA平板上转接5代之后,PCR检测T-DNA插入的稳定性并通过Southern杂交分析B1241中T-DNA插入的拷贝数;利用Hi Tail-PCR获得T-DNA插入位点的侧翼序列,经NCBI比对得到侧翼基因;运用RACE-PCR克隆插入位点侧翼基因全长;q RT-PCR分析侧翼基因的表达情况。【结果】经生物学特性观察及田间接种发现,与野生菌株P1相比,突变菌株B1241在固体培养基MM、PSA和TB3上的菌落和孢子形态以及生长速率无显著差异,其致病力、产孢能力均呈极显著下降。B1241在不含潮霉素的PSA平板上转接5代之后,仍能扩增到GFP和HPH基因,说明T-DNA已经稳定地插入到其基因组中。Southern杂交结果显示T-DNA在该突变菌株中以单拷贝的形式插入。经扩增并比对侧翼序列,T-DNA的插入位点处少了28 bp的稻曲序列,有37 bp在T-DNA及稻曲病菌基因组中都没有比对到。NCBI比对发现,侧翼基因Uvt-1241与UV-8b菌株的UV8b-7878基因同源,开放阅读框长2 317 bp,包含81和106 bp的2个内含子,编码709个氨基酸。经RACE-PCR获得基因全长2 650 bp,5'非编码区长度为14 bp,3'非编码区长度为319 bp。T-DNA插入在基因Uvt-1241的启动子区域,位于起始密码子之前516 bp处。q RT-PCR分析结果表明,Uvt-1241在该突变体中表达量下降。该基因编码一个糖基水解酶18家族的蛋白,同时含有一个保守结构域D××D×D×E。【结论】稻曲病菌突变菌株B1241中,T-DNA插入到基因Uvt-1241的启动子区域,从而导致该启动子功能部分缺失,基因表达量下降,使得突变菌株的生长、产孢等生物学特性及致病力发生改变,由此推测该基因可能在稻曲病菌生长及致病过程中起着重要的作用。
关键词： 稻曲病菌 T-DNA 致病力 糖基水解酶18家族 基因克隆
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贮藏时间、温度及PEG胁迫对云南杜鹃种子萌发的影响
《江苏农业科学 》 2016 北大核心
摘要：以云南杜鹃种子为材料,研究不同贮藏时间、不同萌发培养温度及不同浓度聚乙二醇(PEG)模拟干旱胁迫对云南杜鹃种子发芽启动时间、萌发高峰期、发芽持续时间、发芽率、发芽势、发芽指数的影响。结果表明,云南杜鹃种子无休眠特性,常温下随贮藏时间的延长,发芽启动时间延迟,发芽持续时间延长,发芽率、发芽势、发芽指数显著下降;温度越低,云南杜鹃种子发芽启动时间越长、发芽持续时间越长,适宜云南杜鹃种子萌发的温度为20~25℃;5%~25%PEG浓度范围内,随干旱胁迫程度的加深,云南杜鹃种子的发芽启动时间延迟,发芽持续时间延长,发芽率、发芽势和发芽指数显著降低,25%PEG胁迫下未现种子萌发;杜鹃种子萌发的PEG胁迫半致死浓度为15.87%。
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H3N2亚型犬流感病毒与伪中间葡萄球菌的体外共感染研究
《中国兽医科学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为了研究犬流感病毒(CIV)与伪中间葡萄球菌(Sp)对犬肾细胞(MDCK)的共感染作用,利用犬流感病毒、伪中间葡萄球菌和犬肾细胞,建立并优化了病毒-细菌体外细胞共感染模型。试验分4组:病毒单独感染组(CIV)、细菌单独感染组(Sp)、感染病毒后第12小时再感染细菌组(CIV/Sp)及空白对照组(C)。结果显示,病毒感染后第24小时,CIV/Sp组的细胞毒性为39.7%,极显著高于CIV组和Sp组(P<0.001);CIV/Sp组病毒RNA载量显著低于CIV组(P<0.001)。细菌黏附和侵袭试验表明,细菌感染后第4小时,CIV/Sp的黏附和侵袭量极显著高于Sp组(P<0.001),侵袭量升高20倍。细菌感染后第6小时,CIV/Sp组IL-6、TNF-α的表达量均极显著高于其他3组(P<0.001)。研究结果表明,犬流感病毒的预感染增强了伪中间葡萄球菌对体外培养细胞的继发感染。
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石榴籽油自由基清除能力及对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用
