在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白
文献类型: 中文期刊
第一作者: 郭军庆
作者: 郭军庆;金宁一;毛春生;郭志儒;尹凤阁;殷震
作者机构:
关键词: 人Ⅰ型免疫缺陷病毒;p24蛋白;表达;大肠杆菌
期刊名称: 中国人兽共患病杂志
ISSN: 1002-2694
年卷期: 1998 年 06 期
页码: 11-15
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV—1)衣壳蛋白p24,为制备抗p24单克隆抗体及其诊断杭原奠定基础。方法将编码HIV—1p24蛋白的P24(gag)基因片段,克隆到原核表达载体PET—17b的T7噬菌体启动子下游,构建重组表达质粒;转化大肠杆菌BL2(DE3),IPTG诱导表达,表达产物以SDS-PAGE、Westernblotting及点免疫印迹分析。结果构建成功重组表达质粒pET24,经IPG诱导,p24(gag)基因片段在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,产物为30kDa的810—p24融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的38.4%;重组p24蛋白均与抗p24单克隆抗体及HIV—1阳性血清发生特异性反应。结论重组P24蛋白具有较好的免疫活性,是制备抗P24单克隆抗体及诊断试剂的理想抗原。
分类号: R378
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