科研产出
RP-HPLC法测定不同花生根中白藜芦醇的含量
《浙江农业科学 》 2009
摘要:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC法)测定不同产地和品种花生根中白藜芦醇含量的方法。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18柱,以乙腈∶水(26∶74)为流动相,流速1 mL.min-1,检测波长为303 nm,外标法定量。结果白藜芦醇在0.044~0.528μg范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.998,平均回收率96.95%,精密度RSD(相对标准偏差)为1.2%。结果表明该法简便,快速,适用性好。
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Os WRKY80基因参与调控水稻抗病反应研究
《上海农业学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:为进一步了解Os WRKY80基因参与调控的抗病分子机理,对Os WRKY80增强表达转基因水稻和干涉转基因水稻进行稻瘟病抗性检测,Northern杂交分析Os WRKY80基因和PR基因(ZB8、PBZ1)稻瘟病接种0 h和24 h时的表达情况。结果表明:与干涉转基因水稻和未转基因对照相比,增强表达转基因水稻表现出对稻瘟病有较好的抗性。Northern杂交结果显示,在干涉转基因植株中内源Os WRKY80基因的诱导表达被抑制,转基因植株的抗病性与Os WRKY80基因的表达呈一定的正相关性。在干涉转基因植株中均未检测到ZB8和PBZ1的表达,稻瘟病诱导24 h时,未转基因植株和增强转基因植株中均能检测到ZB8、PBZ1诱导型表达,但在增强转基因植株中ZB8、PBZ1的诱导表达丰度要显著高于未转基因植株。这表明Os WRKY80基因可能作为正调控因子参与水稻防卫反应,PR基因的高水平诱导表达导致增强表达转基因植株对稻瘟病的抗性增强。
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不结球白菜品种自交不亲和S基因型的鉴定
《科技通报 》 2009 北大核心
摘要:为给不结球白菜的品种配置和遗传育种提供理论基础,利用特异性PCR扩增、DNA测序和生物信息学方法鉴定了7个自交系的S基因型.PCR扩增结果表明,51-14、375-124、711-114、884-214等4个自交系的基因型为Class-ⅠSLG和SRK,表现为自交强不亲和。523-112和544-312的基因型为Class-ⅡSLG类型,表现为自交若不亲和,和田间试验结果一致。测序结果blast分析表明844-214Class-Ⅰ型和Brassica rapa SLG56的相似性为99%,51-14的SRK PCR与SRK56的同源性达到100%。
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兔出血症病毒感染性cDNA真核表达载体的构建与鉴定
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:【目的】构建操作更简便的兔出血症病毒(RHDV)感染性cDNA真核表达载体。【方法】在前期构建的RHDV感染性克隆基础上,将其全长cDNA分子分为3段,利用单一的限制性内切酶将其依次克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建RHDV感染性cDNA真核表达质粒,将该质粒转染BHK-21细胞,传3代后,对产生明显细胞病变的细胞冻融液进行RT-PCR检测。【结果】RHDV感染性cDNA真核表达载体构建成功。构建质粒转染的BHK-21细胞出现明显细胞病变,RT-PCR检测结果表明,RHDV拯救成功。【结论】利用真核表达载体可以很方便地拯救出RHDV。
硅对水稻防御性关键酶活性的影响及其与抗稻瘟病的关系
《植物营养与肥料学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:通过室内溶液培养试验,研究了硅酸盐对接种稻瘟病菌后水稻的病情指数、植株生物量、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响。结果表明:施硅能显著降低水稻稻瘟病的发病率和病情指数,防治效果达60.59%;显著减轻稻瘟病对水稻地上部的危害,干物质量显著高于不施硅处理,但对地下部生长影响不明显;接种后水稻叶片POD活性均升高,在第5 d达到最大值,施硅处理显著低于不施硅处理,与稻瘟病抗性成负相关;水稻叶片PPO活性在接种后第5 d达到峰值,从第4 d开始施硅处理显著高于不施硅处理;接种后水稻叶片的PAL活性快速升高,在第24 h达到最大值,施硅处理显著高于不施硅处理,是其1.44倍。说明硅能提高防御性关键酶的活性,参与水稻本身防卫机制,通过一系列的生理生化作用来增强水稻的抗性。
常用杀虫剂和杀菌剂对褐飞虱类酵母共生菌生长的影响
《植物保护 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:本文研究了常用杀虫剂和杀菌剂对褐飞虱类酵母共生菌生长的影响。结果表明,10%吡虫啉可湿性粉剂、48%毒死蜱乳油、10%溴氰菊酯乳油、25%噻嗪酮可湿性粉剂、1.2%印楝素乳油、75%百菌清可湿性粉剂、20%三环唑可湿性粉剂的5001、000、2 000倍液处理后共生菌的生长(菌落数量)显著减少,共生菌的假菌丝生长不舒展,有所萎缩,酵母多形成空泡。浓度越高、共生菌生长受到抑制越显著。低浓度(常规推荐剂量及以下)井冈霉素对共生菌生长影响较小,而高浓度(2倍常规推荐剂量)处理影响很大。这说明常用杀虫剂和杀菌剂农药对褐飞虱类酵母共生菌的生长均有较大的抑制作用。
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牛Ⅰ型疱疹病毒感染性细菌人工染色体的构建和gN基因缺失病毒的细胞繁殖特性
《科学通报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:通过同源重组将pHA2质粒插入到牛Ⅰ型疱疹病毒ZJ分离株基因组的UL15和UL18基因之间,构建了重组病毒rBHV1-HA;提取重组病毒的环状基因组DNA,转化大肠杆菌DH10B,获得了含有BHV1全基因组的感染性细菌人工染色体克隆pBHV1.pBHV1转染MDBK细胞可以拯救出病毒,该病毒与野生毒株在细胞上的繁殖特性未见差异.通过两步Red E/T重组,构建了gN基因跨膜区缺失的pBHV1突变体,并转染获得了重组病毒rBHV1-△gN.病毒繁殖动态曲线显示,rBHV1-△gN的滴度比野生毒株低9%~20%.BHV1感染性克隆的成功构建,将为研究新型BHV-1基因缺失疫苗和牛的病毒载体疫苗提供技术平台.
关键词: 牛Ⅰ型疱疹病毒 感染性克隆 细菌人工染色体 囊膜蛋白gN UL49.5
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