尼罗罗非鱼MyD88基因荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王倩

作者: 王倩;邹芝英;李大宇;祝璟琳;肖炜;杨弘

作者机构:

关键词: 尼罗罗非鱼;MyD88;β-actin;实时荧光定量PCR;2-ΔΔCt分析方法

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2012 年 28 卷 05 期

页码: 92-97

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了准确分析尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)髓样分化因子(myeloid differentiation factor88,MyD88)在天然免疫反应中的作用,根据MyD88EST序列(GenBank登录号:GR679416.1)和β-actin基因序列(GenBank登录号:AB037865.1),分别在保守区域设计并合成引物。实验利用5倍系列稀释的尼罗光罗非实鱼时肝定脏量cPDCNRA检样测品方构法建。标应准用曲2线-ΔΔ并Ct分进析行方融法解初曲步线检分测析了,建尼立罗尼罗罗非罗鱼非肝鱼脏M、脾yD脏88、的血S液Y和BR肌G肉re等en不Ⅰ荧同组织中的MyD88相对表达量。扩增结果表明,MyD88和β-actin基因标准曲线CT值检测范围分别为24~35和19~30,扩增效率分别为100%和96.7%,相关系数分别为0.998和0.995;熔解曲线分析显示产物均形组织成肝单脏一、特脾异脏峰和,血Tm液值中分高别丰为度78表.5达℃和。77.5℃。定量分析结果显示,MyD88基因在参与机体免疫的相关

分类号: S917.4

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