靶向FMDV受体猪源整联蛋白α_V亚基基因抑制FMDV复制的最佳siRNA筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 骆继怀

作者： 骆继怀;独军政;高闪电;张国锋;常惠芸

作者机构：

关键词： FMDV;siRNA;转染;PK-15细胞;αV亚基基因;病毒滴度

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2011 年 42 卷 12 期

页码： 1732-1737

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 筛选靶向FMDV受体猪源整联蛋白αV亚基基因抑制FMDV复制的最佳siRNA。根据猪源αV mRNA序列,设计并合成siRNA,Lipofectamine 2000转染siRNA于PK-15细胞,利用qRT-PCR检测RNAi组(iαV-480、iαV-1719和iαV-2077)、空白组(Mock)和阴性对照组(Control)中αVmRNA表达情况;在转染siRNA12h后通过接种100TCID50,收集病毒液,测定TCID50,确定其抗病性变化。结果显示,瞬间转染PK-15后,与阴性对照组和空白组相比,3个RNAi组均不同程度抑制αV亚基基因表达,在24hiαV-480组在mRNA水平抑制90.1%,作用最明显。TCID50测定表明iαV-480组有较低的病毒滴度,说明其抗病性增加。针对猪源整联蛋白αV亚基基因的最佳siRNA的筛选成功,为深入研究干扰FMDV受体抗FMDV转基因路线奠定了基础。

分类号： S852.659.6

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