科研产出
转几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶双价基因小麦的获得和鉴定
《作物学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：利用农杆菌介导法将几丁质酶基因和β1,3 葡聚糖酶双价基因导入小麦品种扬麦10号和Bobwhite ,共得到了13株T0 代转基因植株,2个小麦品种的转化效率分别为1 .4 %和1. 0 %。T1 代植株赤霉病抗性鉴定结果表明,转基因植株对赤霉病具有一定抗性,小穗发病率4 .76 %～11. 76 % ,低于抗病对照和感病对照。T1 代植株分子检测结果表明,外源基因分离比例为2. 33∶1,较低的分离比例可能与外源基因的丢失有关。
关键词： 小麦 几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因 农杆菌 转基因 赤霉病
鸭H9亚型禽流感油乳剂灭活疫苗的免疫原性
《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：对从发病雏鸭体内分离到的H9亚型禽流感病毒NJ01株[A/Duck/Nan jing/01/1999(H9N2)]进行了免疫原性研究。以含有108.0ELD50和108.5ELD50的NJ01进行静脉注射攻击无H9亚型禽流感抗体的26日龄、44日龄和140日龄鸭,结果显示,对小于44日龄和大于44日龄鸭分别以108.0ELD50和108.5ELD50病毒含量的NJ01株静脉攻击,攻毒后1~2 d的喉拭子病毒分离率均为80%以上。将病毒含量为107.9ELD50的NJ01株油乳剂灭活苗,肌肉途径免疫8日龄和28日龄鸭,在免疫后的第7 d、14 d和21 d用含108.0ELD50和108.5ELD50的NJ01静脉注射攻击,攻毒后取1~2 d喉拭子进行病毒重分离,结果表明,免疫后7 d产生抗体,14 d产生坚强免疫力,21 d相对保护率达100%。
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转PEPC基因水稻对光氧化逆境的响应
《作物学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：为了解析转PEPC基因水稻的光保护机制,比较了转磷酸烯醇式丙酮羧化酶基因水稻(PEPC基因)和未转基因原种(WT)在夏季晴天10 :0 0时和14 :0 0时(光强最强,气温最高)的净光合速率(Pn)、原初光化学效率Fv Fm 、超氧阴离子(O- ·2 )的产生速率以及膜脂过氧化物丙二醛(MDA)的变化,着重研究了自然条件(连体叶片)、人工光氧化(叶圆片浸于蒸馏水)、经外源甲基紫精(MV)处理的连体叶片和叶圆片浸于5mmol LMV溶液中,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的日变化。结果表明,与原种WT相比,转PEPC基因水稻,随光氧化逆境的加剧,SOD和POD诱导活性逐步增强,O- ·2 的产生速率较低,MDA积累较少,维持较稳定的PSⅡ活性和光合能力,表现耐光抑制(光氧化)。可见,与原种相比,转PEPC基因水稻的光氧化耐性与其叶内较高的SOD和POD活性,较稳定的光合速率,PSⅡ活性以及较低的O- ·2 和MDA积累密切相关。
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转C_4光合基因水稻及其在育种中的应用
《分子植物育种 》 2005 CSCD
摘要：按光合作用途径可将植物分为C3植物、C4植物和CAM植物,由于C4植物在高光强、高温和高氧分压的条件下,比C3植物具有较高的光合效率,作物生理和育种学家就试图用C4光合途径改造C3作物,以提高主要农作物如稻、麦和大豆等光合生产力,但通过常规杂交的方法难以奏效。近年来,随着分子生物学的兴起和植物转基因技术的快速发展,许多与C4光合作用途径相关的关键酶PEPC、NADP-苹果酸(NADP-ME)和PPDK等一系列基因已从玉米、高粱和苋菜等C4植物中被克隆,对这些基因启动子序列分离、重组、转化及表达的研究,发现它们可以在C3植物中驱动外源基因并进行组织特异性表达,而且一系列C4型光合基因导入C3植物的成功报道。特别是获得高表达的转C4光合基因水稻,表现光合能力和种子产量显著提高,而且在光逆境的条件下,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性提高,从而有效地清除活性氧分子,表现耐光抑制(氧化)等。目前利用转C4光合基因水稻的育种研究也取得了重要进展,培育出携带C4光合基因的高光效水稻株系,在遗传上证明了常规育种和生物技术结合可以将转C4光合基因水稻中高表达的C4光合基因遗传给后代,获得高光效的超级稻,最后提出了本研究中尚需深入研究的问题。
关键词： C4光合基因 光合作用 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 水稻 育种
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基肥结合喷氮对冬小麦产量和品质及植株氮素状况的影响