《中国食品学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：以吩嗪硫酸甲酯-还原型辅酶I-氮蓝四唑(PMS-NADH-NBT)系统产生超氧阴离子自由基和羟基自由基诱导DNA及蛋白质氧化损伤为模型,考察石榴籽油对超氧阴离子自由基的清除能力以及对DNA和蛋白质氧化损伤的保护作用。通过建立H2O2诱导PC12细胞损伤氧化应激损伤模型,采用甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率和细胞损伤程度,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)试剂盒测定细胞的氧化应激变化,研究不同浓度石榴籽油对H2O2刺激的PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:石榴籽油清除自由基的能力以及对DNA和蛋白质损伤的保护作用随着石榴籽油浓度的升高而增强。石榴籽油在0.5~4 mg/m L质量浓度范围能显著提高H2O2损伤的PC12细胞存活率,显著减少H2O2刺激的PC12细胞中MDA的生成,提高SOD活力及CAT活性。石榴籽油在体外具有清除自由基,减轻羟基自由基诱导DNA及蛋白质氧化损伤以及保护PC12细胞对抗氧化损伤的作用。
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基于文献计量的国内外茅苍术研究态势分析
《江苏农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为做好茅苍术研究的跟踪溯源,更好地开展综合利用和保护工作,以文献计量学的方法为基础,以CNKI和SCI为数据源,综合利用数据挖掘、社会网络、可视化展示、信息组织、信息分析等方法,借助于TDA、JAVA、Ucinet、Det Draw和Excel等工具,对国内外茅苍术研究的产出、影响力、作者、机构、学科、重点、热点等问题进行了综合分析和展示。结果表明,茅苍术研究的重点集中于医药领域和农业领域,研究热点是药理药性和成分提取分析,国内外研究侧重点有所区别。
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17β-雌二醇胁迫对青菜种子萌发和幼苗生理特性的影响
《西南农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：以青菜为材料,研究了不同浓度17β-雌二醇处理下,对青菜种子萌芽和幼苗生长、抗氧化酶活性以及17β-雌二醇在幼苗中累积的影响。结果表明,青菜种子的发芽势、发芽率和根长同17β-雌二醇处理浓度呈反比,17β-雌二醇对种子萌发和幼苗生长有抑制作用;低浓度17β-雌二醇胁迫激发细胞抗氧化酶系统(10~50μg/L),超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性随着胁迫浓度的提高而上升,当胁迫浓度在50~100μg/L时,SOD和POD活性均不同程度地下降;随着17β-雌二醇处理浓度的增加,幼苗中丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro)含量呈增加趋势;幼苗根部17β-雌二醇累积量大于地上组织,并与处理浓度正相关。
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锌肥施用量对大蒜产量、品质及矿质元素含量的影响
《江苏农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：Zn是植物生长必需的微量元素,土壤中Zn含量多少影响作物的生长、产量及品质。本研究通过田间试验和室内测定,分析锌肥(ZnSO_4·7H_2O)不同施用量对大蒜产量及VC和蛋白质含量的影响,并对大蒜中18种矿质元素含量进行测定分析,探讨锌肥的最佳施用量。结果表明,适量施用锌肥,能提高大蒜产量,增加大蒜中VC和蛋白质的含量;大蒜中Zn含量随锌肥施用量的加大而增加;大蒜中Zn含量与K、P及Cd含量呈显著相关;过量施用锌肥抑制大蒜产量形成,并引起大蒜中有害重金属镉的积累。从大蒜产量、品质、矿质元素含量等方面综合考虑,本试验土壤中大蒜最佳锌肥(ZnSO_4·7H_2O)施用量为10.0 kg/hm~2。
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设施栽培对香沙芋生长、产量构成及商品性的影响
《江苏农业科学 》 2016 北大核心
摘要：通过监测大棚内外环境温度、观测生育进程、测定芋头产量构成和品质等指标,对靖江香沙芋露地栽培(对照)和大棚错时栽培(两季错行种植)进行栽培比较试验。结果表明:大棚2月份平均温度大于15℃,适宜香沙芋的错时栽培;错时栽培香沙芋的生育周期分别为209、216 d,大于露地栽培(193 d);在相同栽培密度下,错时栽培比露地单季栽培总增产35.42%,其中子孙芋增产21.60%;香沙芋错时栽培上市时期能前后延长2个多月;香沙芋延迟收获能增产,但提早上市价格高,效益更好。
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