梅花鹿S100A4基因RNAi重组慢病毒载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 魏明立

作者： 魏明立;褚文辉;赵海平;王大涛;孙红梅;李春义

作者机构：

关键词： 鹿茸;S100A4基因;293T;慢病毒载体;RNAi

期刊名称： 兽类学报

ISSN： 1000-1050

年卷期： 2012 年 32 卷 04 期

页码： 335-339

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究针对东北梅花鹿S100A4基因筛选出若干条RNAi靶位点,并利用NCBI中的BLAST工具去除脱靶情况,最终得到2条高分靶位点。然后在T4连接酶的作用下,将其与载体质粒pLVTHM的酶切产物进行连接,并通过PCR鉴定及测序筛选出阳性质粒。pLVTHM阳性重组质粒与pMD2.G及pCMV-dr8.91共转染到293T细胞中。在倒置荧光显微镜下观察转染效果并进行收获病毒质粒。结果显示在转染24h后,在293T细胞中观察到了绿色荧光。本研究成功构建出针对梅花鹿S100A4基因的慢病毒载体,为以后进一步研究S100A4基因在鹿茸再生中的具体功能与机制打下了基础。

分类号： Q78`S825

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