Asia1型口蹄疫病毒分离株P1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张中旺

作者: 张中旺;张永光;王永录;潘丽;张昱

作者机构:

关键词: 口蹄疫病毒;衣壳蛋白前体P1;原核表达;多克隆抗体

期刊名称: 中国人兽共患病学报

ISSN: 1002-2694

年卷期: 2009 年 25 卷 10 期

页码: 973-976

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的原核表达口蹄疫病毒Asia1/HeB株衣壳蛋白前体P1基因并纯化。制备其兔多克隆抗体并进行鉴定。方法从重组克隆载体pGEM-P1中扩增编码P1区结构蛋白的基因片段。并克隆入原核表达载体pET-28a(+)中。原核表达与蛋白纯化后,免疫新西兰兔,制备P1蛋白抗血清。抗体效价及特异性检测分别用间接ELISA和Westernblot法鉴定。结果在大肠杆菌中成功表达了分子量约为80.475kDa的P1蛋白。ELISA法检测抗血清的效价可达到1∶25600,Westernblot分析抗血清可与原核表达的P1蛋白特异性结合。结论在大肠杆菌中成功表达了口蹄疫病毒Asia1/HeB株衣壳蛋白前体,并制备了P1衣壳蛋白前体的抗血清,为进一步研究P1区结构蛋白的结构、功能以及抗原表位的确定奠定了基础。

分类号: R373

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