旋毛虫肌幼虫ES Ag单克隆抗体的制备与特性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李学伍

作者： 李学伍;杨艳艳;王自良;肖治军;柴书军;张改平

作者机构：

关键词： 旋毛虫;单克降抗体;排泄分泌抗原;免疫吸附试纸条

期刊名称： 中国兽医寄生虫病

ISSN： 1005-0868

年卷期： 2008 年 16 卷 01 期

页码： 7-11

摘要： 目的获得能够用于制备旋毛虫病快速检测试纸条的ES Ag的单克隆抗体。方法应用旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原(ES Ag)免疫诱导Balb/c小鼠,使小鼠产生较强的免疫应答,将免疫小鼠的脾细胞与NS0瘤细胞融合,利用ES-45、ES-49抗原通过间接ELISA对大量杂交瘤细胞培养上清的筛选,筛选出分泌高亲和力单克隆抗体的4株杂交瘤细胞。结果ES-45和ES-49(分子质量分别为45ku,49ku)分别被Ts-2D4、Ts-4C5和Ts-4H6、Ts-2G8单克隆抗体识别,与猪肺丝虫(M etastrongylus pudendotectus.MP)、囊虫(Cysticercus cellulosae,CC)、细颈囊尾蚴(Cysticercus tenuicollis,CT)、蛔虫(Ascaris suum,AS)、弓形虫(Toxoplasma gondii,TG)、住肉孢子虫(Sarcocystism iescheriana,SM)抗原反应测试表明,4株单抗与参试抗原均无交叉反应,所有单抗上清ELISA平均效价为1∶1 120,腹水ELISA平均效价为1.1×106,亲和力常数的平均值为6.12×109L/mol。以金标免疫吸附试纸条原理为基础,利用制备的单抗成功研制了旋毛虫病快速检测试纸条,操作快速、无需设备及试剂,可以作为旋毛虫病的实时监测工具。结论ESAg单抗用于制备旋毛虫病快速诊断试纸条是理想的试剂。

分类号： R392

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