地芽孢杆菌Geobacillus sp.GXS1α-淀粉酶的饱和突变及酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 薛蓓

作者: 裴建新;王治宾;罗章;韦宇拓

作者机构:

关键词: 地芽孢杆菌;α-淀粉酶;酶学性质;饱和突变

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2013 年 0 卷 10 期

页码: 153-159

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用半理性设计方法,在网站Geno3D上以PDB数据库中B.stearothermophilus麦芽糖淀粉酶(BSMA)的三维结构为模板,对AMY(α-淀粉酶)进行三维结构同源建模(二者氨基酸的同源性为33%)。比较同源建模预测的3D结构和模板BSMA的3D结构关键位点,在此基础上通过计算机辅助设计软件ProSa2003,根据能量变化确定了AMY三个饱和突变位点:D192、E221和D289。利用兼并引物对AMY的假定活性中心位点D192、E221和D289的氨基酸分别进行饱和突变,定点(饱和)突变库筛选得到4个有活力的突变子D192A、E221N、E221L和D289L,并对突变酶的酶学性质进行初步研究。

分类号: O629.8

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