《麦类作物学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：为了给小麦高产、优质栽培和育种提供理论依据,就不同基肥水平结合叶面喷氮对不同类型冬小麦品种的产量、品质及植株氮素状况的影响进行了试验研究。结果表明,施用基肥并结合生育后期叶面喷氮能显著提高籽粒粗蛋白含量和产量,无基肥区喷氮的作用显著大于施基肥区的;施基肥结合喷氮对籽粒赖氨酸无明显作用;施基肥区喷氮降低了籽粒容重。提高产量改善品质的最佳喷氮时期一般在开花期,但因品种类型、基肥基础而不同,春性品种无基肥区最佳喷氮时期提早到抽穗期,而施基肥区则推迟到灌浆期。通过对植株硝酸还原酶活性及粗蛋白含量的分析,叶面喷氮能否使灌浆开始后植株顶三叶硝酸还原酶活性出现峰值、激发顶三叶含氮物运入籽粒,使籽粒蛋白质稀释得到抑制或补偿,与其对籽粒粗蛋白含量和产量作用的大小密切相关。
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番茄内生菌102菌株的促生作用研究
《土壤肥料 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：通过种子发芽、小麦芽鞘切断伸长、盆栽及微区试验对番茄内生菌102的促生作用进行测定。结果表明:经102菌稀释液处理的青菜、番茄种子的发芽率及根长显著提高;同样,稀释50至200倍的102菌发酵液可以促进小麦芽鞘切断的伸长,增长率达11%以上;盆栽结果表明使用102菌可以提高青菜和菠菜的鲜重达36%、19%,株高、叶数、叶宽、叶长等各项指标也均显著提高;微区试验结果:经102菌处理的青菜产量比对照增加39%,单株鲜重增加30%,差异达极显著水平;以上结果表明102菌促生作用明显。
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转几丁质酶和β-1;3-葡聚糖酶基因提高棉花对枯萎病和黄萎病的抗性
《中国农业科学 》 2005 CSCD
摘要：枯、黄萎病是世界棉花生产中的两大重要病害。传统育种缺乏抗源,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶是植物防御体系中的两种防卫因子,两者之间存在协同增效作用。据此构建了4个单价和2个双价基因(分别定位于细胞内或细胞外)的植物表达载体,通过花粉管通道法转化棉花,经PCR和Southern杂交检测以及1996～2000年温室及病圃多代筛选鉴定,已培育出对枯、黄萎病抗性提高的转基因棉花株系。将抗病基因导入国产抗虫棉品种GK19中,还获得了兼抗病、虫的转基因优系。
关键词： 几丁质酶基因 β-1,3-葡聚糖酶基因 转基因棉花 枯、黄萎病抗性
表面活性剂对生物农药纹曲宁抑菌活性和防病效果的影响
《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：纹曲宁分别与9种不同的表面活性剂组合混用,通过测定制剂中的活菌含量和制剂对水稻纹枯病菌的活性,筛选出5种不影响枯草芽孢杆菌活性的表面活性剂组合A、B、C、D和E。纹曲宁分别与这5种表面活性剂按重量比100∶3混配后,降低了药剂稀释液的表面张力,在1∶500倍的稀释液中,表面活性剂达到和超过了临界胶束浓度,增加了枯草芽孢杆菌在水稻表面的滞留量。田间试验结果表明,纹曲宁中加入适宜的表面活性剂后,能提高纹曲宁对水稻纹枯病的防治效果。
关键词： 表面活性剂 纹曲宁 枯草芽孢杆菌 抑菌活性 防病效果
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农杆菌介导法获得草地早熟禾转Bt基因植株
《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：以草地早熟禾品种超级伊克利成熟种子为外植体材料,当愈伤组织诱导培养基中琼脂的用量增加至16g/L时,诱导产生的颗粒状胚性愈伤组织占愈伤组织总数的40%以上。愈伤组织经携带pGBI4AB农杆菌LBA4404的感染和共培养后,在继代培养基上添加50mg/L筛选剂G418,可较好地筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织,进而获得具有卡那霉素抗性的再生植株。PCR分子检测结果表明,Bt基因已导入转化植株。生物学抗虫性鉴定结果显示,转Bt基因当代植株对1～2龄棉铃虫具有不同程度的抗性。
关键词： 草地早熟禾 颗粒状胚性愈伤组织 农杆菌介导 转Bt基因植株 抗虫性
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马立克氏病病毒gB与IL-2融合基因载体的构建及表达
《南京农业大学学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：根据已发表的马立克氏病病毒(MDV)血清I型与鸡白介素2(IL2)DNA序列,设计两对引物,用PCR扩增出MDVgB基因和IL2基因,并克隆入pEGFPC1载体,构建了载体pC1gBIL。通过酶切分离外源基因表达盒,并将外源基因表达盒插入pTK2B质粒,成功构建了转移载体pTCgBIL。将转移载体pTCgBIL转染CEF细胞,培养36～48h后,经荧光显微镜观察,有荧光出现,证明该载体得到表达,并通过Westernblotting鉴定证明MDVgB和IL2的融合基因得到了有效的表达。
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