口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体(MAb)的制备及基于MAbELISA方法的初步建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李超斯

作者： 李超斯;周国辉;孙静;刘云;于力

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;3B重组蛋白;MAb;ELISA

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2014 年 36 卷 06 期

页码： 448-452

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立区分口蹄疫病毒(FMDV)疫苗免疫和自然感染动物的血清学鉴别检测方法,本研究采用杆状病毒表达的FMDV非结构蛋白3ABC免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,并以原核表达的FMDV非结构蛋白3B作为抗原筛选融合细胞的培养上清液,获得一株稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞。经间接免疫荧光鉴定其为一株抗FMDV非结构蛋白3B的特异性MAb,为IgG1/κ亚类,间接ELISA检测杂交瘤细胞上清液和腹水的抗体效价分别为1∶12 800和1∶106。硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为1.5 mol/L。采用该MAb作为包被抗体并特异性的结合原核表达的3B重组蛋白用于检测血清中抗FMDV的非结构蛋白抗体,初步建立了以MAb为基础的ELISA方法。其MAb包被浓度为5μg/mL,3B重组蛋白浓度为1.1μg/mL,被检血清1∶100稀释,通过检测猪血清并与3B间接ELISA和prioCHECKRNSP ELISA试剂盒进行比较,表明该方法具有更强的特异性。

分类号： S852.65

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